支气管肺泡灌洗液中3种肿瘤标志物的检测在肺癌诊断及病情评估中的价值

崔显念

湖北省恩施土家族苗族自治州民族医院检验科，湖北恩施 445000

支气管肺泡灌洗液中3种肿瘤标志物的检测在肺癌诊断及病情评估中的价值

崔显念

湖北省恩施土家族苗族自治州民族医院检验科，湖北恩施 445000

目的 研究支气管肺泡灌洗液中3种肿瘤标志物的含量对肺癌诊断及病情的评估价值。 方法 将2013年5月～2014年5月期间在我院就诊的80例肺癌患者纳入研究的观察组，将同期在我院就诊的80例肺部良性病变患者纳入研究的对照组，收集支气管肺泡灌洗液，采用荧光定量PCR法检测肿瘤标志物的mRNA含量、采用Elisa法检测肿瘤标志物的蛋白含量。 结果 （1）TNM不同分期患者支气管肺泡灌洗液中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量均高于对照组，且TNM分期越高、肿瘤标志物含量越高，差异有统计学意义（P＜0.05）；（2）TNMⅠ和TNMⅡ期患者血清中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量于对照组差异无统计学意义（P＞0.05），TNMⅢ、TNMⅣ期患者血清中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论 肺癌患者血清中肿瘤标志物含量从TNMⅢ期开始升高，支气管肺泡灌洗液中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量从TNMⅠ开始升高，BALF中肿瘤标志物含量检测有利于肺癌的早期诊断。

肺癌；支气管肺泡灌洗液；肿瘤相关抗原细胞角蛋白19片段抗原21-1；肿瘤特异性生长因子；鳞状细胞癌相关抗原

肺癌是我国发病率最高的恶性肿瘤，且近年来的发病率不断升高，寻找更为灵敏的早期诊断指标一直是临床研究的热点[1]。血清肿瘤标志物含量检测可以为肺癌的诊断提供参考，但是在肿瘤发生早期，血清肿瘤标志物含量升高并不明显，无法灵敏的对疾病做出诊断[2]。支气管肺泡灌洗液（BALF）是一种更为灵敏的采样标本，BALF中肿瘤标志物在肿瘤早期即发生改变[3]。在下列研究中，我们分析了支气管肺泡灌洗液中3种肿瘤标志物的含量对肺癌诊断及病情的评估价值。

1　资料与方法

1.1一般资料

将2013年5月～2014年5月期间在我院就诊的80例肺癌患者纳入研究的观察组，所有患者均经病理学活检确诊，其中男62例，女18例，平均年龄62.84岁；将同期在我院就诊的80例肺部良性病变患者纳入研究的对照组，其中男59例，女21例，平均年龄63.14岁。两组患者均告知研究事项并签署知情同意书，一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05）。具有可比性。

表1　两组患者支气管肺泡灌洗液及血清中的肿瘤标志物含量比较

1.2方法

1.2.1标本采集方法 采用日本Pentax公司生产的EPS3500型电子支气管镜进行支气管镜检查，将支气管镜末端置于病灶末端所在的肺叶或者支气管开口处，保证镜末端以楔形方式紧密置入，经活检口将200mL，37℃的无菌生理盐水分子缓慢注入，每次注入30～50mL，每次注入后均通过-19.95～-13.33kPa的负压吸取灌洗液，以3000r/min离心15min后收取上清液，保存于-80℃冰箱用于下一步检测。

1.2.2蛋白含量检测 采用酶联免疫吸附法检测灌洗液中肿瘤相关抗原细胞角蛋白19片段抗原21-1（Cyfra21-1）、鳞状细胞癌相关抗原（SCC）、肿瘤特异性生长因子（TSGF）含量。

1.3统计学方法

采用SPSS18.0软件录入数据，两组间比较采用t检验，不同TNM分期间比较采用方差分析、两两比较采用LSD法。

2　结果

TNM不同分期患者支气管肺泡灌洗液中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量均高于对照组，且TNM分期越高、肿瘤标志物含量越高；TNMⅠ和TNMⅡ期患者血清中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05），TNMⅢ、TNMⅣ期患者血清中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

