黄冈市猪瘟流行病学调查与分析

余亮彬，石浪涛

（黄冈职业技术学院 生物与制药工程学院，湖北 黄冈 438002）

黄冈市猪瘟流行病学调查与分析

余亮彬，石浪涛

（黄冈职业技术学院 生物与制药工程学院，湖北 黄冈 438002）

为全面客观了解湖北省黄冈市猪瘟（CSF）流行现状，通过实地调查和实验室ELISA方法检测，对黄冈市432家猪场进行猪瘟（CSF）感染两年跟踪检测，其结果为：猪场感染率为25.48% （2014年）和23.51%（2015年）；猪群CSFV阳性率为2.42%（2014年）和1.93%（2015年）；不同猪群CSFV抗原阳性率顺序为育成猪＞保育猪＞育肥猪＞哺乳仔猪＞母猪＞种公猪。

猪瘟；流行病学调查；黄冈市

猪瘟（CSF）是由黄病毒科瘟病毒属的猪瘟病毒（CSFV）引起的高度接触性、出血性猪传染病，是猪群中最严重的传染病之一，每年对全球养猪业造成巨大经济损失。世界动物卫生组织（OIE） 将其列为A类16种法定传染病之一，中国将其列为一类动物传染病。CSF在世界上养猪国家都有不同程度的流行，近年来一些原本宣布消灭猪瘟的国家（英国、比利时、荷兰、德国等）又相继暴发猪瘟［1］［5］。我国于1956年提出消灭CSF规划，虽然有效地控制了CSF的急性发生和大流行，但因病毒毒株变异、野毒的无规律性的存在和水平间传播以及猪场环境和生产管理技术的不规范，CSF仍在我国不间断地流行［2］。当前，我国猪瘟的流行和发病特点与以前相比已发生了较大的变化：临床上出现典型的猪瘟较少取而代之的是非典型及温和型、亚临床或无症状持续感染型及免疫失败现象，原来大面积的爆发与流行也不多见，如今多呈散发及小范围流行，发病日龄由原来的育成猪转向保育猪和仔猪［3］［6］。

为全面客观了解湖北省黄冈市猪瘟（CSF）流行现状，从2014年1月起至2015年12月止，本试验对黄冈市11个县市区432家猪场进行跟踪实地调查，并运用ELISA方法进行猪瘟血清流行病学调查，通过实地调查和实验室检测结果，全面分析了黄冈市CSF的流行规律，为当地制定CSF综合防控措施提供科学依据和理论参考。

1 猪场抽样

为保障样品来源的代表性，按照统计抽样要求对黄冈市所辖11个县市存栏200头以上规模猪场进行随机抽样。每月在各县市随机选取3个猪场作为调查猪场，为保障调查猪场在各县分布相对均匀，要求每猪场之间距离30公里以上，并尽量呈三角形分布。

调查时间： 2014年1月-2015年12月

2 主要调查内容

一是对猪场基本情况进行调查，以实地调查为主，主要内容有：

（1）猪场环境状况调查：调查猪场的地理位置、周边环境、粪污处理、栏舍设备及卫生状况等。

（2）猪场饲养管理情况调查：调查饲养规模、猪群结构、管理水平（精细化管理还是粗放式管理）、管理制度及执行情况、饲料及饮水品质等。

（3）猪场兽医保障情况调查：主要调查猪场免疫计划及执行情况、发病及治疗情况、兽医场所及人员配备与技术力量等。

二是CSF流行病学调查，主要内容有：

（1）猪场感染率调查；（2）CSFV抗原检测

3 材料与方法

3.1 材料

3.1.1 全血及血清样品

2014年1月-2015年12月期间，每月不间断从各调查猪场采集不同阶段无临床症状猪群的全血血清样品，并收集疑似病料组织，记录相关信息并编号后置于4℃保存备用。2014年全年，从361家调研猪场采集全血样品7642份，血清样品4236份；2015年全年，从336家调研猪场采集全血样品7468份，血清样品4803份。

3.1.2 病料组织

2014年收集疑似CSF病料447份，2015年收集疑似CSF病料397份，无菌采集上述调研猪场疑似感染CSF病猪肾脏、脾脏、淋巴节、扁桃体等组织，观察病理变化，记录相关信息并编号4℃保存备用。

3.1.3 诊断试剂

猪瘟抗原检测试剂盒（北京世纪元亨公司），包括：猪瘟抗原包被的酶标板，辣根过氧化物酶标记的猪瘟病毒单克隆抗体、浓缩的清洗液（10）、样品稀释液、标准阴性对照、标准阳性对照、终止液、底物溶液。

Trizol Reagent、 Rnase Inhibitor、 dNTP、Taq酶、M-MLV （自大连宝生物工程公司）；琼脂糖（ Sigma 公司）；其他常规试剂均为分析纯。

