基质金属蛋白酶及TIMPs在EMS患者血清及腹腔液中的表达

陈子松　周杭杰　李磊　应玲红

·检测诊断·

基质金属蛋白酶及TIMPs在EMS患者血清及腹腔液中的表达

陈子松周杭杰李磊应玲红

目的 探讨血清和腹腔液中基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9及其组织抑制因子TIMP-1、TIMP-2 水平与子宫内膜异位症（EMs）发病的关系。方法 2012年6月至2013年12月87例EMs患者血清和腹腔液，用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2水平与对照组30例子宫肌瘤患者比较。结果 血清和腹腔液中MMP-2和MMP-9表达水平EMs组显著高于对照组，TIMP-1和TIMP-2表达水平EMs组显著低于对照组，比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。EMs组血清和腹腔液中MMP-2和MMP-9水平在Ⅲ～Ⅳ期显著高于Ⅰ～Ⅱ期，TIMP-1和TIMP-2水平在Ⅲ～Ⅳ期显著低于Ⅰ～Ⅱ期，比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。MMP-2和MMP-9水平血清显著高于腹腔液，TIMP-1和TIMP-2水平血清显著低于腹腔液，比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 MMP-2和MMP-9水平高表达，TIMP-1和TIMP-2水平低表达可能与EMs发生和发展有关。

子宫内膜异位症 基质金属蛋白酶 组织抑制因子

子宫内膜异位症（EMs）是育龄期妇女的常见病和多发病，其发病率呈上升趋势，发病机制至今尚未完全阐明。目前最为广泛接受的是经血逆流种植学说，该学说认为逆流入腹腔的内膜碎片种植并侵蚀生长，需要细胞外基质的破坏和重建，可能受到基质金属蛋白酶（MMPs）及其特异的组织抑制剂（TIMPs）的影响［1］。本文探讨血清和腹腔液中基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9及其组织抑制因子TIMP-1、TIMP-2水平与EMs发病的关系。

1　临床资料

1.1一般资料 选取本院2012年6月至2013年12月87例EMs患者，年龄21～45岁，平均年龄（32.5±6.0）岁。对照组30例为子宫肌瘤患者，年龄23～40岁，平均年龄（31.0±5.0）岁。两组年龄差异无统计学意义。1. 2 方法 （1）标本采集：所有患者清晨空腹抽取静脉血3ml，3000 r/min 离心 10min，取上层血清于-20℃冰箱保存；在手术时腹腔镜抽吸未被血液污染的腹腔液，3000r/min 离心10min，取上清液-20℃冰箱保存。（2）检测方法：采用酶联免疫吸附法检测血清和腹腔液，试剂盒由深圳晶美生物工程有限公司提供。

1.3统计学方法 应用SPSS13.0统计软件。检测结果以表示，组间分析采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1EMs组与对照组血清中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表达水平比较 见表1。

表1　两组血清中MMPs及TIMPs表达水平比较［ng/ml，（x±s）］

2.2EMs组与对照组腹腔液中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表达水平比较 见表2。

表2　两组组腹腔液中MMPs及TIMPs表达水平比较［ng/ml，（x±s）］

2.3EMs组各期与对照组血清中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表达水平比较 见表3。

表3　两组血清中MMPs及TIMPs表达水平比较［ng/ml，（x±s）］

2.4EMs组各期与对照组腹腔液中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表达水平比较 见表4。

