驴细管冻精与鲜精人工授精情期受胎率的比较

李海静，吕鑫，姜桂苗，曲洪磊，于杰，冯玉龙，2，田方，3，王银朝*（.山东东阿阿胶股份有限公司，山东东阿252200；（2.青岛农业大学，山东青岛26609；（3.石河子大学，新疆石河子832000）

驴细管冻精与鲜精人工授精情期受胎率的比较

李海静1，吕鑫1，姜桂苗1，曲洪磊1，于杰1，冯玉龙1，2，田方1，3，王银朝1*
（1.山东东阿阿胶股份有限公司，山东东阿252200；（2.青岛农业大学，山东青岛266109；（3.石河子大学，新疆石河子832000）

对140头母驴开展了驴细管冻精与鲜精人工授精试验。试验结果显示：第三、四情期的发情率要远远高于第一、二情期的发情率，第一情期受胎率为17.2%；第二情期受胎率为34.7%；第三情受胎率为39.4%；第四情期受胎率为23.2%。通过四个情期的比较得出：第一、四情期与第二、三情期情期受胎率差异显著（P＜0.05），冻/鲜精配种受胎率分别为28%/30%,差异不显著。

驴；人工授精；受胎率

自1798年Lazzaro Spallanzani等[1]成功完成人工授精试验以来，众多科学研究者相继完成了蛙[2]、鸡[3]、牛[4]等冻精技术的研究。我国在20世纪60、70年代开始了对驴人工授精技术的研究，近年来伴随着驴产品如：阿胶、驴奶[5]、驴肉、驴鞭等的热销，养驴产业出现了回暖。由于目前国内优秀种公驴的紧缺，驴的冻精生产[6]与人工授精在实际生产应用中有着广阔的前景。东阿阿胶黑毛驴繁殖中心最大限度的发挥着复状德州驴优良性状的工程，开展了德州驴细管冻精的生产与人工授精技术的建立工作。

1　材料与方法

1.1试验驴的选择

东阿阿胶黑毛驴繁殖基地德州驴140头，年龄2～5岁，平均体重250 kg。

1.2试验驴的分组

驴群随机分组，种公驴鲜精与冻精在同一情期内随机用于发情母驴配种。

1.3试验驴发情鉴定

配种员通过对驴群的整体摸排，记录每头驴卵泡发育情况，实时跟踪母驴的卵泡的发育，以确保准确的配种时间。

1.4鲜精采集

选择8头乌头德州驴，采用假阴道采精，待公驴下鞭，用温水清洗阴茎，手握阴茎导入假阴道内，待公驴射精后，收集精液，用8层纱布过滤进量筒内，置于37℃水浴中，进行密度、活力的测定。

1.5冻精细管的生产

选择精液活率≥0.8，加入预热37°C稀释液进行初步的稀释，稀释完成后37°C静止10 min后1 500 r/min离心10 min，离心后去上清液,加入卵黄冷冻稀释液，分装打印、4℃平衡、冷冻、抽样质检，活力≥0.4、密度≥0.75亿的细管冻精，用于日后配种工作。

1.6输精

发情母驴绑定于四柱栏内，用1%的新吉尔灭清洗母驴外阴，细管冻精按照解冻程序进行解冻，鲜精根据密度稀释至0.75亿密度，采用阴道输精。

1.7配种登记

母驴受精后，记录母驴的RFID编码，输精时间，输精量，种公驴RFID编码。

1.8孕检

根据配种日期记录，配种后18 d借助B超与直肠检查对母驴进行孕检，对妊娠母驴进行统计，本情期未妊娠母驴摸排卵泡发育进入第二个情期继续配种。

1.9数据分析

采用EXCEL和SPSS软件对数据进行分析，方差采用LSD法或T检验，数据以百分率表示。

2　结果与分析

2.1实验组中情期受胎率结果（见表1）

表1　情期受胎率的比较

通过表1中情期受胎率的比较（见表1），第三、四情期的发情率要远远高于第一、二情期的发情率，第一情期配种母驴64头，受孕11头，情期受孕率为17.2%；第二情期配种49头，受孕16头，情期受孕率为34.7%；第三情期配种66头，受孕26头，情期受孕率为39.4%；第四情期配种73头，受孕17头，情期受孕率为23.2%。通过四个情期的比较得出第一、四情期与第二、三情期情期受孕率显著（P＜0.05）。

