从×线影像学观测布依药鹿角壮骨煎液对大鼠骨折模型的作用

王羿 何先游

摘要：目的从X线影像学的改变来观察布依药“鹿角壮骨煎液”对大鼠骨折模型修复的作用。方法 手术造成SD大鼠胫骨中下段骨折模型60只，随机分成治疗组30和对照组30，治疗组以布依药鹿角壮骨煎液灌胃，对照组给予等量0.9%生理盐水灌胃。在造模后的第15、21、30、42d分别取两组大鼠行骨折处X线摄片并评分。结果 治疗组与对照组相比较，在造模第15天及以后治疗组X线影像学与对照组有明显差异（P<0.05）。结论布依药鹿角壮骨煎液可促进骨痂生长，提高影像学评分，对骨折愈合有修复作用。

关键词：骨折；布依药；大鼠骨折模型；影像学

中图分类号：R285.5

文献标志码：A

文章编号：1007 - 2349（ 2015） 02 - 0059 - 02骨折是机械性超负荷，致使骨结构遭到破坏，骨失去支撑及杠杆作用的一种表现。很多骨折都源于高能量外伤，导致骨小连及延缓愈合发生率较高，是临床需要解决的问题。祖国医学和民族医药在骨折治疗上有悠久的历史，能够使骨骼延缓愈合和不愈合重新获得较迅速的愈合[1]。本课题组在临床观察中发现“鹿角壮骨煎液”在骨折的治疗中疗效确切，本文从动态观察骨折愈合过程中骨折端的影像学变化来验证“鹿角牝骨煎液”对骨折大鼠模型的修复作用，从而为临床治疗提供理论依据和实验支撑。1 材料和方法1.1 动物 本课题实验动物是清洁级健康Sprague Dawley（ SD）雄性大鼠60只，6月龄，体重280～320g，重庆滕鑫比尔实验动物销售有限公司提供，动物合格证号：SCXK（渝）2012- 0004、1.2药物及制备本实验布依药鹿角壮骨煎液由黔南州中医院药剂科提供。将告独六、萝卜难、印乃岜、龙自然、戈难巩、专雄等（各100g）放入铝锅中，加入6000ml，蒸馏水，常温下浸泡24h后加热沸腾，纱布过滤后得到3000ml.含生药量为lg/mL的浓缩液，装瓶冷藏备用.1.3主要试剂与仪器1.3.1 主要试剂，苏木素伊红染色试剂盒（HE试剂盒），产品编号：AR1180，在博士德生物工程有限公州购买1.3.2主要仪器，C型臂电视X光机（德国西门子公司），Im-agePro Plus5.0图像分析软件（美国Media Cyberneties公ngk ），数码照像机（E-500型，日本Olymupus公司）。1.4方法1.4.1模型建立[2]适应性喂养3d后进行造模，方法如下：以10%水合氯醛按0.3mL/100g腹腔麻醉大鼠，麻醉显效后将大鼠以仰卧位固定于操作台上，左下肢剥毛、消毒，无菌操作下取内侧纵行切口约1.5cm，逐层切开皮肤及皮下，显露胫骨，在胫骨中下1/3交界处，用手术刀片切开3 mm宽的骨膜，显露骨膜下骨质，以骨刀造成横断骨折，左膝关节髌韧带处剥毛、消毒，无菌操作下取前侧纵行切口约1.5 cm，分开髌韧带于止点处进针，顺行穿直径为1.1mm克氏针，通过断端并至胫骨远端有阻力后回抽，折弯、剪断埋于软骨面下，然后逐层缝合。术后进行3d抗感染治疗，肌肉注射青霉素8万U/100 g，1次/d。1.4.2动物分组及给药方法造模成功后的大鼠随机分为治疗组30，对照组30分笼喂养，在室温22～ 270C、相对湿度80%的清洁环境中饲养，使用标准饲料，自由摄食和摄水。治疗组给予布依药鹿角壮骨煎液按剂量5g/（kg·d）灌胃，根据大鼠对人等效剂量的2倍[3]，每日早晚2次。对照组给予等量0. 9%生理盐水灌胃，方法同治疗组。所有实验动物均在造模后12h给药。1.4.3影像学观察2组大鼠均在术后第7、15、21、30、42d随机选取大鼠行腹腔麻醉后进行X线摄片，观察骨痂生长及骨折愈合情况并进行评分。评分标准[4]：1分，骨折断端边缘趋向性模糊，骨膜轻度反应，无骨痂可见；2分，断端边缘模糊，骨膜反应浅淡，骨痂少量，密度较淡，边缘不整齐；3分，断端边缘仍可见，但接近消失，骨膜反应较深，骨痂量增多，但未填满缺损，密度增深，边缘较清；4分，断端边缘完全消失，骨膜反应密度近似骨影，骨痂填满缺损，与骨皮质密度相同并相互连接。2结果2.1 布依药鹿角壮骨煎液对大鼠骨折后X线影像学的作用 在造模的第15、21、30、42 d分别随机取2组大鼠予以X线摄片观察？在第15d时，治疗组骨折断端周同大量软组织增高影；而对照组骨折线较清晰；第21天时，治疗组骨折断端骨密度有所增加，骨膜反应渐深，生成较多骨痂，断端边缘仍可见，对照组仅有少量骨痂生长。第30天时，治疗组大量骨痂已包绕骨折断端，骨折线模糊，对照组出现较多骨痂。第42天时，治疗组骨折线基本消失，骨小梁力学结构渐为合理，对照组骨折处大量骨痂生长，骨折线可见.2.2布依药鹿角壮骨煎液对大鼠骨折后X线影像评分影响 根据造模后第15、21、30、42d大鼠骨折处X线影像，对其骨折愈合及骨痂生成情况进行评分（表1）。表l示，在第15d、21d、30d、42d差异均显著（P<0.05），且这种差异逐步加大，但在3周后差异更加明显，治疗组较对照组提高影像学评分更为显著。3讨论