3.1.4主要仪器：

Labsystems Wellscan Mk3酶标仪（法国梅里埃公司）；

TGL-16高速冷冻离心机（上海安亭科学仪器公司）；

HH-4 数显恒温水浴锅（国华电器有限公司）；ECP3000 三恒多用电泳仪（美国 Bio-raid 公司）；

DY C3113型电泳槽（美国Bio-raid公司）；

PCR 仪（美国Bio-raid公司）；

ZS-2200 型凝胶成像系统（美国Bio-raid公司）。

3.2 方法

3.2.1 实地调查法

实地调查目的是为了全面、准确了解调查对象（猪场）的基本情况，依据事先制定的调查设计方案确定好调查工作计划，然后通过“实地察看、填表记录、血样及病料采集”等方式完成调查。

3.2.2 CSFV抗原检测

CSFV抗原检测用猪瘟ELISA抗原检测试剂盒（北京世纪元亨公司），操作步骤严格按试剂盒说明书进行。

使用前，现将所有试剂解冻至室温20℃左右，将试剂轻轻摇旋混合均匀。

结果判定［4］［7］：

被检样品的矫正吸光值≥0.3，则为阳性；

被检样品的矫正吸光值＜0.2，则为阴性；

被检样品的矫正吸光值介于0.2-0.3，则为可疑。

4 结果与分析

4.1 实地调查结果

2014-2015两年间，调查范围覆盖黄冈市管辖11个县市（黄州、武穴、麻城、红安、罗田、英山、浠水、蕲春、黄梅、团风、龙感湖）共计432家猪场（2014年361家，2015年336家，有重复）。对这些猪场的猪群品种、养殖规模、生产性能、日常管理、免疫计划、疾病死亡、用药治疗等情况进行实地调查。

2014-2015两年间，发放《猪场流行病学调查表》778份，收回713份，无效调查表16份，有效调查表697份。通过统计697份《猪场流行病学调查表》，得知如下信息：697家猪场中，外三元杂交品种猪场452家（占64.85%），内三元杂交品种猪场207家（占29.70%），二元杂交猪品种猪场17家（占2.44%），长白猪品种猪场13家（占1.86%），本地太湖猪品种猪场8家（占1.15%）。

697家猪场中存栏规模200-20000头不等，其中，存栏500头以下93家，500-1000头215家，1000-2000头286家，2000头以上103家。

各猪场均有自己的免疫计划，并严格执行。生产管理秩序相对规范，少数厂家门禁、消毒措施不严。病毒性疾病主要依赖疫苗，细菌性疾病用药物控制。

疾病发生及死亡情况各猪场表现不一，由于调研目的的需要，对平时收集CSF疑似病料，作现场剖检观察并记录病理变化。典型病例的病理变化见图3-1、图3-2、图3-3、图3-4。

图1　耳根出血点

图2　肾脏、膀胱针点状出血点

图3　回盲瓣纽扣状溃疡

图4　颌下淋巴结肿胀出血

通过对疑似CSF病猪的体表观察和剖检，其主要病症表现为：体温升高、犬坐式呼吸、呕吐拉稀，初期皮肤出血，后期四肢内侧、腹下、耳根、鼻端出现紫绀；剖检其病理变化为：喉头、肠粘膜、胃底膜、肾脏、膀胱针尖状出血，肠系膜淋巴结、颌下淋巴结水胀、出血、大理石样变，回盲瓣纽扣状溃疡，脾脏边缘出血梗死。

4.2 猪场感染CSFV检测结果

2014年，调查全市11个县市361家猪场，其中检测到CSFV阳性猪场92家，全市猪场平均阳性率为25.48%；2015年，在全市范围内共计调查336家猪场，其中检测到CSFV阳性猪场79家，全市猪场平均阳性率为23.51%，两年间黄冈境内的11个县市均有阳性猪场存在（表1）。

表1　2014-2015年黄冈市不同县市中猪场感染CSFV情况

2014-2015年间，按调查进度每月统计全市阳性猪场数量情况，其结果如下（见下页表2）。

表2　2014-2015年黄冈市不同月份中猪场感染CSFV情况

由表1、表2数据分析可知：2014、2015年间CSFV已经在黄冈市境内11各县市都有感染，感染的阳性猪场占调查猪场总数的1/4左右，其中，2015年猪场感染为23.51%，2014年猪场感染25.48%，说明黄冈CSF的防控不容忽视；比较两年的阳性猪场感染率，2015年较2014年略有下降，但不明显，说明CSFV持续感染趋势依然存在，但不排除CSF防控措施的作用效果。