2.2实验组中冻精细管与鲜精受胎率的比较（见表2）

表2　冻精/鲜精受胎率的比较

通过表2冻精细管与鲜精的对比（见表2），冻精的配种受胎率为28%，鲜精的配种受胎率为30%，冻精与鲜精在种母驴上的配种受胎率差异不明显（P>0.05）。

3　讨论

试验组母驴的平均发情率56.5%。第一情期比第二情期发情率高6个百分点（P＞0.05），繁殖季节中母驴繁殖功能正常未受孕的情况下，进入第二情期后仍能继续启动发情周期，进入卵泡发育，进行二次配种，这是驴群保持种群繁衍的天生能力[7]。从实验中配种头数的变化可以看出，驴群进入繁殖季节后，有50%以上的母驴主要集中在第三和第四个发情周期发情。做好金4月银5月的母驴发情鉴定与配种工作，是提高驴群繁殖率的重要时间段。

试验组第二、三情期受胎率显著高于第一情期受胎率。分析原因可能是，第一情期母驴发情初期，母驴体质尚未恢复，气温变化频繁，卵泡发育过程中出现萎缩现象。人工授精技术需要操作人员具有较高的、熟练的操作技术。另外冻精质量、解冻时间等均是影响受胎率的关键因素[8]。

针对目前种公驴养殖的高成本，在无鲜精受精的情况下，细管冻精用于人工授精的优势是：易保存、易携带、操作简便[9]；养殖场冻鲜精配种试验得出：东阿繁殖基地使用冻精人工授精受胎率总体偏低，只有28%。冻精受孕率的主要原因有三个方面:一是驴细管冻精生产处于开始阶段，细管冻精的质量、密度、活力还需要进一步的改善，二是此次试验在东阿阿胶黑毛驴繁殖中心进行，2014年气候变化频繁，5月份早晚气温8℃～10℃，冻精在37度水浴条件下解冻后活率为0.35～0.65之间，解冻后精子活率低、密度低及解冻过程精子能量的损耗、膜的损伤是导致低受胎率的因素之一；三是试验母驴在配种前未进行整体统一排查，驴群个体间差异较大，对年龄偏大、体质差，生殖疾病的母驴未进行及时处理与治疗，进而影响母驴繁殖能力下降;四是人工授精技术员技术熟练程度、输精位置[10,11]等也是造成此次试验受胎率低的主要原因。

［1］Pacey A.A,TomlinsonJ.M.Sperm Banking:Theory and Practice［M］．Cambridge University，Cambridge

University Press，2009．

[2]中国科学技术情报研究所重庆分所．家畜繁殖技术进展[M]．重庆：科学技术文献出版社重庆分社，1979：1-78．

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[6]张瑞涛，张燕，高运东.驴精液采集与冷冻相关技术[J].安徽农业通报，2013,19（03）：121-124.

[7]刘权，张生英，张娴等．断乳后天数和不同月份对母羊同期发情处理效果的影响[J]．当代畜牧.2011，(8): 39-40．

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Estrus Conception Rate after Artificial Insemination Using Frozen Straw Semen and Fresh Semen in Donkey

LI Hai-jing1,LV Xin1,JIANG Gui-miao1,QU Hong-lei1,FENG Yu-long1,2,TIAN Fang1,3,WANG Yin-chao1*
(1.Shangdong Dong’e E’jiao Co.,Ltd.Dong’e 252200,China；2.Qingdao Agricultural University,Qingdao 266109,China；3.Shihezi University,Shihezi 832000,China)

Abstract：Artificial insemination(AI)was conducted by using frozen straw semen and fresh semen on 140 female donkeys.The results showed that the conception rate of second(34.7%)and third(39.4%) cycle of estrus is significant higher than that of the first(17.2%)and fourth 23.2%cycle of estrus(P<0.05). No significant difference was observed between frozen and fresh semen on pregnancy rate.

donkey,artificial insemination(AI);conception rate

S822

A

1003－6377（2015）02－0029-03

山东省农业科技成果资金项目“良种驴扩繁技术研究及产业化开发”（2012GXH21017）

李海静（1984-），女，硕士研究生，研究方向：动物遗传育种。E-mail:lihj8805963@126.com

王银朝（1981-），男，硕士研究生，研究方向：动物医学。

2015-01-11，

2015-02-02