羟丙基纤维素填充色谱柱的研制及其应用

张彩凤

（杭州捷岛科学仪器有限公司，浙江杭州310030）

分析测试

羟丙基纤维素填充色谱柱的研制及其应用

张彩凤

（杭州捷岛科学仪器有限公司，浙江杭州310030）

根据2010版药典要求，研制了20%OV-7 i.d.2 mm×0.5 mm×3 m填充色谱柱用于分析羟丙基纤维素中羟丙氧基含量的分析。考察了色谱柱的规格、不同载体对羟丙基纤维素中被测组分的影响。建立了羟丙基纤维素色谱柱制备及样品定性、定量的新方法。试验结果表明，在选定的色谱条件下，各组分的分离度和理论塔板数都远超药典中规定的参数。标准样品的重复性好，理论塔板数(n)，校正因子(RSD),相对标准偏差(RSD%)分别为6,1.41%,0.40%，完全符合药典的检测要求。

羟丙基纤维素填充色谱柱；研制和应用；柱效

药辅羟丙基纤维素(Hydroxypropyl cellulose，HPC)是由碱性纤维素与环氧丙烷在高温高压下反应而得的非离子型纤维素醚。根据其取代基羟丙氧基含量的高低，可以分为低取代羟丙基纤维素（Low-Substituted Hydroxypropyl Cellulose，LHPC），和高取代羟丙基纤维素（H-HPC）。2010版药典收录的为低取代纤维素，羟丙基纤维素中羟丙氧基含量是一个重要的参数，而气相色谱法测定的结果，也是作为最终的判定依据。在气相色谱法中，色谱柱是检测、分析的核心。

色谱柱分为填充色谱柱和毛细管色谱柱。毛细管色谱柱虽然在柱效及分析速度方面优于填充柱，但填充柱定量分析的准确度及使用成本优于毛细管色谱柱。从发展上看，虽然毛细柱有逐步取代填充柱的趋势，但是现阶段在某些领域（例如：气体分析、微量水分析等），填充柱在日常分析中仍是一种有价值的分析分流方法。

2010版药典对色谱固定液（25%苯基-75%甲基聚硅氧烷）、涂布浓度（20%）及色谱柱理论塔板数（正辛烷不低于1500）有明确规定，本文从色谱柱规格、担体种类等方面考察了色谱柱的柱效。同时确保产品在正常使用条件下具有更佳的稳定性和使用寿命。

1 设备与试剂

1.1 仪器

GC1690气相色谱仪（杭州捷岛科学仪器有限公司）；FA1004电子天平（上海仪电）；电热恒温水浴锅（上海博讯）；2XZ-2真空泵（黄岩汇丰真空泵厂）玻璃器皿。

1.2 试剂

OV-7(CNW色谱固定液)；氯仿（成都科龙化工试剂厂，分析纯）；纤维素标样及样品（安徽山河药用辅料股份有限公司提供）。

1.3 试验材料

不锈钢空柱国产（i．d．2 mm×0．5 mm×3 m；i．d．3 mm×0．5 mm×2 m）；

载体Chromosorb W AW DMCS)(CNW)；Chromosorb P AW DMCS(上海试剂厂进口分装)

2 试验方法

2.1 色谱柱的制备

2．1．1装填前的准备工作

①管柱清洗

分别使用浓度为10%左右的盐酸和氢氧化钠水溶液清洗不锈钢空柱，烘干待用；

②确定担体及固定液的量

根据管柱规格及担体的堆积密度，利用公式V=∏d2L/4，固定液（w/w%）=固定液（g）/（固定液+担体）（g）,计算出担体及固定液的使用量，考虑实际消耗量，按1．5～2．0的量准备。

③固定液的涂渍

将已知量的固定液溶入氯仿中制成涂渍溶液（溶剂量控制在刚好浸没担体为好），将烘干的担体倒入溶液中，在水浴锅中直至溶剂挥发至干，干燥的过程避免用力搅拌，以免担体破碎。

