负性急性时相蛋白在慢性荨麻疹患者的研究

唐慧敏 杨文林 黄桃源 尹嘉文 杨健

负性急性时相蛋白在慢性荨麻疹患者的研究

唐慧敏 杨文林 黄桃源 尹嘉文 杨健

目的 探讨急性时相反应与慢性荨麻疹的关系。方法 慢性荨麻疹患者50例，按症状分为轻型（1级）、中型（2级）、重型（3级）3组，同时选取健康体检者28例，用免疫比浊法测定血清前白蛋白（PA）、转铁蛋白（TRF）水平，采用酶联免疫吸附法测定胰岛素样生长因子1（IGF-1）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平；比较两组之间的差异、各检测项目之间的相关性及与病情分级的关系。结果 慢性荨麻疹患者PA（229.99±54.16）mg/L、IGF-1（177.23±46.48）μg/L均明显低于健康对照组，两组差异有统计学意义（均P<0.05）。TNF-α（25.39 ± 11.01）ng/L高于健康对照组（14.13 ± 6.12）ng/L，差异有统计学意义（P<0.05）。TRF水平（2.48±0.49）g/L与健康对照组（2.48±0.25）g/L比较，差异无统计学意义（P>0.05）。血清PA与TNF-α呈显著负相关（P<0.05），并与病情严重程度呈显著负相关（P<0.01），而TNF-α则与病情严重程度呈显著正相关（P<0.01）；其余各指标之间无明显相关性（均P>0.05）。结论 在慢性荨麻疹患者中，部分急性时相反应负性蛋白水平降低且与病情呈负相关，急性时相反应可能参与慢性荨麻疹的发病。

荨麻疹；前白蛋白；转铁蛋白；胰岛素样生长因子结合蛋白质1；肿瘤坏死因子-α

近年，慢性荨麻疹（chronic urticaria,CU）发病机制的研究取得一定的进展，有研究提示，C反应蛋白、纤维蛋白原等急性时相反应蛋白和白细胞介素6（IL-6）在CU患者中升高，且分别与CU病情严重程度、疾病活动有一定相关性［1-3］。Kasperska-Zajac［4］认为，CU患者体内可能发生急性时相反应。本研究通过检测CU患者体内负性急性时相反应蛋白前白蛋白（PA）、转铁蛋白（TRF）、胰岛素样生长因子 1（IGF-1）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平，探讨急性时相反应与CU的关系。

一、对象与方法

（一）对象：2013年10月至2014年1月到本院皮肤科门诊就诊的CU患者50例，其中男23例，女27例；年龄18～60岁，平均（39.50±14.12）岁。入选标准：既往无过敏性鼻炎、特应性皮炎、哮喘等过敏性疾病，无寄生虫感染及自身免疫病等病史；过去4周内未使用过糖皮质激素、免疫调节药物或过去3 d内未用过抗组胺药者；无合并皮炎，湿疹等引起瘙痒的皮肤病；无合并脑、肺、心、肝、肾、血液等重大器官疾病以及糖尿病、高血压患者。非妊娠、月经期、哺乳期妇女。排除标准：其他类型荨麻疹如，皮肤划痕症、物理性荨麻疹、胆碱能性荨麻疹、遗传血管性水肿、荨麻疹性血管炎及药物、感染等明确原因引起的荨麻疹。来自本院体检中心的健康对照组28例，男14例，女14例，年龄（38.07±11.55）岁。两组间性别、年龄差异无统计学意义。全部入选者无脑、肺、心、肝、肾、血液等重大器官疾病；肝肾功能等生化检查正常。

严重程度评估：根据患者近1周的风团表现，按报道的研究方法［2］进行评级：1级为轻型，1～10个直径 <3 cm风团；2级为中型，10～50个<3 cm风团或1～10个直径 >3 cm风团；3级为重型，直径<3 cm的风团>50个或直径>3 cm的风团>10个。CU组轻型患者19例，中型24例，重型7例。

（二）方法：

1.标本收集：清晨空腹抽取静脉血4 ml，以4℃、1 000×g、离心5 min，取血清存-80℃保存备测。

2.PA和TRF用德国罗氏全自动生化分析仪及配套试剂的免疫比浊法测定。IGF-1和TNF-α用酶联免疫吸附试验（ELISA）法，试剂盒产自美国Cloud-Clone Corp公司，操作按说明书。MK3型酶标仪Thermo购自上海赛默飞世尔仪器有限公司。MK3型酶标仪450 nm测定吸光度（A）值，用SPSS软件绘制出标准曲线，计算各样本值。

