莜麦秸栽培双孢菇适宜品种及最适菌种培养基筛选

李守勉　李明　田景花　王胜男　冯自洋

摘要：对莜麦秸栽培双孢菇适宜品种进行筛选，得出AS2796为最适品种，并对AS2796的最适母种、原种培养基进行筛选。结果表明，AS2796适宜母种培养基为100 g发酵棉籽皮，50 g牛粪，20 g葡萄糖，20 g琼脂，3 g KH2PO4，15 g MgSO4，20 mg 维生素B1，5 g蛋白胨，1 000 mL水；AS2796适宜原种培养基为配方A1和配方C1，配方A1：84.15%麦粒、14.85%牛粪、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4，配方C1：16.83%谷粒、67.32%高粱粒、14.85%牛粪、1%石膏，另加0.1%KH2PO4、0.05% MgSO4。其中配方A1的菌丝生长速度最快，菌丝长势较好；配方C1的菌丝长势最好，生长速度中等，生产中可以根据实际需要进行选择。

关键词：莜麦秸秆；双孢菇；品种；母种；原种；培养基；筛选

中图分类号： S646.104 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2015）07-0252-02

双孢菇（Agaricus bisporus）味道鲜美、营养丰富，是世界第一大宗食用菌。双孢菇属中低温性草腐菌，发菌温度22～25 ℃，出菇温度14～18 ℃[1]，一般于秋冬至早春栽培，是我国的主栽食用菌种类之一。坝上地区夏季温度较低，适宜进行双孢菇的错季栽培。莜麦为坝上地区的主要粮食作物[2]，利用莜麦秸秆栽培双孢菇，不仅可使坝上资源莜麦秸秆、牛粪变废为宝，同时又可为食用菌生产提供充足的原料。由于莜麦秸秆新开发双孢菇栽培原料的配套技术还不完善，有关莜麦秸秆栽培双孢菇适宜品种筛选的研究未见报道。因此，本试验开展莜麦秸秆栽培双孢菇适宜品种筛选的研究，以促进坝上地区双孢菇产业的健康发展，弥补夏季双孢菇市场的空缺，提高菇农效益。

1 材料与方法

1.1 供试菌株

双孢菇品种W2000、W192、AS2796、5113，均由河北农业大学园艺学院食用菌实验室保藏。

1.2 供试培养基

1.2.1 供试母种培养基

A：马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，磷酸二氢钾3 g，硫酸镁1.5 g，维生素B1 20 mg，蛋白胨 5 g，水1 000 mL，pH值自然；B：麦粒200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，磷酸二氢钾3 g，硫酸镁1.5 g，维生素B1 20 mg，蛋白胨5 g，水1 000 mL，pH值自然；C：谷粒200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，磷酸二氢钾3 g，硫酸镁1.5 g，维生素B1 20 mg，蛋白胨 5 g，水1 000 mL，pH值自然；D：高粱粒20 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，磷酸二氢钾3 g，硫酸镁1.5 g，维生素B1 20 mg，蛋白胨5 g，水1 000 mL，pH值自然；E：玉米粉40 g，葡萄糖 20 g，琼脂20 g，磷酸二氢钾3 g，硫酸镁1.5 g，维生素B1 20 mg，蛋白胨 5 g，水1 000 mL，pH值自然；F：棉籽皮100 g，发酵牛粪50 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，磷酸二氢钾3 g，硫酸镁1.5 g，维生素B1 20 mg，蛋白胨5 g，水1 000 mL，pH值自然。

1.2.2 供试原种培养基[3-4]

CK：99%麦粒、1%石膏，另加0.1%KH2PO4、0.05% MgSO4；A1：84.15%麦粒、14.85%牛粪、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；A2：84.15%小麦粒、14.85%草炭、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；B1：84.15%高粱粒、14.85%牛粪、1%石膏，另加01% KH2PO4、0.05% MgSO4；B2：84.15%高粱粒、14.85%草炭、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；C1：1683%谷粒、67.32%高粱粒、14.85%牛粪、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；C2：16.83%谷粒、67.32%高粱粒、14.85%草炭、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；D1：58.91%玉米芯、25.25%谷粒、14.85%牛粪、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；D2：58.91%玉米芯、2525%谷粒、14.85%草炭、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、005% MgSO4；E1：58.91%玉米芯、25.25%麦粒、14.85%牛粪、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；E2：58.91%玉米芯、25.25%麦粒、14.85%草炭、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4。

