川产益母草质量分析研究△

罗远鸿，李敏*，俸世洪，黄潇，刘聪

(1.成都中医药大学，四川 成都 611130；2.成都第一药业有限公司，四川 成都 610036)

·中药农业·

川产益母草质量分析研究△

罗远鸿1，李敏1*，俸世洪2，黄潇1，刘聪1

(1.成都中医药大学，四川 成都 611130；2.成都第一药业有限公司，四川 成都 610036)

目的：通过对比研究四川不同地区栽培及野生益母草的有效成分含量和药材产量，为建立益母草规范化种植基地提供参考。方法：参照《中华人民共和国药典》2010版用HPLC法测定益母草有效成分含量。结果：四川11个产地的18批益母草盐酸水苏碱和盐酸益母草碱含量范围分别为0.69%～2.31%和0.070%～0.454%。而凉山州所产益母草的盐酸水苏碱和盐酸益母草碱含量最高，分别为1.71%和0.263%，不仅含量是《中华人民共和国药典》2010版规定的3～5倍，产量也最高，为7258.55 kg·hm-2。结论：四川凉山州益母草产量及有效成分含量均较高，可作为益母草的适宜栽培区。

四川；益母草；有效成分；产量；适宜栽培区

益母草始载于《神农本草经》，为唇形科植物益母草LeonurusjaponicusHoutt.的新鲜或干燥地上部分，具有活血调经、利尿消肿、清热解毒的功效，临床处方用于月经不调、痛经经闭、恶露不尽、水肿尿少、疮疡肿毒[1]，同时也广泛应用于益母草膏、益母草注射液、益母草颗粒等中药成方制剂中，是中医治疗妇科疾病的要药。

现代研究表明，盐酸水苏碱和盐酸益母草碱为益母草治疗疾病的主要有效成分[2-3]。古本草中记载益母草“生海滨池泽，处处有之”，现在，益母草资源也很丰富，全国大部分地区均有分布。近年来，药学工作者针对各地益母草的生物碱含量进行了较多研究[4-7]，但关于四川不同产地益母草的分析却未见报道。本研究参照《中华人民共和国药典》2010版对产于四川11个产地的18批益母草进行含量测定和产量分析，为确定四川益母草适宜栽培区，建立益母草规范化种植基地及中药成方制剂的原料基地奠定基础。

1 材料

1.1 样品

实验所用益母草样品收集自四川境内，共18批，其中9批为野生药材，另外9批为栽种药材。栽种药材均设置3个重复，每个实验小区为67 m2[8]，经成都中医药大学中药鉴定与药用植物教研室李敏教授鉴定，均为《中华人民共和国药典》2010版收载益母草L.japonicus的干燥药材，样品信息见表1。

1.2 试药与试剂

盐酸水苏碱对照品(中国食品药品检定研究院，批号110712-201111，纯度99.4%)、盐酸益母草碱对照品(中国食品药品检定研究院，批号111823-201202，纯度94.7%)，乙腈(色谱纯，Fisher Scientific)；乙醇为分析纯，磷酸、冰醋酸为色谱纯，辛烷磺酸钠，均购自成都市科龙化工试剂厂。

1.3 仪器

高效液相色谱仪(安捷伦1200)，蒸发光检测器(ELSD 2000ES)，电子天平(常熟双杰测试仪器厂，JJ200型)。

2 方法与结果

2.1 有效成分含量测定

2.1.1 供试品溶液的制备 将收集的益母草除去杂质，切段，干燥，打粉。取粉末(过三号筛)约1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇25 mL，称定重量，加热回流2 h，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.1.2 对照品溶液的制备 精密称定盐酸水苏碱对照品2.57 mg，加70%乙醇制成0.51 mg·mL-1的溶液，即得盐酸水苏碱对照品溶液。

精密称定盐酸益母草碱对照品380 μg，加70%乙醇制成35.99 μg·mL-1的溶液，即得盐酸益母草碱对照品溶液。

2.1.3 含量测定

2.1.3.1 盐酸水苏碱的含量测定 以丙基酰胺键合硅胶(Agela Venusil HILIC VH952505-0，4.6×250 mm，5 μm)为填充剂；以乙腈-0.2%冰醋酸溶液(80∶20)为流动相；用蒸发光散射检测器检测。理论板数按盐酸水苏碱峰计算不低于6000。

分别精密吸取盐酸水苏碱对照品溶液5 μL、10 μL，进样，以对照品峰面积的对数(Y)为纵坐标，进样量的对数(X)为横坐标，采用外标两点法，得回归方程Y=1.1829X+6.4614，R2=1。

精密吸取供试品溶液10 μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，其结果见表1。

2.1.3.2 盐酸益母草碱的含量测定 以十八烷基硅烷键合硅胶(安捷伦4.6×150 mm，5 μm)为填充剂；以乙腈-0.4%辛烷磺酸钠的0.1%磷酸溶液(24∶76)为流动相；检测波长为277 nm。理论板数按盐酸益母草碱峰计算应低于6000。

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，测定，计算，结果见表1。

表1 四川不同产地益母草含量测定表(n=3)