3.统计学处理：用SPSS 17.0软件进行统计学处理。计量资料结果以±s表示，计数资料用独立样本t检验，各组间数据相关性采用Spearman相关分析，检验水准α=0.05。

二、结果

1.CU 组与健康对照组血清 PA、TRF、IGF-1、TNF-α 水平：两组间血清负性急性时相反应蛋白PA、TRF、IGF-1水平及TNF-α水平的比较见表1。CU组血清与对照组相比PA、IGF-1水平水平明显降低，差异有统计学意义（t=3.667，P<0.05；t=5.748，P<0.05）。而 TRF水平在 CU 组与对照组之间比较，差异无统计学意义（P>0.05），CU组患者血清TNF-α水平较健康对照组明显升高，差异有统计学意义（P<0.01）。

2.CU组PA、TRF、IGF-1及TNF-α水平之间的相关性：CU组PA水平与 TNF-α水平呈负相关（r=-0.312，P<0.05），余各指标之间无明显相关性（P>0.05）。

3.CU组PA、TRF、IGF-1及TNF-α水平与患者病情分级的关系：PA水平与病情严重程度呈显著负相关（r=-0.635，P<0.01），而TNF-α水平则与病情分级呈正相关（r=0.409，P<0.01），TRF及IGF-1水平分别与病情分级无相关性（P>0.05）。

表1 慢性荨麻疹组与健康对照组4种急性时相蛋白水平的检测（±s）

表1 慢性荨麻疹组与健康对照组4种急性时相蛋白水平的检测（±s）

注：两组进行比较

组别 例数 前白蛋白（mg/L）肿瘤坏死因子α（ng/L）慢性荨麻疹组 50 229.99±54.16 2.48±0.49 177.23±46.48 25.39±11.01健康对照组 28 272.06±36.42 2.48±0.25 239.88±45.16 14.13±6.12 t值 3.667 0.004 5.748 4.989 P值 <0.05 >0.05 <0.05 <0.01转铁蛋白（g/L）胰岛素样生长因子 1（μg/L）

三、讨论

急性时相反应蛋白是指在机体发生炎症、感染或肿瘤等因素刺激下，血浆浓度发生改变的一系列蛋白质，与炎症和损伤的性质、范围有一定相关性。其中，在急性时相反应中血浆浓度增加超过25%的蛋白称为正性急性时相反应蛋白，如C反应蛋白、铁蛋白、铜蓝蛋白、血浆淀粉样A物质、抗蛋白酶系、补体系统、纤维蛋白原等。血浆浓度降低25%以上的蛋白则称为负性急性时相反应蛋白，如PA、α甲胎蛋白、甲状腺素结合球蛋白、TRF、IGF-1等。不同的正性急性时相反应蛋白在炎症过程中发挥多种生物学效应，而负性急性时相反应蛋白目前作用还不清楚，可能是浓度减少后，使更多的氨基酸合成其他正性急性时相反应蛋白参与机体防御功能［5］。近年文献报道，CU患者体内部分正性急性时相反应蛋白较健康对照组升高，且分别与CU病情活动度有一定相关性［1-3］，有学者［4］推测，CU患者体内可能发生急性时相反应，且可能来自于皮肤风团的炎症反应。

本研究结果显示，CU患者PA、IGF-1的水平较健康对照组中均有一定程度的下降，差异有统计学意义（P<0.05）；而TRF与健康对照组差异无统计学意义，但CU组仍有10例（20%）患者血清TRF低于临床正常值下限（2.2～4.0 g/L）。PA的水平与CU患者病情分级呈负相关（P<0.01），表明患者体内可能发生急性时相反应。但目前急性时相反应蛋白在CU的研究较少，CU患者体内PA、IGF-1的水平下降是否由于负性急性时相反应蛋白合成减少，使更多的氨基酸参与正性急性时相反应蛋白的合成，参与机体防御功能过程尚待进一步研究。

目前有研究［6］认为，CU作为一种持续炎症性皮肤疾病，局部炎症可引起急性时相反应，局部炎症细胞释放 TNF-α、IL-6、IL-18、IL-1等炎症介质，在补体途径下引起机体产生各种急性时相反应蛋白，其中TNF-α可以活化内皮细胞，趋化白细胞，使其他细胞产生更多细胞因子，还能明显增加嗜酸性粒细胞活化趋化因子以及诱导嗜酸性粒细胞颗粒蛋白分泌并沉积于皮损真皮内细胞，并可促进肝细胞合成多种急性时相反应蛋白，也可减少肝细胞表面生长激素受体表达，抑制对生长激素的反应，降低血浆IGF-1浓度［7］。已有研究表明，CU患者体内TNF-α水平显著升高［8］，我们的结果显示，TNF-α与CU患者PA水平呈负相关（P<0.05）,但与IGF-1无相关性（P>0.05）。迄今为止的研究提示，TNF-α可能参与CU的急性时相反应过程，参与急性时相反应蛋白的调控。

［1］黄桃源,杨文林,尹嘉文,等.急性时相反应标志物及凝血、纤溶标志物与慢性荨麻疹的相关性研究［J］.中华皮肤科杂志,2014,47（7）:473-476.

