高效液相色谱法测定枸橼酸莫沙必利胶囊的含量

李含春　万 霞

（1 雅安市食品药品检验所，四川 雅安 625000；2 雅安三九药业有限公司，四川 雅安 625000）

高效液相色谱法测定枸橼酸莫沙必利胶囊的含量

李含春1万 霞2

（1 雅安市食品药品检验所，四川 雅安 625000；2 雅安三九药业有限公司，四川 雅安 625000）

目的 对枸橼酸莫沙必利胶囊中枸橼酸莫沙必利的含量测定方法进行研究。方法利用高效液相色谱仪，采用外标法测定供试品中枸橼酸莫沙必利含量与采用紫外-分光光度法测定枸橼酸莫沙必利含量相比较。结果高效液相色谱含量结果为96.64%，紫外-分光光度法测定含量结果为96.82%。结论高效液相色谱方法操作简便、准确、灵敏，专属性强，可用于枸橼酸莫沙必利胶囊中枸橼酸莫沙必利的含量测定。

枸橼酸莫沙必利胶囊；高效液相色谱法；含量测定

枸橼酸莫沙必利胶囊为胶囊剂，内容物为白色或类白色粉末，含量测定是采用紫外可见分光光度法测定，其标准是国家食品药品监督管理局标准：YBH23852005。本法采用高效液相色谱，用外标法测定供试品中枸橼酸莫沙必利的含量［2］。

1　仪器与试药

1.1仪器XS205DU电子天平（瑞士METTLER TOLEDO），Waters e2695-2489型高效液相色谱仪［沃特世科技（上海）有限公司（Waters）］，SevenMulti型pH/电导率/离子综合测试仪（瑞士METTLER TOLEDO）TU-1901双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）。

1.2试药：枸橼酸莫沙必利胶囊（上海信谊药厂有限公司，批号：130512，规格5 mg），枸橼酸莫沙必利对照品（批号：100656-201302，含量：94.2%）由中国食品药品检定研究院提供，甲醇（色谱纯，Merck），磷酸二氢钾，磷酸，乙醇均为国产分析纯。

2　方法与结果

2.1高效液相色谱法（温度为19 ℃，相对湿度为65%）。色谱条件：色谱柱为Sepax GP-C18 4.6 mm×150 mm，柱温为30 ℃，紫外检测器，流速为1 mL/min，甲醇-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调pH值至4.0）（75∶25）为流动相，检测波长为274 nm［1］。

2.1.1对照品配制：取枸橼酸莫沙必利对照品0.01100 g至100 mL容量瓶中，加流动相10 mL，超声振摇使枸橼酸莫沙必利溶解后，加上述流动相稀释至刻度，摇匀作为对照品储备液，浓度为103.62 μg/mL。

2.1.2系统适用性试验：精密量取5 mL对照品储备液至25 mL容量瓶用上述流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。理论塔板数按枸橼酸莫沙必利峰计算为5144；枸橼酸莫沙必利峰与相邻峰的分离度＞1.5。见图1、表1。

图1　系统适用性试验

图2　-1线性关系

图2　-2线性关系

图3　精密度试验

图4　稳定性试验

图5　样品测定

表1　系统适用性试验表

表2　加样回收率试验

2.1.3标准曲线的绘制与线性关系考察：分别精密量取1、2、5、8、10 mL对照品储备液至25 mL容量瓶用上述流动相释至刻度，摇匀，分别精密量取20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。进样浓度分别为4.1、8.3、20.7、33.2、41.4 μg/mL。图2-1峰面积分别为121014、254253、648132、1040000、1301687。以对照品浓度X（μg/mL）为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，经过线性回归，枸橼酸莫沙必利回归方程为：Y<32775x-8696，r为0.999998，枸橼酸莫沙必利在进样浓度为4.1～41.4 μg/mL内均呈良好的线性关系。见图2-2。

2.1.4精密度试验：精密吸取同一混合对照溶液（精密量取5 mL对照品储备液至25 mL容量瓶用上述流动相稀释至刻度，摇匀，备用）20 μL，连续注入液相色谱仪6次，分别测定峰面积分别为640377、640230、639567、638647、638098、640403，平均值为639554，说明该方法精密度良好，RSD<0.2%。见图3。