贵州省是布依族、苗族群居地，民族医药是特色，老百姓对于民族医药信任程度高，得到广大群众的欢迎。布依药“鹿角壮骨煎液”是贵州省黔南州中医院名老中医经数十年悉心研究和改进布依族民间药方（院内制剂），采用告独六（鹿角霜）、萝卜难（续断）、印乃岜（骨碎补）、龙自然（自然铜）、戈难巩（党参）、专雄（川芎）等10多种布依药为原料加工而成，补益肝肾、强筋壮骨的功效确切。我们在大量临床治疗中并结合“经皮微创内同定系统（LISS钢板）配合布依药鹿角壮骨胶囊治疗胫骨中下段骨折的临床疗效”课题进行研究，运用手术内固定治疗骨折的同时，配合口服布依药“鹿角壮骨煎液”治疗，可缩短骨折愈合时间，促进骨折愈合。

通过本课题观察，在第15、21、30、42 d2组大鼠X线影像评分结果差异显著（P<0.05），且这种差异逐步加大。根据结果分析，布依药鹿角壮骨煎液促进骨折愈合，可能是通过促进成骨细胞的增值与分化而促进成骨，使软骨骨痂向骨性骨痂转换，提高了骨的强度，从而加速了骨折愈合[5]临床和实验都已证明中医药（民族医药）在治疗骨折方面具有独特的优势和潜力，中医药（民族医药）已经成为广泛采用的治疗骨折的重要手段[6]。布依药“鹿角壮骨煎液”已广泛运用于临床，在促进骨折愈合上疗效确切，符合临床用药特点，无不良反应。本课题从动物实验和影像学观测的角度进一步验证了布依药“鹿角壮骨煎液”的疗效，为临床进一步推广该药提供了理论依据。参考文献：[1]郑培永，陈绎志，赵光复，中药促进骨折愈合的实验研究进展[M].中医止骨，1999，11 （1）：53.[2]沈霖，林燕萍，王拥军.骨伤科实验研究[M].北京：北京科学技术出版社，2005：384.[3]孙永生，温建民，吴林生，等.骨折三期治疗对骨生长因子FCF-2表达影响的实验研究[J].中国骨伤，2004，17（4）：222-226.[4]上海市骨伤科研究所伤科论文汇编[M].第3辑.上海：上海科技出版社，1964，226.[5]潘贵超，王辉奇，张治国.补肾健脾活血方对大鼠骨质疏松骨折愈合的作用及其机理探讨[J].中日中医基础医学杂志，2011，17（2）：156-157.[6]崔永锋，王琦，张毅，等.杜仲对兔骨折愈合影响的x线影像学研究[J].中药新药与临床药理，2003，14（3）：163-165（收稿日期：2014-11-07）