肝细胞癌中survivin mRNA的表达与临床病理联系

黄建伟

（郑州大学附属洛阳市中心医院 病理科，河南 洛阳 471003）

肝细胞癌中survivin mRNA的表达与临床病理联系

黄建伟

（郑州大学附属洛阳市中心医院 病理科，河南 洛阳 471003）

目的 研究肝细胞中survivin mRNA的表达与临床病理的联系。方法利用逆转录聚合酶链反应测定我院2010年～2013年采集的40例肝细胞癌组织及癌旁组织标本中的survivin mRNA。结果肝细胞癌标本中survivin mRNA表达阳性率为59.09%，阴性率为40.91%。此外，肝细胞癌中survivin mRNA表达与是否癌栓、病理学分级及TNM分期有显著相关性，P＜0.05。结论survivin mRNA表达与肝细胞癌的进展、预后相关，可为肝细胞癌临床治疗提供重要依据。

肝细胞癌；survivin mRNA；表达；病理联系

近年来肝癌在人们饮酒等不良生活方式增加的形势下呈现上升趋势，给患者及家庭带来伤害［1］。Survivin作为一种新型凋亡抑制蛋白，有肿瘤特异性，在前列腺癌、乳腺癌、肾癌等肿瘤中均有不同程度的表达，且该基因的高表达在很大程度上关系到肿瘤的发生、进程及预后。本研究就此主要探究肝细胞癌中Survivin mRNA的表达及与临床病理的联系，报道如下。

1　资料与方法

1.1临床资料：选取我院2010年1月至2013年1月收集的40例肝细胞癌组织及癌旁组织标本为研究对象，其中癌旁组织（与肿瘤病灶的距离为2 cm）标本18例（45%）；肝细胞癌组织标本22例（55%），男性21例，女性1例，年龄37～70岁，平均（46.2±1.0）岁。标本采集完成后马上将其放置液氮中，保存在零下80 ℃的冰箱中。

1.2检验方法：于称重后的肝细胞癌及癌旁组织中加入适当量的液氮，均匀研磨后加入总核糖核酸提取剂，严格根据使用说明书操作，提取组织总核糖核酸后保存在零下80 ℃冰箱中备用。利用逆转录聚合酶链反应测定肝细胞癌组织及癌旁组织中survivin mRNA的表达，这个过程中需满足以下几点要求：①反转录（RT）。温度50 ℃，时间半个小时，循环1次；②Rtase inactivation。温度为94 ℃，2 min，循环1次；③聚合酶链式扩增（PCR）。94 ℃，30 s；52 ℃，30 s；72 ℃，45 s，循环30次。之后选取5μL PCR反应液行琼脂凝胶电泳（1.5%），观察并记录相关数据。此外，对40例标本患者的临床资料（性别、肝硬化程度、癌细胞病灶大小、病理组织分级、TNM分期等）进行收集、整理和分析。

1.3统计学方法：应用SPSS19.0统计学软件对上述各项记录数据进行整理和分析，计数资料用率（%）表示，行χ2检验，P＜0.05时为差异有统计学意义。

2　结　果

22例肝细胞癌组织标本中survivin mRNA表达为阳性13例，阳性率为59.09%；表达为阴性9例，阴性率为40.91%，癌旁组织中没有发现survivin mRNA表达，两组比较χ2<19.84，差异有统计学意义，P＜0.05。此外，肝细胞癌中survivin mRNA表达与是否癌栓、病理学分级及TNM分期有显著相关性，P＜0.05。具体情况见表1。

3　结　论

Survivin基因只在胃癌、乳腺癌等肿瘤及胚胎组织中表达，且不同肿瘤中Survivin基因表达阳性或阴性情况不尽相同［3］。Survivin基因在17q25中，主要由4个外显子及3个内含子构成，目前已发现的mRNA变体为Survivin、Survivin- Ex3、Survivin-2α等。Survivin基因对肿瘤细胞发生作用主要是通过加速癌细胞分裂或激活癌基因，导致癌基因与抗凋亡基因之间的界限变得模棱两可，为此进一步研究细胞癌中Survivin基因表达及其与临床病理的联系至关重要，为临床癌症治疗提供重要依据。相关研究表明乳腺癌细胞及结直肠癌细胞中Survivin表达阳性患者相比阴性患者生存率更低，而在膀胱癌中Survivin表达与肿瘤恶性程度正相关。

表1　肝细胞中survivin mRNA与临床病理、TNM分期等各指标间的联系

杨黎等人应用RT-PCR方法检测26例肝细胞癌、24例癌旁组织中的Survivin mRNA及Survivin- Ex3 mRNA，表明肝细胞癌中Survivin mRNA表达与病理学分级及TNM分期相关，P＜0.05。本研究中22例肝细胞组织标本中Survivin mRNA表达阳性率为59.09%，阴性率为40.91%；另外肝细胞癌中Survivin mRNA表达与病理学分级、是否癌栓及TNM分期有显著关系，P＜0.05，与杨黎等人研究结果基本一致。由此可见中Survivin mRNA表达与肝细胞癌的发展进程及预后有一定的联系，可作为肝细胞癌治疗的新靶点。

［1］黄少军，陶建蜀，程正江.Survivin及其剪接变体△Ex3在胃肠道肿瘤患者外周血中的表达［J］.广东医学，2011，32（7）:859-862.

［2］秦松林.Survivin在肾细胞癌中的表达及临床意义［D］.长沙:中南大学，2012.

［3］杨黎，姬少绯，朱振宇，等.肝细胞癌中Survivin mRNA和Survivin-ΔEx 3mRNA的表达及临床意义［J］.肿瘤防治研究，2013，40（12）:1147-1150.

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1671-8194（2015）19-0182-01