黄秋葵茶叶的成分分析及其水提物的抗氧化活性测定

周兆祥，白石琦，邹烨，冯伟伟，赵婷，王鑫彤，朱昀，张漪静，仰榴青

（江苏大学1.化学化工学院；2.药学院；3.食品与生物工程学院，江苏镇江212013）

黄秋葵茶叶的成分分析及其水提物的抗氧化活性测定

周兆祥1，白石琦2，邹烨3，冯伟伟3，赵婷1，王鑫彤1，朱昀1，张漪静1，仰榴青1

（江苏大学1.化学化工学院；2.药学院；3.食品与生物工程学院，江苏镇江212013）

目的：对黄秋葵茶叶营养成分和活性成分进行分析，并对其水提取物进行抗氧化活性测定。方法：采用国标法和农业行业标准方法分析黄秋葵茶叶的营养成分和活性成分，同时测定其水提物对DPPH自由基、羟自由基的清除作用。结果：黄秋葵茶叶（以干基计）中灰分含量为15.32%，粗蛋白含量为27.58%，粗脂肪含量为2.27%，总糖含量为12.06%；氨基酸分析结果表明，黄秋葵茶叶含有多种人体必需氨基酸；元素分析结果表明，黄秋葵茶叶中含有丰富的钾、钙、镁、铁等元素；活性成分黄酮和多糖的含量分别为1.36%和4.70%。黄秋葵茶叶水提物清除DPPH自由基、羟自由基的半数抑制浓度分别为156.8 mg/L和674.5mg/L。结论：黄秋葵茶叶具有较好的营养价值和抗氧化保健功能，为消费者提供了一种新型的绿色健康饮品。

黄秋葵茶叶；营养成分；黄酮；多糖；抗氧化

1 材料与方法

1.1 材料

黄秋葵采自江苏省镇江市，并经镇江食品药品监督管理局主任中药师陈黎鉴定，采摘成熟黄秋葵果实下方的新鲜叶片，清洗，置阴凉干燥通风处摊晾12 h，切碎，于115℃杀青7min，揉捻，70℃烘12 h，得黄秋葵茶叶成品。

1.2 试剂与仪器

二苯代苦味肼基（DPPH·）为美国Sigma公司产品，其余试剂均为市售分析纯。SHZ-D（Ⅲ）型防腐台式循环水真空泵（上海羌强仪器设备有限公司），YP102N电子天平（上海高致精密仪器有限公司），DT5-1B低速离心机（北京时代北利离心机有限公司）。

1.3 实验方法

1.3.1 黄秋葵茶叶营养成分的检测 水分按照GB5009.3-2010直接干燥法进行测定；灰分测定按照GB5009.4-2010灼烧称重法进行；按照苯酚 硫酸法［7］测定总糖含量；粗蛋白含量按照GB 5009.5-2010凯氏定氮法测定；粗脂肪含量按照GB 14772-2008方法测定；采用电感耦合等离子体原子发射光谱ICP-AES测定各个元素的含量；氨基酸含量按照GB/T5009.124-2003方法测定。

1.3.2 黄秋葵茶叶活性成分测定 采用中华人民共和国农业行业标准NY/T 1295-2007测定总黄酮；采用苯酚-硫酸法［7］测定多糖含量。

1.3.3 黄秋葵茶叶水提取物抗氧化活性测定

1.3.3.1 黄秋葵茶叶提取物的制备 精确称取上述黄秋葵茶叶成品，料液比1：50（g/mL），沸水提取2 h，重复提取2次，合并滤液，浓缩，冷冻干燥，得提取物粉末。

此后，经福建鼎力司法鉴定中心鉴定，林运娘所占用林地面积达6.1亩，造成林木蓄积量损失23.424立方米，且该处林种为水源涵养林（国家生态公益林）。水源涵养林属于防护林，按照法律规定，非法占用并毁坏5亩以上即构成非法占用农用地罪。

1.3.3.2 DPPH自由基清除实验 精确称取DPPH标准品7.9 mg，用无水乙醇溶解并定容于100 mL棕色容量瓶中，配制成浓度为0.2 mmol/L的DPPH-乙醇溶液，4℃冰箱中保存备用。分别量取1.5 mL维生素C（Vc）溶液于试管中，加入1.5 mL的DPPH-乙醇溶液，摇匀，暗处反应30 min，于波长517 nm处测定光密度值（Di），用试样溶剂代替Vc溶液测定空白光密度值（D0），用无水乙醇代替DPPH溶液测定光密度值（Dj），其中Vc为阳性对照，样品测定方法同Vc，按照以下公式进行清除率计算［8］：