按照《中华人民共和国药典》2010版益母草含量测定项下要求，含盐酸水苏碱不得少于0.50%，盐酸益母草碱不得少于0.050%。18批样品中，盐酸水苏碱含量为0.69%～2.31%，盐酸益母草碱含量为0.070%～0.454%，均符合规定。其中，以四川省凉山州会理县所产益母草的盐酸水苏碱和盐酸益母草碱含量最高，是《中华人民共和国药典》规定的4～7倍。

将同一产地有多批样品的药材的含量测定结果取平均值，对结果进行分析，具体情况见图1。

由图1可知，6个产地中，以四川省凉山州所产益母草的盐酸水苏碱和盐酸益母草碱含量最高，分别为1.71%和0.263%，是《中华人民共和国药典》规定的3～5倍。

2.2 栽培益母草产量分析

对于栽培的益母草，在实验小区按6.7 m2取样，3次重复[8]，除去杂质，切段，干燥后称重，折算产量，结果见表2。

在四川省凉山州会理县栽培的YMC-10样品产量最高，每公顷可达8032.0 kg，而产自自贡的益母草产量最低，仅3696.7 kg。将同一产地的样品测定结果取平均值，对结果进行分析，具体情况见图2。

表2 栽培益母草(干品)产量测定结果表(n=3)

从图2可知，产自四川凉山州的益母草产量为7258.55 kg·hm-2，远高于其他产地。

图1 不同产地川产益母草含量测定结果图

图2 不同产地益母草产量结果图

3 结论与讨论

3.1近年来，关于益母草盐酸水苏碱含量的分析较多，据报道，产自我国各省的益母草，其含量从0.01%～2.14%之间有报道，以我国北方的益母草含量较高，最高为2.14%[4-5，7]。然而，该18批川产益母草样品盐酸水苏碱和盐酸益母草碱的含量均超过药典规定，平均含量分别为1.34%和0.199%，最高者可达2.31%和0.454%，是药典规定的4.6和9.1倍。样品送四川省食品药品检验所检测，各项指标均符合药典规定，表明四川的益母草质量较优。

3.218批样品中，野生益母草盐酸水苏碱和盐酸益母草碱的含量分别为0.95%和0.115%，而栽培益母草则为1.73%和0.283%，远高于野生益母草，为将栽培益母草用作中药成方制剂的原料提供了理论基础。

3.3益母草是临床常用大宗中药材，广泛用于治疗妇科疾病，其中药成方制剂益母草注射液用于妇女助产，益母草药材的安全性和有效性不容忽视。而市场上的益母草多为野生品，药材质量不稳定，因此，应规范化种植益母草，从源头抓起，为市场提供质量稳定、均一、可控的的药材。本文首次对四川不同地区所产益母草进行分析，结果显示四川省凉山州野生益母草的有效成分含量较高，盐酸水苏碱含量最高可达1.44%，甚至高于部分地区的栽培药材，说明四川省凉山州比较适宜益母草的生长，这可能与凉山日照充足，昼夜温差大，有利于有效物质积累有关。同时，该地栽培益母草的有效成分含量和药材产量也最高，且相对稳定。综上所述，四川省凉山州是益母草的适宜栽培区，可考虑在此建立益母草规范化种植基地和益母草中药成方制剂原料基地。

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[2] 范美华，王健鑫，李鹏，等.益母草的研究进展[J].中国药物与临床，2006，6(7)：528-530.

[3] 顾月丽，顾江红，等.益母草药理作用的研究[J].中国中医药科技，2008，15(4)：320-321.

[4] 徐冰，杜守颖，翟永松，等.HPLC法测定不同产地益母草中盐酸水苏碱的含量[J].中国药品标准，2011，12(4)：264-268.

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[8] 李敏，卫莹芳.中药材GAP与栽培学[M].北京：中国中医药出版社，2006：84-91.

QualityAnalysisofSichuanmotherwort

LUOYuanhong1，LIMin1*，FENGShihong2，HUANGXiao1，LIUCong1

(1.ChengduUniversityofTCM，Chengdu611130，China；2.ChengDuNO.1PharmaceuticalCo.，Ltd.，Chengdu610036，China)

Objective：To provide references for establishing standardized planting base by comparing and studying the effective components and medical yield of cultivated and wild motherwort from different areas of Sichuan.Methods：Determining the content of effective component in motherwort by HPLC referring to the Chinese Pharmacopoeia(2010 edition).Results：The ranges of the content of stachydrine hydrochloride and leonurine hydrochloride of the 18 groups of motherwort from 11 areas of Sichuan were 0.69%-2.31%and 0.070%-0.454%.The highest content of hydrochloric stachydrine(1.71%)and leonurine hydrochloride(0.263%)in motherwort were produced in Liangshan prefecture，which were 3- 5 times more than the standards of Chinese Pharmacopoeia(2010 edition).The yield of motherwort in Liangshan prefecture is the highest，which was 7258.55 kg·hm-2.Conclusion：The yield and the content of effective components of motherwort in Liangshan prefecture in Sichuan are higher，where it can be used as a suitable cultivation area for motherwort.

Sichuan；motherwort；active ingredients；yield；suitable cultivation area

2014-11-13)

四川省科技计划项目-益母草资源保护及规范化种植基地建设关键技术研究(2014SZ0084)；2015年度中医药行业科研专项-益母草优良品种选育方法及种植质量控制技术研究(2015468002-1)

*

李敏，教授，研究方向：中药品种、质量及资源研究；E-mail：028limin@163.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2015.5.012