青海省海南州兴海县地区牛羊布氏杆菌病血清学调查

俄日姐

(青海省海南州兴海县河卡镇兽医站，兴海 813300)

布鲁氏杆菌病(brucellosis)又称为布病或布氏菌病，由布鲁氏杆菌引起的以流产和发热为特征的自然疫源性人畜共患的慢性传染病，是我国二类动物疫病以及OIE规定的B类动物疫病[1]。在自然条件下，家畜对布鲁氏杆菌的易感性存在种属差异，羊、牛、猪易感性较强，其中以羊种危害最为严重。布氏杆菌多呈隐性感染，主要侵害牛羊的生殖系统，以妊娠母畜流产和公畜睾丸炎等为主要特征[2]。带菌动物是人类和其他动物布氏杆菌病的主要传染源。可通过消化道、呼吸道、交配等传播，研究发现吸血类昆虫(如蜱等)也可传播布病[3]。因此，为了解掌握青海省海南州兴海县地区近年来牛羊群的布氏杆菌病的感染水平，切实做好该地区牛羊布病的监测工作，对牛羊畜产品健康发展和人类健康都具有重要意义。

目前，有多种血清学方法用于布氏杆菌病的诊断，常用的检测方法有试管凝集试验(SAT)、虎红平板凝集试验(RPST)和补体结合试验(CFT)、ELISA、胶体金免疫层析法等。其中虎红平板凝集试验爱国际上一直沿用，广泛应用于布病的临床检测；试管凝集和补体结合试验因血清用量大、操作繁杂、检测速度慢等缺点，临床检测方面应用较少；但较RBPT特异，因此可作为布病的进一步确诊[4]。本实验我们选用虎红平板凝集试验和试管凝集试验两种方法，先用虎红平板凝集实验做初步检测，再用试管凝集试验做验证性诊断。

1 材料与方法

1.1 血清样品

2014～2015年采自青海省海南州兴海县地区的血清样品共1746份。其中牛血清232份，羊血清1514份，全部静脉采血并做好标记，摆成斜面，于37℃恒温培养箱静置1h，4℃环境中24h后分离血清，保存待检。

1.2 主要试剂

布鲁氏菌虎红平板凝集试验抗原，标准阴性和阳性血清及试管凝集抗原，标准阴性和阳性血清，稀释液(牛用0.5%的石碳酸生理盐水，羊用0.5%的石碳酸高渗盐水)均购自哈药集团生物疫苗有限公司。

1.3 检测方法

首先，将待测血清样品用布鲁氏菌病虎红平板凝集实验抗原做平板凝集试验初检，然后将可疑血清用布鲁氏菌病试管凝集实验抗原作试管凝集试验复核。平板凝集试验和试管凝集试验具体步骤按照规程[5]进行。

1.4 结果判定

虎红平板凝集试验判定标准：在阴、阳性血清对照成立前提下，如果样品血清出现肉眼可见凝集现象的时间在4min以内，为阳性；出现凝集现象时间过长或不出现凝集现象视为阴性。

平板凝集试验判定标准：在阴、阳性血清对照成立前提下，以参照比浊管C为凝集标准，备检血清1:50及以上滴度出现（++）凝集时，判定为阳性；1:25出现凝集时为可疑，1:25不出现凝集时为阴性。

2 结果

2.1 初检

本次实验中用虎红平板凝集实验法共检测1746份血清样本。受检的232份牛血清，检出1份阳性，阳性率为0.43%，3份可疑血清。受检的1514份羊血清，检出4份阳性，阳性率为0.26%，9份可疑血清。为确定初筛阳性及可疑血清样品，采用试管凝集实验进行验证试验来作进一步的结果判定。

2.2 复检

将所有阳性血清和可疑血清均采用试管凝集实验进行验证试验，阳性和可疑的牛羊血清稀释1：25，1：50，1：100三个滴度，结果在均无凝集现象，未检出阳性血清。

3 讨论

目前尚且没有一种是特别理想的布氏杆菌病的检测方法，虽然虎红平板凝集试验存在假阳性现象，但操作简便，适合大规模流行病学筛查[6]，本实验中笔者结合试管凝集试验做为验证方法，最终结果以试管凝集试验结果为准。通过对海南州兴海县地区的1746份牛羊血清进行布氏杆菌血清抗体的检测，结果显示受检的232份牛血清，检出1份阳性，阳性率为0.43%，3份可疑血清。受检的1514份羊血清，检出4份阳性，阳性率为0.26%，9份可疑血清。但经试管凝集实验进行验证试验未检出阳性血清，表明我国对布氏杆菌病采取的监测净化防控措施，取得了很好的效果。说明我国对布氏杆菌病采取的疫苗接种和检疫、扑杀的防控策略，取得了很好的效果。

但是，目前依然不能松懈，布病防治工作是一项系统工程，必须坚持以预防为主的防控策略，加强对布氏杆菌病的监测，淘汰净化阳性病畜，以防布氏杆菌病再度蔓延。近年来，我国布病大规模暴发流行逐渐减少，小规模、分散、多点的流行较常见，典型病例增多[7]。我们要根据布病新的流行特点，坚持以预防为主，对健康畜群，加强饲养管理，每年定期预防免疫，坚持自繁自养的方针。相关部门应进一步加大布病检疫检测、免疫预防、流通监管、扑杀净化等防控措施实施力度，按计划接种布氏杆菌病疫苗，进一步加大无害化处理、市场流通监管等防控措施的力度，切断传染源及传播途径，积极有效的防控布病的发生和传播。

[1]陈俊，吴敏，施永超，等.布鲁氏菌病的研究进展[J].上海畜牧兽医通讯：2014,(1)：24-25.

[2]王彩茹，王艳梅.羊布鲁氏杆菌病的诊治与防治[J].河南畜牧兽医:2014,35（3）:47.

[3]许存有.乐都县牛羊布氏杆菌病的血清学调查[J].青海畜牧兽医杂志，2013,43(4):21-22.

[4]张瑞.牛羊布氏杆菌病的血清学检测调查[J].新疆畜牧业，2012，(5)：56-58.

[5]国家质量监督检验检疫局.SNI1090—2002布氏杆菌病试管凝集试验操作规程[M].北京，2003.

[6]樊三忠，刘金彪，陈冬毅，等.虎红平板凝集试验与试管凝集试验检测奶牛布鲁茵病的比较[J].中国动物检疫，2009，(9)：43.

[7]任皓，仉明亮，王涛，等.米东区牛羊布氏杆菌病的血清学调查[J].新疆畜牧业，2015，(2)：41-45.