云南通海小菜蛾种群抗药性监测及田间药效评价

尹艳琼, 沐卫东, 李向永, 赵雪晴,黄春芬, 艾 英, 谌爱东*

(1. 云南省农业科学院农业环境资源研究所, 昆明 650205;2. 云南省通海县植保植检站, 通海 652700)



云南通海小菜蛾种群抗药性监测及田间药效评价

尹艳琼1#, 沐卫东2#, 李向永1, 赵雪晴1,黄春芬2, 艾 英2, 谌爱东1*

(1. 云南省农业科学院农业环境资源研究所, 昆明 650205;2. 云南省通海县植保植检站, 通海 652700)

为掌握云南蔬菜主产区通海县小菜蛾种群对常用杀虫剂的敏感性及其田间防治效果,采用浸叶法和田间小区试验对常用杀虫剂进行室内毒力测定和田间药效试验。结果表明：通海县小菜蛾种群对丁醚脲和Bt的敏感性最高,仍处于敏感水平,对茚虫威属低抗水平,对虫螨腈和多杀菌素的抗性倍数分别为24.28和31.68倍,属中抗水平,对氯虫苯甲酰胺抗性倍数为44.62倍,到高抗水平,对阿维菌素的敏感性最差,抗性倍数829.90倍,达极高抗水平。抗性水平和田间药效呈一定相关性,氯虫苯甲酰胺和阿维菌素药后7 d对小菜蛾的防治效果均低于50%,茚虫威、多杀菌素和丁醚脲的田间防效较好。通海县小菜蛾可选择的防治药剂包括茚虫威、多杀菌素和丁醚脲,注意不同药剂之间的轮换和交替使用。

小菜蛾; 敏感性; 抗药性; 防治效果

小菜蛾[Plutellaxylostella(L.)] 属鳞翅目(Lepidoptera),菜蛾科(Plutellidae),主要为害十字花科蔬菜,如甘蓝、花椰菜、青花菜、小白菜、芥菜等,寄主种类达40 多种,是世界性十字花科蔬菜的重要害虫, 在全国各地均有分布。小菜蛾抗药性发展速度快、抗药谱广,抗性水平高, 治理难度为国内外所公认[1], 现已成为抗药性最严重的和最难防治的害虫之一[2]。在云南省由于“冬无严寒,夏无酷暑、干湿季分明、蔬菜四季种植”的特殊气候条件,使小菜蛾周年发生且种群数量大,繁殖快[3-4],导致其对药剂的抗性水平越来越高,云南通海和弥渡菜区的小菜蛾抗性水平极高,居全国抗药性之首,已对90% 以上的小菜蛾防治药剂产生了抗药性[5]。使用杀虫剂是目前防治小菜蛾的关键技术措施之一,为了科学合理地使用杀虫剂,需对田间常用药剂进行抗性测定和田间药效试验,制定科学的用药策略指导生产,减少盲目使用杀虫剂,从而延长药剂的使用年限。

1 材料与方法

1.1 供试虫源地基本情况

通海县位于云南中部,东经102°30′,北纬23°65′,海拔1 820 m,气候温和,年温差小而昼夜温差相对较大,年平均气温16.6 ℃,适宜十字花科蔬菜的周年种植,全年白菜、甘蓝、萝卜、花椰菜等为主的十字花科蔬菜种植面积在8 000 hm2左右,当地栽培水平高,用药量大,小菜蛾周年发生。

1.2 供试药剂

抗药性监测的7种杀虫剂为：1.68%阿维菌素(abamectin)乳油、20.18%丁醚脲(diafenthiuron)乳油、9.17%虫螨腈(chlorfenapyr)乳油、4.86%茚虫威(indoxacarb)乳油、3%Bt(Bacillusthuringiensis)可湿性粉剂、2.5%多杀菌素(spinosad)悬浮剂、5.22%氯虫苯甲酰胺(chlorantraniliprole)乳油。药剂由广东省农业科学院植物保护研究所用原药配制而成,并分析检测其有效含量。