1.2.3 莜麦秸栽培双孢菇培养料配方[5]

莜麦秸栽培料的适宜配方（按照100 m2计算）：莜麦秸1 500 kg，干牛粪1 125 kg，尿素15 kg，过磷酸钙50 kg，石膏25 kg，石灰25 kg。

1.3 试验方法

1.3.1 莜麦秸栽培双孢菇最适品种筛选

菌种的制备、培养料的堆置发酵、上料播种以及出菇期的管理等均采用常规方法。选取W2000、W192、闽4号、5113等4个双孢菇品种进行品比试验，每个品种设3个重復，随机区组排列。每个小区10 m2，共12个小区，分别位于床架的2～4层（自下而上）。观察记录各处理发菌时间及菌丝长势，记录前3潮菇的产量、转潮时间及第1潮菇菇峰期，每个小区随机选取30个子实体，并测量单菇质量、菌盖直径、菌盖厚度及菌柄长度。

1.3.2 莜麦秸栽培双孢菇最适品种母种培养基配方筛选试验[6]

按“1.2.1”节中母种培养基配方配制培养基，装入培养皿，每个培养皿内注入30 mL培养基，121 ℃高压灭菌 40 min。待培养基冷却后，将活化后的供试菌株母种接种于直径为9 cm的培养皿进行比较培养。每个处理接种5个培养皿，取直径3 mm、厚0.4 mm的菌丝圆片接于培养皿中央，置于25 ℃恒温培养箱中培养。当有1个处理菌丝长满培养皿时，结束培养，记录菌丝生长时间，测量菌落半径，计算菌丝生长速度，观察菌丝形态及其长势，结果作方差分析，进行显著性测验。

菌丝生长速度（mm/d）=菌落半径（mm）/发菌时间（d）。

1.3.3 莜麦秸栽培双孢菇最适品种原种培养基配方筛选试验[7]

按“1.2.2”节中原种培养基配方配制原种培养基，先将麦粒、谷粒、高粱粒浸泡48 h，玉米芯浸泡24 h，然后用沸水煮至无白心，加入牛粪或者草炭，并拌入石膏和药品。装入40 mm×200 mm的大试管内，高度为试管的3/4，各处理装料高度保持一致，放入高压灭菌锅内灭菌（126～128 ℃，100 min）。每个处理设5个重复，接种后放入25 ℃恒温培养箱内，观察记录菌丝的生长速度并观察菌丝颜色及生长势。

菌丝生长速度（mm/d）=培养料的高度（mm）/发菌时间（d）。

2 结果与分析

2.1 莜麦秸栽培双孢菇最适品种筛选

2.1.1 不同品种菌丝生长情况及产量比较

由表1可见，W192、AS2796的菌丝长势好于W2000、5113；AS2796、5113发菌至出菇所需时间最短，均为83 d，比W2000、W192分别短10 、11 d；从产量来看，W192、AS2796的平均单产显著高于W2000、5113，其中W192产量最高，但W192与AS2796之间差异不显著。

2.1.2 不同品种农艺性状比较

由表2可知，W192的单菇质量显著大于W2000、5113，AS2796的单菇质量与其他3个品种差异均不显著；W192的菌盖直径显著大于W2000、5113，与AS2796差异不显著；从菌盖厚度来看，W192的菌盖厚度显著大于W2000，与AS2796、5113差异不显著；从菌柄直径来看，5113菌柄直径显著大于其他3个品种，AS2796的菌柄直径最小，且显著小于其他3个品种，W2000、W192的菌柄直径大小居中，且二者之间无显著差异；从菌柄长度来看，W192的菌柄长度显著大于AS2796，与W2000、5113差异不明显。AS2796子实体最硬，W192子实体较硬，W2000、5113子实体硬度一般。