3　讨论

支气管肺癌是临床最为常见的恶性肿瘤，在支气管肺泡上皮细胞发生恶变的过程中，恶变的细胞可以新合成或过表达某些物质（肿瘤标志物）并使患者血清及支气管肺泡表面被覆液中相应的物质含量升高，临床上也常用肿瘤标志物含量的检查来诊断疾病[4]。近年来对肺癌的相关研究表明，由肿瘤细胞合成和分泌的肿瘤标志物首先释放到病灶局部的支气管肺泡内，而后经由血液和淋巴液回流进入血液循环[5]。在肺癌的发生发展过程中，肿瘤标志物含量最先在支气管肺泡局部发生改变，而后进行血液循环并引起血清肿瘤标志物含量升高[6]。因此，血清肿瘤标志物含量在恶性肿瘤发生的早期变化并不明显，血清含量检测不利于肿瘤的早期发现；而通过肺泡灌洗的方法获取支气管肺泡灌洗液（BALF）可以检测支气管肺泡局部肿瘤标志物的含量，也有越来越多的研究报道了BALF中肿瘤标志物含量变化比血清更为灵敏，是诊断肺癌更为理想的方式[7]。

近年来，临床学者致力于探寻能够准确诊断肺癌的肿瘤标志物，且越来越多的研究表明肿瘤相关抗原细胞角蛋白19片段抗原21-1（cytokeratin 19 fragment antigen21-1，Cyfra21-1）、肿瘤特异性生长因子（TSGF）、鳞状细胞癌相关抗原（SCC）与肺癌的发生密切相关，可以作为肺癌诊断的肿瘤标志物[8]。Cyfra21-1是一类酸性蛋白，在正常上皮细胞中以寡聚物的形式广泛存在，主要位于细胞质中，而极少进入外周血液循环，当上皮细胞发生恶变时，蛋白酶被大量激活并介导Cyfra21-1脱落进入局部气道和血液循环中[9]。TSGF是一类与恶性肿瘤发生发展相关的糖类物质和代谢物的统称，由肿瘤细胞合成，并通过不同的信号通路来实现对肿瘤恶性生物学行为的调节[10]。SCC是鳞癌细胞中一类较为特殊的蛋白质，正常组织中含量极低，异常升高多见于恶变的鳞状上皮细胞[11]。

为了明确以上3种肿瘤标志物对肺癌的诊断价值，本研究分别对血清和支气管肺泡灌洗液中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量进行了检测和分析，研究结果显示：TNM不同分期患者支气管肺泡灌洗液中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量均高于对照组；而只有TNMⅢ、TNMⅣ期患者血清中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量均高于对照组，TNMⅠ和TNMⅡ期患者血清中肿瘤标志物的含量与对照组无差异。这就说明肺癌患者血清中肿瘤标志物含量从TNM者期开始出现异常，而支气管肺泡灌洗液中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量从TNM从开始出现异常，BALF中肿瘤标志物含量检测有利于肺癌的早期诊断。

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Detection of three kinds of tumor marker in bronchoalveolar lavage fluid and its value in diagnosis and assessment of lung cancer

CUI Xiannian
Department of Clinical Laboratory,National Hospital in Hubei Province,Enshi Tujia and Miao Autonomous Prefecture,Enshi 445000,China

Objective To study the contents of three kinds of tumor marker in bronchoalveolarlavage fluid and its value in diagnosis and assessment oflung cancer. Methods 80 cases of lung cancer patients in our hospital from 2013 May to 2014 May were enrolled in observation group,80 cases of benign lung lesions patients over the same period were enrolled in control group.Bronchoalveolar lavage were collected,mRNA content of tumor marker were detected by fluorescence quantitative PCR method,protein content of tumor marker were detected by Elisa method. Results (1)Cyfra21-1,SCC,TSGF content in bronchoalveolar lavage fluid of different TNM stage were different;as TNM stage increase,Cyfra21-1,SCC,TSGF content in BALF increase,difference had statistical significance(P＜0.05);(2)Cyfra21-1,SCC,TSGF content in serum of TNMⅠ stage and TNMⅡ stage were no different;Cyfra21-1,SCC,TSGF content in serum of TNMⅢ stage and TNMⅣ were different,difference had statistical significance(P＜ 0.05); Conclusion tumor markers content in serum in lung cancer patients increase from TNM III stage,Cyfra21-1,SCC,TSGF content in bronchoalveolar lavage fluid increase from TNMⅠ stage,tumor markers content detection in BALF is helpful for early diagnosis of lung cancer.

Lung cancer;Bronchoalveolar lavage fluid Cyfra21-1;SCC;TSGF

R734.2

B

2095-0616（2015）09-130-03

（2015-01-16）