2.1.5供试品溶液稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液（精密称定供试品20粒内容物为2.4014 g，研细，精密称出1份，供试品为0.1179 g，至50 mL容量瓶用上述流动相释至刻度，摇匀，滤过，精密量取5 mL至25 mL容量瓶，用上述流动相稀释至刻度，摇匀备用）20 μL，分别于0、2、4、8、12、24 h，注入液相色谱仪，测定色谱图面积。结果枸橼酸莫沙必利的峰面积分别为587568、587090、587355、587677、587691、587274，平均峰面积为587443，RSD%为0.1%，结果表明供试品溶液在室温条件下24 h内稳定，能满足含量测定的要求，见图4。

2.1.6加样回收率试验：取已测知含量的样品（批号130512，枸橼酸莫沙必利含量为40.25 mg/g），研细，取9份，各约0.11 g，精密称定，至50 mL容量瓶用上述流动相释至刻度，摇匀，滤过，精密量取5 mL至25 mL容量瓶，再分别精密加入枸橼酸莫沙必利对照品储备液5 mL用上述流动相稀释至刻度，摇匀。精密量取20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图（表2）。计算，准确度符合要求。

2.1.7含量测定供试品溶液：取本品20粒，精密称定总重，倾出内容物，混合均匀，胶囊壳用小刷试净后，称量胶囊壳总重，得到20粒内容物总重为2.4014 g，研细，精密称出内容物2份，供试品1为0.1154 g，供试品2为0.1168 g，至50 mL容量瓶加上述流动相10 mL，超声溶解后，用上述流动相释至刻度，摇匀，滤过，精密量取5 mL至25 mL容量瓶，用上述流动相稀释至刻度，摇匀。精密量取20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。用外标法以精密度试验对照品平均值为639554计算测得2份供试品1峰面积分别为573632、575818，平均值为574725，供试品1标示量为96.91%，测得2份供试品2峰面积分别为577213、579865，平均值为578539，供试品2标示量为96.38%，平均标示量为96.64%。见图5。

2.2紫外可见分光光度法（温度为19 ℃，相对湿度为65%）

2.2.1对照品配制：取枸橼酸莫沙必利对照品0.01160 g至50 mL容量瓶中，加乙醇10 mL，振摇使枸橼酸莫沙必利溶解，加乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取1 mL至10 mL容量瓶，用乙醇稀释至刻度，摇匀。作为对照品溶液。

2.2.2供试品配制：取本品20粒，精密称定总重，倾出内容物，混合均匀，胶囊壳用小刷试净后，称量胶囊壳总重，得到20粒内容物总重为2.3920 g，研细，精密称出内容物2份，供试品1为0.1124 g，供试品2为0.1145 g，至25 mL容量瓶中，加乙醇10 mL，超声振摇使枸橼酸莫沙必利溶解，加乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取1 mL至10 mL容量瓶，用乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.2.3测定计算：照紫外-可见分光光度法［1］，在274 nm的波长处分别测定吸光度，测得吸光度A供试品1<0.541，A供试品2<0.550，A对<0.649，计算得供试品1标示量为96.92%，供试品2标示量为96.72%，平均标示量为96.82%。

3　讨　论

高效液相色谱法与紫外-可见分光光度法测定枸橼酸莫沙必利胶囊含量，其结果无显著性差异，但高效液相色谱法具有分离的功能，是先进行分离然后进行检测，对物质定性和定量更准确；紫外-可见分光光度法，是在某一特定波长下对物质进行检测，更容易产生干扰。高效液相色谱法中某一波长下可能出许多峰，但不是同一物质，还需要用时间等来进行定性，而在紫外-可见分光光度法中，有可能会被误认为同一物质。所以高效液相色谱法分离效率高，选择性好，速度快，检测灵敏度高，减少了辅料，赋形剂等对药品含量的干扰，并能定性药品中这种成分是否是其他成分假冒的，对控制药品质量，保障用药安全，具有非常重要的作用。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典二部（2010年版）［M］.北京:中国医药科技出版社，2010.

［2］国家食品药品监督管理局标准YBH23852005［S］.2012.

R927.2

B

1671-8194（2015）19-0059-02