4.3 CSFV抗原检测结果

2014全年间，对来自全市11个县市361家猪场的7642份全血样品，进行猪瘟ELISA抗原检测，其中，检测出CSFV抗原阳性全血样品185份，CSF阳性率为2.42%；2015全年间，对来自全市11个县市336家猪场的7468份全血样品，进行猪瘟ELISA抗原检测，其中，检测出CSFV阳性全血144份，CSF阳性率为1.93%（表3）。

表3　2014-2015年黄冈市不同月份中CSFV抗原检测结果

2014年、2015年全血样品均采集于无临床症状猪群，通过表3数据分析可知， 说明：2014-2015两年间CSFV对全市2%左右猪群造成隐形感染（或带毒）；2015年猪场感染率为1.93%，2014年猪场感染率2.42%，2015年较2014年感染率略有下降，降幅明显，说明黄冈市CSF防控措施有效。从2014-2015两年间每月检测的结果看，说明CSF一年四季均可感染，但以2月份和3月份CSF感染率最低，分别为1.95%和1.70%；以11月份和12月份CSF感染率最高，分别为3.16%和 2.42%；其他各月份间感染率差异不明显。

为进一步分析不同猪群感染CSFV情况，按猪群分类，分别统计全市2014年、2015年全血样品中CSFV抗原检测结果，其结果如下（见表4）。

表4　2014-2015年黄冈市不同猪群中CSFV抗原检测结果

由表4可知，CSFV对所有猪群都有感染，但其感染率在不同猪群中间有差异表现，本调查结果显示：2014-2015两年间黄冈市不同猪群CSFV抗原阳性率顺序为育成猪＞保育猪＞育肥猪＞哺乳仔猪＞母猪＞种公猪。2014年CSFV在不同猪群中的感染率分别为育成猪（4.23%）、保育猪（3.10%）、育肥猪（2.45%）、哺乳仔猪（1.92%）、母猪（1.74%）、种公猪（1.56%）；2015年CSFV在不同猪群中的感染率分别为育成猪（3.74%）、育肥猪（2.49%）、保育猪（2.06%）、哺乳仔猪（1.51%）、母猪（1.08%）、种公猪（0.98%）。通过比较可知，总体来说育成猪和育肥猪CSFV阳性率最高，带毒现象比其他猪群严重，种公猪和母猪CSFV阳性率最低，哺乳仔猪和保育猪CSFV阳性率居中。由于所有血样均来自无临床症状的猪只，但通过检测发现CSFV仍然存在于各阶段猪群，说明：黄冈市CSFV主要成隐形感染，因此密切关注和加强CSF的检测工作不容忽视。5 综合分析上述结果，形成讨论观点：

（1）通过两年的CSF流行病学调查发现：CSFV已经在黄冈市境内11各县市都有感染，其中，受到CSFV阳性猪场比例占调查猪场的1/4，主要以隐性感染为主，偶见温和型发病，主要集中在断乳后的保育猪阶段；两年的猪场阳性率数据变化相对平稳，未见大面积大规模爆发。说明黄冈市CSFV感染范围较大，并且有持续带毒现象，CSF防控不容忽视。

（2）本检测的血样均来自于调查猪场的无临床症状猪群，说明黄冈市CSF主要以无临床征状感染为主，这对于净化CSF的难度将增大，同时，一旦由于环境或其他疾病因素造成猪群免疫力下降，CSF爆发的可能增大。

［1］甘孟侯，杨汉春.中国猪病学［M］.北京：中国农业大学出版社，2005.

［2］孟文学，浅谈近年猪瘟流行态势和防制对策［J］.中国兽医科技，2009（9）：29一30.

［3］B.E斯特劳，5.D.阿莱尔，w.L蒙加林，等.著，猪病学（第八版）［M］.赵德明，张仲秋，沈建忠，等，译.北京：中国农业大学出版社，2010，157一171.11.

［4］王在时.猪瘟防制研究的回顾和展望［C］.畜禽重大疫病免疫防制研究进展.北京：中国农业出版社，2011：64一105.

［5］于立权，崔玉东，朴范泽等.猪瘟疫苗研究进展［J］.动物医学进展，2010，23（2）：10-13.

［6］颜水泉.最新猪病学［M］.台北：德龙出版社. 2011.11-12.

［7］王在时.王玮琳.我国猪瘟长期持续存在的根源及综合防制对策.［J］.猪病防控2012（11）：30-32.

［责任编辑：秦春娥］

S858.28

A

1672-1047（2015）06-0134-04

10.3969/j.issn.1672-1047.2015.06.38

2015-11-30

黄冈职业技术学院科研项目“黄冈市猪瘟流行病学本底调查及防控技术规范研究（2015C2022107）”。作者简介：余亮彬，男，湖北浠水人，总支书记，副教授。研究方向：兽医流行病学及农业高等职业教育研究。