田间药效试验的7种药剂(其中氯虫苯甲酰胺有2个剂型),浓度设定按厂家推荐剂量的上限：1.5%阿维菌素乳油 (河北威远生物化工股份有限公司)1 000倍液、50%丁醚脲乳油 (江苏常隆化工有限公司)500倍液、20%虫螨腈悬浮剂(德国巴斯夫公司)1 000倍液、15%茚虫威悬浮剂(美国杜邦公司)3 000倍液、Bt 32000IU/mg(武汉科诺生物农药有限公司)750倍液、2.5%多杀菌素悬浮剂(美国陶氏益农公司)750倍液、20%氯虫苯甲酰胺水分散粒剂(日本株式会社)3 000倍液、20%氯虫苯甲酰胺悬浮剂(美国杜邦公司)3 000倍液。

1.3 试验方法

1.3.1 生物测定方法

试虫饲养：采集的小菜蛾蛹放入4 ℃的冰箱保存,高龄幼虫在人工气候室内[温度(25±1)℃,RH 65%～70%, L∥D=16 h∥8 h]用寄主植物饲养到蛹,收集蛹。全部蛹收集完后放到产卵箱(45 cm×45 cm×45 cm),在养虫室[温度(25±1)℃,RH 70%～75%, L∥D=16 h∥8 h]中羽化,成虫用15%的蜂蜜水饲养以补充营养。待50%以上的成虫羽化后,将用甘蓝汁液浸泡的铝箔片,晾干后吊挂于养虫笼内壁四周,每24 h更换1次产卵箔,收集的卵在4 ℃冰箱保存。产卵7 d后把卵箔取出放在培育好的萝卜苗[6]上饲养,取F1代3龄初期幼虫进行测试。

测定方法(浸叶法)[7]：用含0.05% Triton X-100的蒸馏水稀释药液,按等比级数稀释法,顺次配制成5个系列浓度,每浓度药液量200 mL。用洁净的甘蓝(Brassicaoleracea)叶,剪成直径6.5 cm的圆片(避免主叶脉)。将叶片在不同浓度的溶液中浸泡10 s后取出晾干,放在直径6.5 cm的培养皿中,接入10头3龄初期幼虫,重复4次,用0.05% Triton X-100水溶液浸渍的叶片作为对照,覆盖双层吸水卷纸,最后盖上培养皿上盖。将其正面向上置于(RXZ-380B型)培养箱中[温度(25±1)℃,RH 65%～70%, L∥D=16 h∥8 h]。除Bt药后96 h调查外,其余药剂48 h后调查,以小毛笔轻触虫体,不能协调运动视为死亡,记录最终试虫数和死虫数。

1.3.2 田间药效试验

试验地点：云南省通海县秀山镇黄龙村五组。

试验作物：花椰菜,移栽成活期。

试验方法：采用随机区组排列,3次重复,小区面积10 m2,施药前虫量调查,每小区虫量高于30头,3龄前幼虫占80%以上,按5点取样法每点计数12株进行标记,傍晚17:00,用自动喷雾器(新峰牌15 L)进行喷雾。喷施清水作对照。施药前一天调查药前基数,药后4、7和14 d各调查1次标记植株上小菜蛾的幼虫数。

1.4 计算方法

抗药性倍数计算：测定结果用POLO软件计算毒力回归方程的斜率,LC50值及其95%置信限,并与室内敏感品系的LC50相比较,计算出抗性倍数。抗性倍数=田间种群的LC50/敏感种群的LC50。小菜蛾敏感毒力基线参照十字花科小菜蛾抗药性监测技术规程[8]。

抗性分级标准[9]：抗性倍数RR≤5.0为无抗性,抗性倍数5.0160.0极高水平抗性。

药效计算方法[10]：

虫口减退率(%)=(药前虫口基数-药后虫口基数)/药前虫口基数×100;

校正防效(%)=(防治区虫口减退率-空白对照区虫口减退率)/(100-空白对照区虫口减退率)×100;