表4　两组腹腔液中MMPs及TIMPs表达水平［ng/ml，（x±s）］

2.5EMs组血清与腹腔液中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表达水平比较 见表5。

表5　EMs患者血清与腹腔液中MMPs及TIMPs表达水平比较［ng/ml，（x±s）］

3　讨论

EMs被认为是一种类似癌性浸润性良性疾病，具有转移、种植、破坏组织以及潜在恶变的生物学行为，常通过粘附-侵袭-血管形成3个过程。MMP-2和MMP-9 为锌离子依赖的中性蛋白酶，是细胞外基质降解的主要蛋白水解酶，能降解明胶、基底膜、IV型胶原等，且能促进血管内皮细胞生长、导致新生血管的形成，因此在子宫内膜的异位粘附、种植、生长起重要作用［2］。Marion等［3］报道在子宫内膜异位症患者外周血及腹腔液中发现MMP-2浓度增加，MMP-2浓度与甾体激素浓度存在相关性，雌激素可能刺激MMP-2的分泌，从而导致子宫内膜异位症的形成并促进其生长。Merli等［4］发现Ⅲ期与Ⅳ期EMs组织中MMP-2、 MMP-9表达水平均明显升高，认为MMP-2、MMP-9是EMs形成与不断进展的关键。

TIMP-1和TIMP-2为糖蛋白，在体内较广泛地存在，是蛋白酶抑制剂。TIMP-1能和 MMP-9非共价结合，TIMP-2能和MMP-2非共价结合，各自形成1：l复合体。TIMP-1能抑制MMP-9活性，TIMP-2能抑制MMP-2活性，TIMP-1和TIMP 2还能抑制新生血管形成，防止细胞外基质降解。TIMP-1和TIMP-2通过调解MMP-2和MMP-9的活性调控细胞外基质的更新，细胞外基质合成与降解过程的协调依赖于它们之间的平衡，这种平衡失调，就会引起多种病理改变，这一现象在EMs发生发展中有着极其重要的作用［5］。

本资料显示，EMs组患者血清和腹腔液中MMP-2和MMP-9表达水平显著高于对照组（P＜0.05），证实高浓度MMP-2和MMP-9破坏细胞外基质，促进新生血管形成，调节细胞粘附，激活潜在活性蛋白质等方面具有重要作用，这些因素易于EMs的发生。MMP-2和MMP-9浓度在Ⅲ～Ⅳ期显著高于Ⅰ～Ⅱ期，说明高浓度MMP-2和MMP-9在EMs病情的进展方面也起着至关重要作用。由于TIMPs是MMPs的抑制剂，MMP-2和MMP-9浓度升高必然导致TIMP-1和TIMP-2浓度的降低，表现在TIMP-1和TIMP-2表达水平EMs组显著低于对照组（P＜0.05），这与锁丙荣等［6］结论一致。MMP-2和MMP-9水平血清显著高于腹腔液，TIMP-1和TIMP-2水平血清显著低于腹腔液（P＜0.05），表明在体液中的分布不同。利用TIMPs和MMPs之间的平衡关系，为EMs的治疗提供了新的方向。总之，MMP-2和MMP-9的异常表达可能与异位内膜种植有关，利用TIMP-1和TIMP-2的调节作用，采取合理的干预措施，可降低EMs的发生和发展。

1 李艳，郎景和. 基质金属蛋白酶 9 及其组织抑制剂1在子宫内膜异位症组织中的表达. 中华妇产科杂志，2006 ，41（1）：30～33.

2 李建芳，李利波，萧君明，等.基质金属蛋白酶2、9及其抑制因子1、2在子宫内膜异位症患者血清及腹腔液中的表达.中国伤残医学，2014，22（3）：29～30.

3 Marion Tuer， Weigel Julia， Krmer Christian，et al. Differential expression of MMP-2， MMP-9 and PCNA in endometriosis and endometrial carcinoma. European journal of obstetrics， gynecology， and reproductive biology， 2012，160（1）：74～78.

4 Merli Saare，Merit Lamp，Tanel Kaart，et al. Polymorphisms in MMP-2 and MMP-9 promoter regions are associated with endometriosis. Fertility and sterility， 2010，94（4）：1560～1563.

5 黄燕清，黄峥，孙玲，等.腹腔液基质金属蛋白酶-1、-2、-3、-9与子宫内膜异位症的相关性. 广东医学，2010，3l（4）：433～435.

6 锁丙荣， 於建鹏. 异位内膜中明胶酶表达与子宫内膜异位症（EMs）分期的相关性分析.医学信息，2012，25（3）：195～196.

321300 浙江省永康市妇幼保健院