1.3.3.3 羟自由基清除实验 精确称取14.87 mg邻二氮菲，用无水乙醇溶解并定容至100 mL的容量瓶中，量取1 mL邻二氮菲无水乙醇溶液，加入2 mL 0.05 mol/L pH7.4的磷酸盐缓冲液和1 mL无水乙醇，充分混合后再加入1 mL 0.75 mmol/L硫酸亚铁溶液，摇匀，然后加入1mL 0.01%过氧化氢溶液，37℃水浴60 min，510 nm处测光密度值（D损）；以Vc溶液代替无水乙醇测得样品的光密度值（D样）；以蒸馏水代替0.01%过氧化氢溶液测得光密度值（D未），其中Vc为阳性对照，样品测定方法同Vc，清除率公式如下［8］：

2 结果

2.1 黄秋葵茶叶营养成分

黄秋葵茶叶各组成成分中，蛋白质含量最高，达27.58%，其次为灰分，占15.32%，总糖含量为12.06%，水分含量为6.55%，粗脂肪为2.27%。

表1为黄秋葵茶叶中氨基酸分析结果。可见黄秋葵茶叶中氨基酸种类丰富，其中赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、苏氨酸、亮氨酸为人体必需氨基酸。黄秋葵茶叶所含各元素中含量最高的是钾元素，为1 143.375 mg/100 g，其他依次为Ca（478.164 mg/100 g），Mg（162.163 mg/100 g），Na（77.371 mg/100 g），Fe（22.757 mg/100 g），Mn（17.502 mg/ 100 g），Se（5.278mg/100 g）以及Zn（4.756mg/100 g）。

表1 黄秋葵茶叶氨基酸分析结果

2.2 活性成分分析

经测定黄秋葵茶叶中黄酮含量为1.36%，多糖为4.70%。

2.3 黄秋葵茶叶水提取物的抗氧化活性

2.3.1 DPPH自由基清除能力 根据检测到的各试样光密度值进行计算，结果见图1，黄秋葵茶叶水提取物清除DPPH自由基的IC50为156.8 mg/L（Vc的IC50为12.0 mg/L）。黄秋葵茶叶水提取物对DPPH自由基清除能力强，当提取物浓度为320 mg/L时，对DPPH自由基的清除率可达82.91%。

图1 黄秋葵茶叶水提物对DPPH自由基清除率

2.3.2 羟基自由基清除能力 黄秋葵茶叶水提物与Vc对羟基自由基的清除作用见图2。清除率随着黄秋葵茶叶水提物与Vc质量浓度的增加而增大。在该体系中黄秋葵茶叶水提物与Vc的IC50分别为674.5 mg/L和34.8 mg/L，当提取物质量浓度为2 000 mg/L时，对羟自由基的清除率可达80.09%。

图2 黄秋葵茶叶水提物对羟基自由基清除能力

3 结论

黄秋葵茶叶富含黄酮、多糖等活性成分和蛋白质、脂肪、氨基酸和微量元素等营养成分，其水提物具有较好的抗氧化能力。由此可见，黄秋葵茶叶具有较好的营养价值和抗氧化保健功能，为消费者提供了一种新型的绿色健康饮品。本文为黄秋葵茶叶的研究与应用提供了实验依据。

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Ingredient analysis and antioxidant activity of water extract of Abelmoschus esculentus tea

ZHOU Zhao-xiang1，BAIShi-qi2，ZOU Ye3，FENGWei-wei3，ZHAO Ting1，WANGXin-tong1，ZHU Yun1，ZHANG Yi-jing1，YANG Liu-qing1
（1.School of Chemistry and Chemical Engineering，2.School of Pharmacy，3.School of Food and Biological Engineering，Jiangsu University，Zhenjiang Jiangsu 212013，China）

Objective：To analyze nutritional ingredient and active ingredient of Abelmoschus esculentus tea，and study on antioxidant activity ofwater extract.M ethods：To analyze nutritional ingredient and active ingredient of Abelmoschus esculentus tea with GB method and agriculture standard method.Scavenging effects ofwater extract on DPPH and OH were determined.Results：The content of ash，crude protein，crude fatand total carbohydratewere 15.32%，27.58%，2.27%and 12.06%of dried sample，respectively.The amino acid analysis results showed that Abelmoschusesculentus tea containedmany kinds of essential amino acid.The trace element analysis results showed that Abelmoschus esculentus tea contained K，Ca，Mg，Fe，et al.The active ingredient flavonoids and polysaccharide were 1.36%and 4.70%，respectively.The IC50of water extract scavenging DPPH and OH were 156.8 mg/L and 674.5 mg/L，respectively.Conclusion：Abelmoschus esculentus tea has good nutritional value and antioxidant effect which can provide a new green health drinks for consumers.

Abelmoschus esculentus tea；nutritional ingredient；flavonoids；polysaccharide；antioxidant activity

R282.71 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1671-7783（2015）03-0260-03

10.13312/j.issn.1671-7783.y130069

周兆祥（1988—），男，硕士研究生；仰榴青（通讯作者），博士，教授，博士生导师，E-mail：yangliuqing@ujs.edu.cn

2013-04-09 ［编辑］ 陈海林