方差分析采用SPSS软件,邓肯氏新复极差(DMRT)法对试验数据进行差异显著性分析(P<0.05)。

2 结果与分析

2.1 室内毒力测定结果

室内毒力测定结果表明,云南滇中通海菜区小菜蛾田间种群对丁醚脲和Bt的敏感性最高,LC50分别为60.53 mg/L和1.05 mg/L,处于敏感水平;对茚虫威的敏感性下降,抗性倍数9.22倍;对虫螨腈、多杀菌素的抗药性达中抗水平,抗性倍数24.28、31.68倍;对氯虫苯甲酰胺达到高抗水平,LC50为10.08 mg/L,抗性倍数为44.62倍;敏感性最差的是阿维菌素,LC50为16.60 mg/L,抗性倍数829.90倍。通海菜区小菜蛾田间种群对7种常用药剂的敏感性依次为：丁醚脲>Bt>茚虫威>虫螨腈>多杀菌素>氯虫苯甲酰胺>阿维菌素。

表1 几种常用杀虫剂对通海小菜蛾种群室内毒力测定结果(2012年)

2.2 田间药效评价

20%氯虫苯甲酰胺悬浮剂3 000倍液、20%氯虫苯甲酰胺水分散粒剂3 000倍液和1.5%阿维菌素乳油1 000倍液药后4、7 d防治效果均低于50%,防效较差;15%茚虫威悬浮剂3 000倍液、2.5%多杀菌素悬浮剂750倍液、50%丁醚脲乳油500倍液的效果较好,虫口减退率均高于80%,20%氯虫苯甲酰胺悬浮剂、20%氯虫苯甲酰胺水分散粒剂与这3种药剂的田间防效差异显著,与1.5%阿维菌素乳油没有显著性差异,药后7 d,除了15%茚虫威悬浮剂、50%丁醚脲乳油和20%虫螨腈悬浮剂的效果有所上升之外,其他药剂的防效呈下降趋势,20%氯虫苯甲酰胺悬浮剂的防效药后7 d与对照间在0.05水平无显著性差异,已失去了防效。药后14 d,50%丁醚脲乳油的田间防效为84.7%,表现出较好的持效性。8种常用药剂对通海菜区小菜蛾田间种群的防治效果总体表现为：丁醚脲>茚虫威>多杀菌素>Bt>虫螨腈>氯虫苯甲酰胺水分散粒剂>阿维菌素>氯虫苯甲酰胺悬浮剂。

通海小菜蛾对7种常用杀虫剂的抗性水平与药后7 d的田间防效有一定的相关性,除Bt外,抗药性水平处于无抗和低抗的丁醚脲、茚虫威的田间防效最高,抗药性水平为中抗的多杀菌素、虫螨腈的田间防效也相对较高,抗药性水平为高抗和极高抗的氯虫苯甲酰胺、阿维菌素田间防效最差,按厂家推荐的剂量使用已基本无效。

表2 不同药剂对小菜蛾田间防治效果(2012,通海县)1)

1) 表中同列数据后小写英文字母不同者表示在0.05水平差异显著。

Data followed by different letters in the same column are significantly different at 0.05 level.

3 讨论

通海县小菜蛾对目前常用杀虫剂的抗性水平在不断上升,除丁醚脲、Bt和茚虫威在低抗水平外,其他测定的药剂均在中抗以上,阿维菌素达到了极高抗水平,敏感性与田间防治效果总体一致。通海县1995年开始使用阿维菌素类杀虫剂, 2001年抗药性为46.1倍[11],到了2008年就上升到1 034.5～ 40 624.5 倍,达到极高抗水平[12],2009年后随着氯虫苯甲酰胺等新型药剂的使用,对阿维菌素抗药性有所下降,本研究监测到抗性倍数达829.90倍,但仍处于极高抗水平,田间防效在推荐浓度下也不理想。对氯虫苯甲酰胺的抗药性达到了高抗水平,药后7 d药效与清水对照无显著性差异。15%茚虫威悬浮剂和2.5%多杀菌素悬浮剂对小菜蛾的田间防治效果药后7 d达85.9%和73.1%,药后14 d仍在55.8%和64.9%,室内毒力测定的结果也较敏感,处于低中抗水平;丁醚脲对云南通海菜区小菜蛾敏感性最高,田间防治效果较好,且持效期长。敏感性与田间防效的一致性说明抗药性的室内毒力测定结果对指导田间用药具有实际意义。

