猪链球菌病的细菌分离与防治
2015-10-21张立宪王克领郎利敏游一张青娴
张立宪 王克领 郎利敏 游一 张青娴
中图分类号:S854.4+3 文献标识码:C 文章编号:1001-0769(2015)11-0056-02
猪链球菌(Streptococcu suis,SS)也是严重影响养猪业经济效益的一种传染性疾病,可引发猪的脑膜炎、关节炎、败血症、淋巴结脓肿等多种临床症状。哺乳仔猪和刚断乳仔猪主要以败血症型、脑膜炎型为主,发病率和死亡率均较高;肥育猪发病多以关节炎或淋巴结脓肿为特征,其死亡率较低,但会影响生长发育。链球菌病易与其他高热性疾病混合感染,单纯的猪链球菌病是很少见的,这也是近年来猪群发生无名高热后难以控制的原因之一。随着养猪业集约化的发展,链球菌病的致病性及危害日益引起人们的重视。
2015年6月,河南新乡市某中等规模养猪场突然发病,各阶段猪均有发病和死亡,主要表现为高热、拒食、眼球发红,体表呈现散在或弥散性出血斑点(图1),部分病猪精神不振、畏寒聚堆,粪便干结,个别病猪出现关节肿大、跛行,也有的病猪出现颈部强直、偏头转圈、四肢呈划水样等神经症状。送检病猪5头,河南省农业科学院兽医诊断室对所送病料进行了实验室诊断并提出了有效的防控方案,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 病料采集
发病猪场送检病猪5头。
1.1.2 主要试剂和培养基
兔鲜血琼脂平板培养基、20 %血清营养琼脂平板培养基等均为采用常规方法制备,微量生化发酵鉴定管、药敏纸片均购买于杭州市天和微生物试剂有限公司。其他试剂均为国产分析纯。
1.2 方法
1.2.1 病猪剖检和病料采集
观察发病猪临床情况并解剖,察看其病理变化。眼观病变基本一致:全身淋巴结肿大外观红紫,有的切面多汁,部分有化脓灶;脾肿胀淤血柔软易碎裂,暗红色,边缘有黑色出血性灶;肝脏肿大色淡呈浅黄色,心脏有明显的出血点和出血斑(图2);肺淤血肿大,出血斑和大面积的肺炎病灶;全身浆膜、黏膜有明显的出血斑点;部分关节腔内有化脓性积液(图3)。无菌取心血、肝脏、关节液等,并冷藏备用。
1.2.2 细菌分离培养
取病猪关节液、心血、肝脏分别接种于兔鲜血琼脂平板培养基和 20 %血清营养琼脂平板培养基,置于37 ℃烟缸培养24 h~48 h观察结果,再从中挑取典型的单个菌落做纯培养。按常规方法制备组织抹片,进行革兰氏染色,自然干燥后用油镜观察结果。
1.2.3 生化特性
挑取纯培养的单个菌落于加兔鲜血的普通肉汤中,置于37 ℃条件下,220 r/min震荡培养24 h后,分别接种于葡萄糖、麦芽糖、乳糖、山梨醇、水杨苷、阿拉伯糖等微量发酵管中,置于37 ℃恒温培养箱 24 h~48 h后观察结果。
1.2.4 药敏试验
将分离鉴定好的菌株均匀涂布于兔鲜血琼脂平板培养基,并将选取的药敏片贴在其上,置于37 ℃含 5 % CO2恒温培养箱,培养24 h后测量抑菌环直径并判定结果。
2 结果
2.1 病猪剖检
跟据临床症状和病理变化初步诊断为链球菌感染。
2.2 细菌的分离
兔鲜血琼脂培养基上生长出湿润突起、表面光滑、稍混浊呈露珠状、溶血带环绕边缘整齐小而圆的菌落;20 %血清营养琼脂平板培养基也生长出类似菌落。挑取两种培养基菌落,分别涂片革兰氏染色后镜检,均见单个或成对、短链状排列的革兰氏阳性球菌。
2.3 生化試验
分离菌株纯培养液的生化试验结果表明,该菌能发酵乳糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、水杨苷、山梨醇,产酸不产气;不发酵菊糖、棉子糖、阿拉伯糖和脲酸钠,明胶液化试验阴性,符合链球菌生化特征。
2.4 药敏试验
测量培养基上药敏片抑菌环直径,结果表明:洛美沙星、丁胺卡那、头孢唑啉为最敏感;对庆大霉素、环丙沙星、新霉素中度敏感;对青霉素G、氯霉素、克林霉素、链霉素和磺胺6-甲氧嘧啶不敏感。
根据临床症状、病理解剖、实验室检查实验,综合诊断该病为链球菌病感染。
3 防制措施
(1) 将可疑猪和病猪全部换舍隔离饲养,并及时清除病死尸与被污染物,将其彻底焚烧或深埋。对污染的圈舍和四周环境进行严格消毒,患病猪群则带猪消毒,一天一次,连消 5 d~7 d。
(2) 大群拌料加药:20 %阿莫西林500 g +20 %恩诺沙星500 g +扶正康1 000 g +有机酸3 000 g +全价饲料1 t,连喂7 d~10 d,同时饮水中添加优质多维、葡萄糖等,连饮10 d~15 d。发病猪群则用上述药物全部饮水加药,连饮2 d~ 3 d,水中加些如麸皮、谷糠等粗料,并逐渐增加稠度,同时提供青绿多汁饲料,待病情缓解后再改为拌料加药再用5 d~7 d。部分可疑猪和发病猪肌注链毒四型(主要成分为洛美沙星)一天一次,一边一针,按说明书用量连用3 d~5 d。
经过上述措施处理15 d后,除部分病重猪死亡外,其余病猪逐渐痊愈,观察30 d后未见复发病例。
4 小结与讨论
猪链球菌病近几年来发病率较高,对养猪业影响较为严重,一般多发生在4~9月干燥、炎热的季节,而饲养环境差,饲料营养失衡,应激等因素都可诱发本病。对发病猪尽早确诊治疗,是减少再发病、传染和避免经济损失的首要措施。由于链球菌耐药率较高,对于本病治疗,最好先进行药敏试验,有目的、针对性地用药。
猪链球菌病可以说仍是目前对猪场有较大威胁的疫病之一,对于该病预防仍是控制其发病的关键:首先是根据各个猪场不同的情况选取不同但质量可靠的疫苗,有专人严格按照免疫程序进行操作;其次要加强对该病的检疫和防控,实施严格的生物安全措施:对购入种猪严格检疫,隔离观察;定期消毒,不同消毒药物要交替使用等;另外给猪只提供一个生长舒适的环境,供给营养全面、均衡的优质饲料,减少不良的应激因素等,只有这样采取综合的管理措施,才能达到对该病的理想防治效果。发病猪场治疗时一定要注意以下事项:(1)少用精料,多饲喂青绿多汁料如西瓜皮、青菜叶等;(2)饮水中可添加优质电解多维和葡萄糖;(3)注射时配合维生素C、维生素B1效果会更好一些。