2．1．2色谱柱的装填及老化

①使用真空泵，轻巧地将涂渍好的担体均匀地装填到不锈钢空柱中，然后接到色谱仪上老化。

②老化方法：将色谱柱的进样端接到色谱仪汽化室，检测端放空，程序升温老化，也可恒温进行。

③老化的目的：a、固定液在担体表面分布更加均匀；b、清除柱内残留溶剂和低沸点杂质。

2.2 对照品及样品的制备

羟丙基纤维素对照品及供试品，委托安徽山河药用辅料有限公司按照2010版药典的方法处理。

2.3 纤维素定性、定量分析

样品检测色谱条件为：柱箱温度110℃，进样器温度200℃，热到检测器温度250℃，载气为氢气，柱流速30 mL/min，桥电流120 mA，进样量1 μL。根据药典规定，单标定性，内标法定量。

3 结果与讨论

3.1 不同的规格和担体对填充柱柱效的影响及定性分析

峰1—未知峰；峰2—羟丙氧基；峰3—正辛烷；

峰4—邻二甲苯

图1 （i.d)2 mm×3 m红色载体

图2 （i.d）3 mm×2 m红色载体

图3（i.d）2 mm×3 m白色载体

图1 ：（柱1）规格（i．d）2 mm×0．5 mm×3 m，红色载体Chromosorb P AW DMCS（60目～80目）的柱测试图谱；

图2：（柱2）规格（i．d）3 mm×0．5 mm×2 m，红色载体Chromosorb P AW DMCS（60目～80目）的柱测试图谱；

图3：（柱3）规格（i．d）2 mm×0．5 mm×3 m，白色载体Chromosorb W AW DMCS（60目～80目）的柱测试图谱

以上三组图，反映了各色谱柱的出峰顺序和组分名称。

3.2 柱效考察

在相同的色谱条件下，分别对三种色谱柱的柱效进行测试，评定标准为（内标物正辛烷）理论板数＞1500。校正因子的相对标准偏差≤3%，测试数据见表1和表2。

表1 各色谱柱的柱效测试数据

表2 柱1柱效的相对标准偏差RSD（n=6）

4 结论

（1）从表1的柱效数据来看，柱1的理论板数满足药典规定，保留时间、分离度、拖尾因子都优于其它两款柱。

（2）表2数据表明，校正因子和理论板数的相对标准偏差均小于3%，柱1完全能够满足药典中羟丙基纤维素中羟丙氧基的分析要求。

[1]2010版药典二部，附录48-50．

[2]邱湘龙，李振华，朱兴一．药用辅料羟丙基纤维素在制剂中的应用[J]．中国现代应用药学杂志，2007,24（8）:693-695．

[3]屠洁．色谱柱的填充和老化[J]．粮油检测与加工，2006，（2）:51-52．

[4]张娟，耿晓红．气相色谱分析中固定液的使用与选择[J]．河北化工，1998，(2):56-57．

Development and Application of Chromatographic Column Packed with Hydroxy Propyl Cellulose

ZHANG Cai-feng
(Hangzhou Jiedao Scientific Instruments,Hangzhou,Zhejiang 310030，China)

According to the P．R．China Pharmacopoeia 2010,20%OV-7 i．d．2 mm×0．5 mm×3 m filled chromatographic column was developed for determination of hydroxypropoxy content in hydroxy propyl cellulose．The effect of specification of column and carrier on detected composition was inspected and a new method was established for preparation of the column packed with hydroxy propyl cellulose and qualitative as well as quantitative analysis．It is manifested that the resolution and the theoretical stage number are far more superior to the regulations of the Pharmacopoeia．It is also proved to have excellent reproducibility by standard samples．The theoretical stage number(n),the correction factor(RSD)and the relative standard deviations(RSD%)are 6,1．41%,0．40%respectively,completely meet the testing requirement of the Pharmacopoeia．

chromatographic column packed with hydroxy propyl cellulose;development and application；column efficiency

1006-4184（2015）4-0051-03

2014-09-25

张彩凤（1975-），女，福建邵武人，工程师，本科，主要研究方向为色谱分析。E-mail：172341474@qq．com。