室内毒力测定的结果与田间防效总体一致,但不是完全吻合的正相关性,如Bt和虫螨腈,抗药性低于多杀菌素,而田间防效没有多杀菌素高,所以在用药建议中除依靠抗药性监测的结果外,还要考虑药剂的剂型、作用机制和施药方式,才能达到提高田间防效、降低抗药性的理想效果。根据本研究的结果针对不同的药剂对通海菜区提出如下用药建议：氯虫苯甲酰胺抗药性增加,田间防效也明显降低,该药与现有的药剂无交互抗性[13],建议减少该药剂的使用,仅用于小菜蛾发生前或发生初期或作为抗性治理的轮换药剂;多杀菌素是一种较新的生物农药,低毒、高效、广谱,杀虫效果受下雨影响较小,小菜蛾对多杀菌素产生抗性的速度较慢,该药与阿维菌素、氟虫腈、杀虫单没有交互抗性[14],可作为常规用药;茚虫威使用时应注意用药的次数,尽量不连续施用;虫螨腈处于中抗水平,对高龄幼虫的防效较差,建议在卵孵化高峰、低龄幼虫发育初期喷雾能起到良好的防治效果;丁醚脲对小菜蛾的活性高,可用于防治已对有机磷和拟除虫菊酯类药剂产生抗性的害虫[15],也可作为通海县防治小菜蛾常规用药;Bt室内毒力测定处于敏感水平,但在使用过程中Bt存在防效不稳定、残效期短、杀虫速度慢等问题应要注意施药条件,尽量在傍晚施药,增加湿展剂以保证Bt在作物上均匀分布, 同时应用菌液雾化良好的药械和适宜的喷雾量[16],也可利用增效剂[17-18]提高菌剂的田间防效。

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(责任编辑：王 音)

Resistance monitoring of diamondback moth and field control efficacy of pesticides against the pest in Tonghai, Yunnan Province

Yin Yanqiong1, Mu Weidong2, Li Xiangyong1, Zhao Xueqing1, Huang Chunfen2, Ai Ying2, Chen Aidong1

(1.Institute of Agricultural Environment and Resources, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Kunming 650205, China; 2. Tonghai County Plant Protection and Quarantine Station, Yunnan 652700, China)

To understand the current status of insecticide resistance in diamondback moth (DBM),Plutellaxylostella(L.) and the control efficacy of some common insecticides to DBM in Tonghai County, Yunnan Province, the indoor leaf-dipping bioassay and field trial were conducted, respectively. The results showed that the susceptibility of the Tonghai DBM to diafenthiuron and Bt were the highest, and exhibited sensitive levels. The resistance level was low to indoxacarb. The resistance ratios to chlorfenapyr and spinosad were 24.28 and 31.68 fold, respectively, which showed a middle resistance level. As to chlorantraniliprole, the resistance ratio was 44.62 fold with a high resistance level. The susceptibility to abamectin was the lowest and the resistance ratio was high to 829.90-fold. There was some correlation between the resistance ratio and the field control efficacy. The control efficacy of chlorantraniliprole and abamectin to the DBM was below 50% seven days after treatment. Indoxacarb, spinosad and diafenthiuron provided good control efficacy to the DBM, which can be selected for the DBM control in Tonghai with rational rotation and alternative using strategy.

Plutellaxylostella; susceptibility; insecticide resistance; control effects

2014-04-10

2014-07-29

公益性行业(农业)科研专项(200803001，201103021)

S 481.4

B

10.3969/j.issn.0529-1542.2015.03.041

*通信作者 E-mail:shenad68@163.com

#共同第一作者