急性下呼吸道感染患儿病原学分析及其与哮喘发作的关系

付卓，万莉雅，徐勇胜，郭伟，郑跃杰

急性下呼吸道感染患儿病原学分析及其与哮喘发作的关系

付卓1，万莉雅1，徐勇胜1，郭伟1，郑跃杰2△

目的 研究下呼吸道感染（LRTI）患儿全年的呼吸道病毒感染情况以及呼吸道病毒感染导致哮喘发作的关系。方法 选择2013年5月—2014年4月来我院的急性LRTI患儿231例为研究对象。从鼻咽抽出液中分离呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（AV）、副流感病毒（PIV）、流感病毒（IFV）和鼻病毒（RV）进行多重PCR扩增。应用荧光免疫实验测定血清特异性IgE水平，如果数值超过0.35 IU/mL则可认定为特异敏感性。结果 RSV是引起住院患儿毛细支气管炎的最常见病原，AV易导致肺炎。哮喘发作更易由RV和IFV感染引起，而IFV则是支气管炎的主要病原。结论 RV和IFV与具有特应敏感性住院患儿的哮喘急性发作有关。

哮喘；变应原；正黏病毒科；鼻病毒属；儿童；下呼吸道感染

儿童急性下呼吸道感染性疾病（lower respiratory tract infection，LRTI）多是由呼吸道病毒引起的。呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（AV）、副流感病毒（PIV）、流感病毒（IFV）和鼻病毒（RV）是导致儿童急性下呼吸道感染最常见的病原体。这些病毒的活性通常具有季节性，且根据宿主年龄、病毒的毒力和被感染的气道的不同引起不同类型的下呼吸道感染［1-2］。在儿童急性LRTI中，哮喘急性发作是严重影响小儿身心健康的疾病［3］。过敏原引起的特应性致敏作用是哮喘疾病进程中最主要的危险因素之一，该特应性往往存在于3岁以上哮喘患儿中［4］。呼吸道病毒感染会阻碍机体对变应原的耐受，诱导变应原产生致敏作用［5］，同时增加机体对气源性过敏原的敏感性，使炎症长时间存在，导致气道高反应性。在哮喘发作的儿童中，特异性病毒感染与过敏原致敏作用之间的相关性少有报道。本研究通过对下呼吸道感染患儿的病原学分析，研究呼吸道病毒感染与过敏原致敏作用对儿童急性哮喘的诱发作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2013年5月—2014年4月我院231例急性LRTI住院患儿为研究对象，依据参考文献［6］进行诊断。男130例，女101例。年龄16个月～10岁。其中肺炎120例、支气管炎20例、毛细支气管炎66例、哮喘25例。鼻咽抽提物中 RSV感染 109例（47.2%）、RV感染46例（19.9%）、AV感染36例（15.6%）、IFV感染26例（11.3%）、PIV感染14例（6.0%）。所有患儿均记录过敏性疾病的家族史。

1.2 嗜酸性粒细胞（TEC）总数和血清总IgE水平检测 流式细胞仪（Beckman Coulter Pasadena CA，USA）检测血液嗜酸性粒细胞计数，荧光免疫实验（ImmunoCAP 250，Phadia，Uppsala，Sweden）进行猫、狗、蟑螂、链格孢属、户尘螨、粉尘螨、草、树、牛奶、鸡蛋、大豆和花生的血清总IgE水平和特异性IgE水平。如果1个以上过敏原的特异性IgE水平达到0.35 IU/mL以上则认为具有特应性致敏作用。

1.3 鼻咽样本采集和病毒分析 就诊当天，使用一次性电动吸痰器插入到鼻孔内5～7 cm处，温和缓慢地吸取患儿鼻咽样本。为了避免交叉污染，使用一次性手套操作，且吸取过程中避免任何液体进入鼻腔。通过QIAamp病毒RNA小提试剂盒（Qiagen，Hilden，Germany）进行抽提鼻咽抽吸物中病毒的 RNA。使用 cDNA合成试剂盒 （Fermentas，Burlington，ON，Canada）合成cDNA。通过多重逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测5种病毒（AV、RSV、RV、PIV和IFV）。

1.4 统计学方法 使用SPSS 13.0软件对数据进行统计学分析。计量资料使用均数±标准差（±s）表示，对非正态分布的数据，进行对数转换。多组间比较采用单因素方差分析，多重比较采用Bonferroni检验。计数资料比较采用卡方（χ2）检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同呼吸道病毒感染患者的情况比较 与AV、RV、IFV感染引起的LRTI相比，RSV病毒感染者发病年龄更小。IFV病毒主要感染大龄儿童，差异有统计学意义。各病毒组性别差异无统计学意义。与AV感染相比，RV感染引起的LRTI的TEC水平较高（P＜0.05）。在各病毒感染组中，血清总IgE水平差异无统计学意义，见表1。

2.2 不同疾病患儿病毒的感染情况 哮喘和支气管炎患儿的年龄高于肺炎和毛细支气管炎患儿。毛细支气管炎的男患儿较肺炎、支气管炎和哮喘多。AV则易导致肺炎，而RSV病毒更易引起毛细支气管炎。哮喘发作更易由RV和IFV感染引起，而IFV则是支气管炎的主要病原（P＜0.05），见表2。

