3个荞麦品种黄酮含量及清除自由基活性比较

李兆君

摘要：采用紫外-可见分光光度法测定了北海道、美国甜荞、北早生3个荞麦品种中黄酮含量及清除自由基活性。结果表明，北海道黄酮含量（0.652%）略高于美国甜荞（0.626%），北早生黄酮含量最低（0.568%）。DPPH是常用的检测清除自由基活性的方法，3种荞麦提取液对DPPH自由基均有一定的清除能力，北海道清除率最高（54.7%），其次是美国甜荞（52.6%），最低的是北早生（41.6%）。

关键词：荞麦；黄酮；自由基清除率

中图分类号： S517.01 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2015）07-0355-02

荞麦别称乌麦、三角麦，我国是其生产大国[1]。1984年，宁夏回族自治区开展了荞麦引种观察、品种鉴定、品种比较试验，截至2004年已进行了6轮，确定了一批荞麦新品种，北海道、美国甜荞、北早生就是其中的选种作物[2]。荞麦是药食同源的物种，富含黄酮类化合物，尤其富含芸香苷。黄酮类化合物具有降低血糖、血脂等功能，对于治疗糖尿病、高血压、心脏病有辅助疗效，同时还是天然抗氧化剂，具有清除自由基的作用[3]。本研究对比3种荞麦黄酮含量以及清除自由基的作用，旨在为开发利用天然荞麦保健产品提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

本试验中荞麦品种为北海道、美国甜荞、北早生，均产自宁夏回族自治区固原市，由固原市农业科学研究所鉴定并提供。芸香苷对照品（92.5%）由中国药品生物制品检定所提供，批号100080-200707，DPPH（1，1-二苯基-2-三硝基苯肼，C18H12N5O6）纯度>95%。Al（NO3）3、NaNO2、NaOH、无水乙醇（天津科密欧化学试剂）为分析纯；水为蒸馏水。主要仪器：万分之一AEU-210电子天平（日本岛津公司）；UV-1600紫外分光光度计（上海美谱达仪器有限公司）；瑞尔回流提取装置。

1.2 方法

1.2.1 3种荞麦样品溶液的制备

取3个荞麦品种洗净、烘干、粉碎，过40目筛，精密称取5.0 g置于索氏提取器中，在料液比1 g ∶30 mL、乙醇浓度75%、80 ℃下提取4 h，将提取液浓缩至100 mL[4]。

1.2.2 芸香苷标准曲线

准确称取芸香苷标准品10.0 mg，用30%乙醇稍微加热使其完全溶解，转入50 mL容量瓶中，用30%乙醇定容，摇匀，得到0.2 mg/mL芸香苷标准溶液。准确吸取芸香苷标准溶液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL置于25 mL容量瓶中，加入5% NaNO2 0.7 mL，静置5 min，加入10% Al（NO3）3 0.7 mL，摇匀，静置6 min，加入1 mol/L NaOH 溶液5 mL，用30%乙醇定容，静置10 min，以未加芸香苷标准溶液的显色试剂乙醇溶液作为空白对照，在510 nm处测定吸光度，绘制曲线。

1.2.3 总黄酮含量的测定

准确吸取2 mL 3种荞麦的样品溶液置于25 mL容量瓶中，按“1.2.2”节所述方法用NaNO2-Al（NO3）3-NaOH比色法操作，在510 nm处测定吸光度，测定黄酮类物质含量，对3种荞麦样品溶液黄酮含量进行比较。平行测定3次，按以下公式计算黄酮含量：

R=C×12.5×0.15.0×100%。（1）

式中：R代表黄酮含量，%；C代表由标准曲线得到的黄酮含量，mg/mL。

1.2.4 对DPPH自由基清除率的测定

准确称取DPPH 20 mg，用无水乙醇溶解，定容于100 mL容量瓶中，配制成 0.2 mg/mL DPPH标准溶液，避光保存。取2 mL DPPH标准溶液，加入无水乙醇，定容于10 mL容量瓶中，配制成0.02 mg/mL DPPH工作液，避光保存。取2 mL DPPH工作液，加2 mL溶剂，在515 nm处测定其吸光度Dd。取2 mL DPPH工作液加2 mL荞麦样品液，在515 nm处测其吸光度Di。取2 mL荞麦样品溶液加2 mL溶剂，在515 nm处测其吸光度Dj。荞麦样品溶液对DPPH自由基的清除率（K）计算公式[5-6]如下：

K=[1-（Di-Dj）/Dd]×100%。（2）

2 结果与分析

2.1 芸香苷标准曲线

以吸光度为纵坐标、芸香苷浓度为横坐标，制作标准曲线图，回归方程为y=11.848x+0.003 5，r2=0.999 1（图1）。

2.2 3种荞麦总黄酮含量

由吸光度根据标准曲线查出3种荞麦样品中黄酮的含量，荞麦样品中总黄酮含量以芸香苷相对量表示（表1至表4）。

2.3 3个荞麦品种对DPPH自由基的清除作用

按照“1.2.4”节中测得的吸光度，Dd（即2 mL DPPH+2 mL溶剂）值为0.490，根据公式，计算DPPH自由基清除率（表5）。

3 结论

本研究对3个荞麦品种的黄酮含量进行了测定，结果表明，北海道黄酮含量（0.652%）略高于美国甜荞（0.626%），北早生黄酮含量最低（0.568%）。DPPH是常用的检测清除自由基活性的方法，3种荞麦提取液对DPPH自由基均有一定的清除能力，北海道清除率最高（54.7%），其次是美国甜荞（52.6%），最低的是北早生（41.6%），表明DPPH自由基清除率和黃酮含量有关。

参考文献：

[1]贾玮玮，刘敦化. 宁夏荞麦开发利用研究进展[J]. 保鲜与加工，2009，9（1）：1-4.

[2]马均伊，赵佰图. 宁夏荞麦品种选育的回顾与思考[J]. 宁夏农林科技，2005（5）：62-64.

[3]张素斌，廖燕婷. 4种甜荞麦黄酮提取方法的比较研究[J]. 食品与机械，2012，28（6）：150-153.

[4]姜忠丽，王俊伟. 苦荞麦中总黄酮提取工艺的研究[J]. 农业机械，2011（20）：166-168.

[5]许 钢. 苦荞麦黄酮提取最佳条件及抗氧化研究[J]. 中国食品学报，2008，8（3）：78-83.

[6]于智峰，付英娟，王 敏，等. 苦荞黄酮提取物体外清除自由基活性的研究[J]. 食品科技，2007，32（3）：126-129.