总体来看，AS2796平均单产较高，生产周期最短，子实体最硬，子实体菌柄较短，菌盖直径较大，菌盖厚度一般。因此，AS2796为莜麦秸栽培双孢菇的最适品种。

2.2 莜麦秸栽培双孢菇最适品种母种培养基配方筛选试验

由表3可知，双孢菇AS2796在配方A和配方F上的菌丝长速显著快于其他配方，其中配方F最快，配方A菌丝长速较快；其次是配方C菌丝长速较快；配方B、配方D菌丝长速显著慢于其他配方，配方D最慢。配方C、配方F菌丝长势最好，表现为菌丝洁白浓密；配方A、配方E菌丝长势中等；配方B、配方D菌丝长势较差，表现为菌丝灰白稀疏。总体来看，双孢菇AS2796菌丝在配方F的菌丝长速最快且菌丝长势最好。因此，配方F为双孢菇最适母种培养基。

2.3 莜麦秸栽培双孢菇最适品种原种培养基配方筛选试验

对不同原种培养基配方上双孢菇AS2796的菌丝生长情况的分析结果见表4。从菌丝长势来看，在主料中加入牛粪的培养基配方要优于加入草炭的配方。配方C1的菌丝长势最好，菌丝浓密洁白、边缘整齐，配方E2的菌丝长势最弱。从菌丝长速来看，在主料中加入牛粪的培养基菌丝长速显著快于加草炭的培养基。其中，配方A1、配方 A2的菌丝长速最快，且显著快于其他配方，但A1的菌丝长势好于A2。总体来看，配方A1菌丝长速最快，菌丝长势较好；配方C1菌丝长势最好，菌丝长速中等，因此配方A1、配方C1均为较好的双孢菇原种培养基，生产中可以根据实际需要进行选择。

3 结论与讨论

通过莜麦秸栽培双孢菇适宜品种筛选，4个双孢菇品种W192、W2000、AS2796、5113中，W192表现为发菌快、平均单产高（前3潮菇平均单产为7.5 kg/m2）、子实体农艺性状表现好，但生育周期长；AS2796平均单产较高，生产周期短，子实体最硬，子实体农艺性状表现好。AS2796、W192均为莜麦秸秆栽培双孢菇适宜品种，但考虑坝上地区双孢菇以错季栽培、鲜销为主，子实体硬、不易开伞的品种较受欢迎，且商品价格高，而且坝上地区受气候条件影响，双孢菇出菇上市期短，生产周期为筛选品种又一个重要条件。总体来看，AS2796为坝上地区利用莜麦秸秆栽培双孢菇的最适品种。

通过对6种双孢菇母种培养基的筛选，确定适宜母种培养基配方为发酵棉籽皮100 g，牛粪50 g，葡萄糖20 g，琼脂 20 g，KH2PO4 3 g，MgSO4 1.5 g，维生素B1 20 mg，蛋白胨5 g，水1 000 mL。菌丝在该培养基配方上表现为菌丝长速最快，为2.90 mm/d，且菌丝长势最好，表现为气生菌丝多且颜色洁白，菌落边缘整齐。

通过对11个原种培养基的筛选，确定了A1、C1 2个适宜的双孢菇原种培养基配方，A1：84.15%麦粒、14.85%牛粪，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；C1：16.83%谷粒、6732%高粱粒、14.85%牛粪、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4。其中，配方A1的菌丝生长速度最快，为5.37 mm/d，菌丝长势较好；配方C1的菌丝长势最好，生长速度中等，为4.10 mm/d。

参考文献：

[1]杨立诚. 塑料大棚错季双孢菇高产栽培技术[J]. 食用菌，2007，29 （4）：42-43.

[2]曲祥春，何中國，郝文媛，等. 我国燕麦生产现状与发展对策[J]. 杂粮作物，2008，26（3）：233-235.

[3]曲娟娟，黄 芳，周 隆，等. 双孢蘑菇母种培养基筛选研究[J]. 东北农业大学学报，2005，36（5）：576-578.

[4]孔德勇，许修宏，刘永鑫，等. 双孢菇母种培养基的优化[J]. 东北农业大学学报，2008，39（8）：70-73.

[5]曲娟娟，许修宏，张小海，等. 双孢蘑菇原种培养基筛选研究[J]. 东北农业大学学报，2007，38（2）：187-189.

[6]徐彦军，杨 静，杨 方. 双胞蘑菇稻草培养料配方优化及露地栽培试验[J]. 食用菌，2010（6）：30-32

[7]郑林用，刘本洪. 食用菌培养料碳氮比（C/N）的计算方法[J]. 四川农业科技，1997（3）：37.