2.3 不同疾病患儿的特应性特征 特应性致敏作用在肺炎和哮喘患儿中发病率均高于毛细支气管炎患儿（P＜0.05）。与肺炎和支气管炎患儿相比，哮喘患儿血液TEC明显增加，与肺炎患儿比较，哮喘患儿血清总IgE水平也增高（P＜0.05），见表3。

Tab.1 Comparison of clinical data between different respiratory viral infections表1 不同呼吸道病毒感染患者的情况比较

Tab.2 The different virus infections situation of children with various respiratory tract diseases表2 不同呼吸道疾病患儿病毒的感染情况

Tab.3 Atopic characteristics in children with various respiratory tract diseases表3 不同呼吸道疾病患儿的特应性特征

3 讨论

急性病毒性呼吸道感染可诱发儿童哮喘发作［4］。研究表明，引起儿童哮喘的病毒多数是RV和IFV，而引起幼儿哮喘的病毒多数是RSV和RIV［5］。高浓度过敏原引起的致敏作用与呼吸道感染所致哮喘发作之间存在协同作用［7］。

感染不同病毒的患儿，其临床诊断是相对清楚的。本研究结果显示，与其他病毒相比，AV感染多数表现为肺炎，RSV通常可在急性毛细支气管炎患儿中检测出来。RV导致哮喘加重的可能性较大，与韩国的研究结果一致［9-10］。在本研究中发现，与其他病毒相比，由RV病毒引起的LRTI患者血液TEC的水平较高。Kato等［11］发现，在哮喘儿童中RV病毒感染使TEC阳离子蛋白（ECP）表达增加。这些结果说明RV病毒与TEC炎症有关［12］。

本研究结果证实，与其他病毒相比，RV会造成急性哮喘患儿易发生致敏化和感染。有研究表明，RV在急性哮喘加重和哮喘进程中起重要作用［4］。有一项研究将RV病毒接种至轻度哮喘者后发现其气道高反应性增加，且痰中的ECP也随之增加［5］。过敏原致敏作用是RV导致学龄儿童哮喘疾病的高风险因素［13］。过敏原敏感性儿童更易患有病毒呼吸道疾病和哮喘。而非敏感性儿童在感染时常无症状。本研究结果与先前的报道一致，这说明RV感染与哮喘加重之间存在相关性。RV和特应性致敏作用之间的关系是因为低水平的干扰素（IFN）-γ使得过敏性机体对RV较为敏感，特应性敏感可以激发RV受体和细胞间黏附分子1表达［14］。有研究证实，流感和过敏原致敏作用之间存在相关性，哮喘儿童患流感的概率也随之增加［15］。

本研究的局限性是样本量小、研究群体的选择范围小，还应进行多中心大样本的对比研究。另外，本研究为横向研究，不能证实在哮喘发作时RV或IFV感染与过敏原致敏作用之间的因果关系，而不是一个群组研究。有待大规模群组研究深入探讨。

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（2014-09-30收稿 2014-12-30修回）

（本文编辑 魏杰）

Pathogenic analysis of acute lower respiratory infections and its correlation with asthma exacerbations

FU Zhuo1，WAN Liya1，XU Yongsheng1，GUO Wei1，ZHENG Yuejie2△
1 Tianjin Children's Hospital，Tianjin 300074，China；2 Zunyi Medical University Shenzhen Children's Hospital
△Corresponding Author E-mail:yuejiez@sina.com

Objective To investigate the prevalence of year-round respiratory viral infection in children with lower respiratory tract infection（LRTI），and the relationship between respiratory viral infection and allergen sensitization in exacerbating asthma.Methods A total of 231 hospitalized children with acute LRTI were investigated from May 2013 to April 2014.The 5 most common respiratory viruses were isolated from nasopharyngeal aspirate using multiplex reverse transcription-polymerase chain reaction，including respiratory syncytial virus（RSV），adenovirus（AV），parainfluenza virus（PIV），influenza virus（IFV）and rhinovirus（RV）.Atopic sensitization was defined if more than 1 serum specific immunoglobulin E level measured using immunofluorescence experiment was over 0.35 IU/mL.Results RSV was the most common pathogen of bronchiolitis in hospitalized children through the year.RV or IFV infections were more prevalent in asthma exacerbations compared to other LRTIs.AV was more likely to cause pneumonia.RV and IFV were associated with asthma exacerbations in children with atopic sensitization，but not in nonatopic children.Conclusion RV and IFV are associated with hospitalization for asthma exacerbation in children with atopic sensitization.

asthma；allergens；orthomyxoviridae；rhinovirus；child；lower respiratory infection

R725.6

A DOI：10.11958/j.issn.0253-9896.2015.05.016

1天津市儿童医院（邮编300074）；2遵义医学院深圳儿童医院

付卓（1977），女，主治医师，硕士在读，主要从事儿童呼吸疾病方面研究

△E-mail:yuejiez@sina.com