［2］Takahagi S,Mihara S,Iwamoto K,et al.Coagulation/fibrinolysis and inflammation markers are associated with disease activity in patients with chronic urticaria［J］.Allergy,2010,65（5）:649-656.

［3］Kasperska-Zajac A,Sztylc J,Machura E,et al.Plasma IL-6 concentration correlates with clinical disease activity and serum C-reactive protein concentration in chronic urticaria patients［J］.Clin Exp Allergy,2011,41（10）:1386-1391.

［4］Kasperska-Zajac A.Acute-phase response in chronic urticaria［J］.J Eur Acad Dermatol Venereol,2012,26（6）:665-672.

［5］Kemik O,Sumer A,Kemik AS,et al.The relationship among acute-phase response proteins,cytokines and hormones in cachectic patients with colon cancer［J］.World J Surg Oncol,2010,8（1）:85.

［6］黄桃源,杨文林.急性时相反应及凝血/纤溶系统参与慢性荨麻疹发病的研究进展［J］.中国皮肤性病学杂志,2014,28（1）:84-86.

［7］Postal M,Appenzeller S.The role of tumor necrosis factor-alpha（TNF-α）in the pathogenesis of systemic lupus erythematosus［J］.Cytokine,2011,56（3）:537-543.

［8］石丽君,曾抗,李利豪,等.卡介菌多糖核酸治疗慢性荨麻疹患者嗜酸性粒细胞趋化因子、肿瘤坏死因子α和干扰素γ水平的检测［J］.中华皮肤科杂志,2013,46（9）:676-678.

Negative acute phase proteins in patients with chronic urticaria

Tang Huimin,Yang Wenlin*,Huang Taoyuan,Yin Jiawen,Yang Jian.*Department of Dermatology,Second Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University,Guangzhou 510260,China

Yang Wenlin,Email:yangwenlin@21cn.com

Objective To investigate the relationship between negative acute phase proteins and chronic urticaria （CU）.Methods Fifty patients with CU were enrolled into this study,and divided into three grades,i.e.,mild （grade 1）,moderate （grade 2）and severe （grade 3）according to symptoms.Twenty-eight health checkup examinees served as the control group.Immunoturbidimetry was performed to determine serum levels of prealbumin（PA）and transferrin（TRF）.Enzyme-linked immunosorbent assay was conducted to measure serum levels of insulinlike growth factor-1 （IGF-1） and tumor necrosis factor-α （TNF-α）.Statistical analysis was carried out to assess differences in these indices between these two groups,the relationship among these indices and between these indices and disease severity.Results Compared with the control group,the patients with CU showed reduced serum levels of PA（（229.99 ± 54.16）vs.（272.06 ± 36.42）mg/L,t=3.667,P<0.05）and IGF-1（（177.23 ± 46.48）vs.（239.88 ± 45.16）μg/L,t=5.748,P<0.05）,but higher serum levels of TNF-α （（25.39 ± 11.01）vs.（14.13 ±6.12）ng/L,t=4.989,P<0.05）,and similar serum levels of TRF（（2.48 ± 0.49）vs.（2.48 ± 0.25）g/L,P>0.05）.The serum level of PA showed a significant negative correlation with that of TNF-α （r= － 0.312,P<0.05）,as well as with disease severity （r= －0.635,P<0.01）,whereas the serum level of TNF-α showed a significant positive correlation with disease severity （r=0.409,P<0.01）,and no statistical correlation was found between the remaining indices（allP>0.05）in the patients with CU.Conclusions Serum levels of some negative acute phase proteins decrease and negatively correlate with disease severity in patients with CU.Acute phase response may be involved in the occurrence of CU.

Urticaria；Prealbumin；Transferrin；Insulin-like growth factor binding protein 1；Tumor necrosis factor-α

10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2015.01.021

510260广州医科大学附属第二医院皮肤科［唐慧敏（现在广州医学院荔湾医院皮肤科，510170）、杨文林、黄桃源、尹嘉文、杨健］

杨文林，Email：yangwenlin@21cn.com

2014-05-12）

（本文编辑：吴晓初）