采用石墨炉原子吸收光谱法测定不同乳制品中的铅

2013年1月，享誉全球的新西兰牛奶及奶制品被检测出含有低含量的有毒物质二氰二氨，新西兰政府已经下令禁售含有二氰二氨的奶类产品；新西兰农民普遍会在牧场使用二氰二氨，其目的是防止硝酸盐等对人体有害的肥料副产品流入河流或湖泊。新西兰两大肥料公司已经停止出售并召回二氰二氨产品，直至政府查出残留二氰二氨的来源；美国食品和药物管理局将双氰胺添加到安全性待检测物质名单，虽然国际标准未对食品中的双氰胺限量，但高剂量的双氰胺对人体是有毒的。

二氰二氨（俗称双氰胺），缩写DICY或DCD，是氰胺的二聚体，也是胍的氰基衍生物。化学式C2H4N4，白色结晶粉末，可溶于水、醇、乙二醇和二甲基甲酰胺，几乎不溶于醚和苯，不可燃，干燥时稳定。在分析过程中存在着很大困难，双氰胺极性非常大，传统C18色谱柱及HILIC色谱柱均难以保留，对于复杂的奶制品基质来说会与杂质共流出，影响分析目标化合物的定量和定性。

实验方法

样品前处理方法

取1g奶粉加2mL水溶解，剧烈震摇60s并超声5min至完全溶解，然后加乙腈定容至10mL混匀，并沉淀蛋白，9000转高速离心10min；取2mL上清液到100mg QuEChERs净化管，震摇1min，取1.5mL净化管中上清液用9000转高速离心5min，离心后，上清液经0.22μm滤膜过滤后直接上样分析。

仪器方法

UPLC-TQD方法

仪器：ACQUITY UPLC-TQD系统；

流动相A：10mmol/L乙酸铵；

流动相B：乙腈；

色谱柱：ACQUITY UPLC? BEH HILIC 1.7μmx2.1mmx50mm；

流速：0.2mL/min；

柱温：30℃；

进样体积：2μL。

梯度曲线（见表1）

实验结果

双氰胺标准曲线（配置0.05ppb，1ppb，5ppb，10ppb，20ppb，50ppb浓度双氰胺加奶粉基质标准溶液，每个点重复进样3针，根据检测结果获得如下标准曲线）。

本实验在未添加同位素内标的情况下，空白基质添加50ppb样品浓度，测得双氰胺平均回收率为88%。

结论

本文采用沃特世超高效液相色谱UPLC?与高灵敏度三重四极杆Xevo TQD，开发了分析奶粉中双氰胺的检测方法，此方法建立在HILIC机理的BEH色谱柱上。对基质中添加50ppb的待测物，经过QuEChERs净化后进样，不但峰形良好、不受基质干扰影响，灵敏度也完全满足检测要求。为了达到快速、高效的分析目的，本文采用QuEChERs净化管，样品经简单的蛋白沉淀后加入到QuEChERs净化管中净化，之后直接进样即可，无需挥干复溶。方法简单、快速，尤其对于大批量样品的检测，该方法可以大大提高分析效率。

在LCMSMS方法开发中，杂化颗粒的HILIC模式色谱柱起到了很大作用，首先待测物均为极性化合物，反相色谱无法保留，HILIC提供了一个互补的选择。其次在众多HILIC模式色谱柱中，BEH色谱柱为杂化颗粒技术，pH耐受范围广（pH1～10），为方法开发提供了更大的空间，且BEH在此应用中具有更好的选择性和峰形。