不同年限园参和石柱参不同部位人参皂苷的含量测定

郑秀茜，房城，刘永武，贾博宇

(黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040)

·基础研究·

不同年限园参和石柱参不同部位人参皂苷的含量测定

郑秀茜，房城，刘永武，贾博宇*

(黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040)

目的：在人参皂苷的生产中，根据其不同部位、不同产地、不同年限的差异选择适宜的提取分离样品。方法：采用HPLC法测定不同产地园参和石柱参不同部位人参皂苷化合物的含量。结果：提取人参皂苷Rg1时建议优先选择桓仁7年生园参；提取人参皂苷Re时建议选用低年限的人参样品；提取人参皂苷Rb1时建议选用须根。结论：不同年限、不同产地、不同部位的人参皂苷含量差异较大，研究为增加人参皂苷的提取率、降低生产成本提供参考。

园参；石柱参；人参皂苷；不同部位

人参系五加科植物人参PanaxginsengC.A.Mey.的干燥根和根茎，在我国主产于东北三省，被称为“东北三宝”之一。人参具有大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津养血，安神益智的功效[1]。园参为人工栽培于园地的人参。石柱参为人参野生变家种的优良品种[2]，栽培区在辽东山地，龙岗山西南延伸部[3]。

人参主要含有人参皂苷类化合物，该类化合物具有较强的药理活性，具有抗癌、抗衰老等重要的药用价值[4-6]。本文通过对不同栽培年限、不同产地园参和石柱参样品的不同部位中人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量进行比较研究，客观全面地评价人参药材质量，为人参中有效成分的提取提供参考。

1 仪器与材料

1.1 仪器

高效液相色谱仪(HITACHI UV Detector-L7420，pump-L7100，日本日立公司)，Chromoto-Solution Light色谱工作站(SHIMADZU)，sartorius BS 124S精密电子天平，KQ5200E超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

1.2 材料

对照品人参皂苷Rg1(批号：110703-200322)、人参皂苷Re(批号：110754-200320)及人参皂苷Rb1(批号：110704-200318)购于中国食品药品检定研究院。园参药材分别采集于辽宁省宽甸、桓仁，石柱参药材采集于辽宁省宽甸县石柱乡，由沈阳药科大学路金才教授鉴定为五加科人参属植物人参PanaxginsengC.A.Mey.的干燥根及根茎。

乙腈为色谱纯，磷酸为分析纯，水为实验室自制，其他试剂均为分析纯。

2 方法

2.1 色谱条件

色谱柱：Thermo Hypersil-Keystone C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；紫外检测波长：203 nm；进样体积：20 μL；体积流量：1.0 mL·min-1；柱温：(30±0.15)℃；流动相系统洗脱程序见表1，A为乙腈；B为0.05%磷酸水溶液。

表1 流动相洗脱程序

2.2 对照品溶液制备

准确称取对照品人参皂苷Rg1、Re、Rb1分别为5.4、5.6、5.1 mg，加甲醇溶解并定容至10 mL量瓶中，得对照品母液。从母液中各分别移取0.05、0.1、0.5、1、1.5 mL定容于2 mL量瓶中，制成各级对照品溶液。

2.3 供试品溶液制备

取各人参样品生药粗粉0.1 g，加入70%甲醇溶液放置过夜，超声30 min，微孔滤膜滤过，即得。

2.4 方法学考察

2.4.1 线性关系考察 在上述分析条件下将人参皂苷对照品溶液的6个梯度溶液分别进样20 μL，测定不同人参单体皂苷的峰面积，以进样量为横坐标X(μg)，峰面积为纵坐标Y(μV)，进行线性回归，得人参皂苷Rg1、Re、Rb1的回归方程分别为：Y=6×105X-2 779.6，r=0.999 7；Y=9×105X-31 204.8，r=0.999 7；Y=3×105X-4 678.9，r=0.999 6。人参皂苷Rg1在0.27～10.8 μg、Re在0.28～11.2 μg、Rb1在0.255～10.2 μg线性关系良好。

2.4.2 精密度试验 取同一人参供试品(桓仁6年生园参主根)溶液，按上述色谱条件，连续进样6次，测定Rg1的峰面积，并计算出峰面积的RSD=0.75%。

2.4.3 稳定性试验 取同一人参供试品(桓仁6年生园参主根)溶液，按上述色谱条件，分别于第0、2、4、8、12、24 h进样分析，测定人参皂苷Rg1、Re、Rb1的峰面积，并计算出峰面积的RSD分别为1.53%、1.46%、1.18%，结果表明供试品溶液至少在24 h内稳定。

2.4.4 重复性试验 取同一人参样品(桓仁6年生园参主根)生药粗粉，按供试品溶液制备方法平行制备6份样品溶液，按上述色谱条件进行分析，测定人参皂苷Rg1、Re、Rb1的峰面积，并计算出峰面积的RSD值分别为1.96%、1.99%、1.65%，表明实验方法可靠。

2.4.5 加样回收试验 取已知含量(含人参皂苷Rg10.32%、Re 0.14%、Rb10.35%)的人参药材(桓仁6年生园参主根)9份，每份0.1 g。每3份为1组，向每组中分别加入低、中、高浓度的混合对照品溶液，然后按供试品制备项下制备以上样品。回收率结果见表2，结果表明方法可靠。

表2 人参皂苷Rg1、Re、Rb1加样回收率试验

3 结果

根据上述条件，测定了人参药材中人参皂苷Rg1、Re、Rb1质量分数，测定结果见表3，直观统计结果见图1～4。

表3 不同人参药材中人参皂苷Rg1、Re、Rb1测定 (%)

图1 不同人参芦头中含量变化

图2 不同人参主根中含量变化

图3 不同人参侧根中人参皂苷含量变化

图4 不同人参须根中人参皂苷含量变化

4 讨论

采用高效液相色谱法对不同产地、不同年限、不同部位园参和石柱参中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量进行了测定，计算其质量分数，并对其结果进行了分析。

人参皂苷Rg1的含量总体上是芦头>主根或侧根>须根，并且从测定结果中可以看到不同产地人参样品Rg1的含量差别较大：桓仁园参>宽甸园参和宽甸石柱参。桓仁园参中各部位人参皂苷Rg1的含量呈逐年上升趋势，尤其是7年桓仁园参人参皂苷Rg1的含量较高，但宽甸产地的园参及石柱参随年限增长其含量变化并不明显。在只考虑人参皂苷Rg1的提取分离时，建议优先选择桓仁7年生园参。

人参皂苷Re的含量总体上是须根>芦头>主根或侧根，并且不同产地的人参皂苷Re含量差异不明显。两个产地不同年限的各部位人参皂苷Re含量变化不大，所以只是单独提取人参皂苷Re可以不考虑年限，即选用低年限的人参样品进行分离提取。

人参皂苷Rb1的含量总体上是须根>芦头>侧根>主根，尤其是须根中该皂苷含量与其他部位差异较大。不同产地样品中人参皂苷Rb1含量差异并不明显，但宽甸石柱参侧根中人参皂苷Rb1含量呈下降趋势。

从总体含量上看，人参须根中人参皂苷含量较高。在人参皂苷的生产中，可以根据其不同部位、不同产地、不同年限的差异，选择适宜的提取分离样品。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：8.

[2] 王荣祥，赵建东，许亮.石柱参的历史考证[J].辽宁中医学院学报，2005，7(3)：269.

[3] 王贺新.中国石柱参生长特征研究[J].辽宁林业科技，2001(5)：51.

[4] 金建生，赵朝晖，陈晓春.人参皂苷Rg1抗衰老作用可能与改变p16、cyclinD、CDK4 的表达有关[J].中国临床药理学与治疗学，2004，9(1)：29-34.

[5] 赵朝晖，陈晓春，朱元贵.人参皂苷Rg1延缓细胞衰老过程中端粒长度和端粒酶活性的变化[J].中国药理学通报，2005，21(1)：61-66.

[6] 曹智，张燕娣，许永华，等.人参有效成分及其药理作用研究新进展[J].人参研究，2012(2)：39-43.

DeterminationofGinsenosidesContentinDifferentPartsofCultivatedPanaxginseng

ZHENGXiuxi，FANGCheng，LIUYongwu，JIABoyu*

(HeilongjiangUniversityofChineseMedicine，Harbin150040，China)

Objective：To determined the ginsenosides content in different parts of cultivatedPanaxginsengof varied origin，growing years，for the purpose of ginsenoside production.Methods：The content of ginsenosides was determined by HPLC.Results：Rg1was enriched in seven years old cultivated ginseng.The content of Re was related with growing years of ginseng.Rb1was enriched in fibrous.Conclusion：Ginsenosides content varies with ginseng origin，age and parts.This research aims to help promote the ginsenoside extraction efficiency.

Cultivated ginseng；Shizhu Ginseng；ginsenoside；different parts

2015-01-21)

*

贾博宇，博士，副研究员，研究方向：中药抗衰老；E-mail：454734840@qq.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2015.7.008