西门子ADVIA2400检测总胆固醇、甘油三酯异常结果原因分析及采取措施

吉增军 徐士荣

西门子ADVIA2400检测总胆固醇、甘油三酯异常结果原因分析及采取措施

吉增军 徐士荣

目的 了解西门子ADVIA2400检测总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）出现异常结果的原因并寻找应对措施。方法 使用ADVIA2400单独进行TC、TG的测定作为对照组，反应杯在检测完无机磷（IP）后紧接着进行TC、TG的测定作为实验1组，反应杯在检测完IP后增加一套清洗程序紧接着再进行TC、TG的测定作为实验2组。将实验1组、实验2组分别与对照组进行比较，观察反应杯之间的交叉污染情况以及反应杯清洗前后对TC、TG测定结果的影响。结果 对照组TC值(4.80±0.059)、TG值(1.63±0.014)，实验1组TC值(2.91±1.15)、TG值（0.96±0.228），实验2组TC值（4.79±0.062）、TG值（1.63±0.015），对照组与实验1组差别具有统计学意义（P＜0.01），对照组与实验2组差异无统计学意义。结论 西门子ADVIA2400全自动生化分析仪存在反应杯交叉污染现象，应采用合适的清洗方法消除污染，以保证检验结果的准确性，为临床提供更加可靠的实验数据。

ADVIA2400；反应杯；交叉污染；无机磷

泰州市第二人民医院于2015年初刚刚投入使用了一套西门子生化免疫流水线，生化部分包括两台ADVIA2400全自动生化分析仪，该仪器具有检测速度快，节省试剂及标本量等优点，但在近几个月使用过程中经常发现有TC、TG等检测项目结果明显偏低的现象，复查后结果正常，每天室内质控均在控。后来在西门子应用工程师的帮助下，本研究发现所有异常结果在检测时使用的反应杯上次检测项目均为IP，于是高度怀疑为IP检测之后造成的反应杯交叉污染，为进一步探寻其原因，本文采用

ADVIA2400生化分析仪进行了相关实验，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 2015年5月26日在本院体检健康者血清标本20份，混匀制备成混合血清标本。采用的仪器为西门子ADVIA2400全自动生化分析仪。试剂包括：（1）IP检测试剂盒（钼蓝比色法）。主要成分：试剂①：硫酸p-甲基氨基酚(10mmol/L)；试剂②：钼酸铵(2.7mmol/L)、硫酸(0.6mmol/ L)。（2）TC检测试剂盒（胆固醇氧化酶法）。（3）TG检测试剂盒（去游离甘油法）均采用日本第一化学试剂及相关配套校准品对仪器进行校准，质量控制使用上海昆涞生物有限公司提供的质控品每天进行室内质控。

1.2 方法 （1）取混合血清标本5mL于试管内，使用ADVIA2400单独测定TC、TG各20次，作为对照组。（2）ADVIA2400共有反应杯340个，为使绝大多数反应杯都在进行IP的检测，选取足量的混合血清标本先在ADVIA2400上连续检测IP340次（样本编号1-340），紧接着再分别做TC(样本编号341-400)和TG（样本编号401-460）的检测，通过仪器查询功能（reaction monitor），逐个调取每次TC和TG检测所用反应杯的情况，若此反应杯上次进行过IP的检测，则保留此结果，所有结果中随机抽取TC、TG各20个数据，作为实验1组。（3）在仪器反应杯交叉污染选项中设定：在检测完IP后，检测TC、TG之前，增加一套清洗程序（碱性pw1），然后重复步骤(2)，得出另一组数据作为实验2组。

1.3 统计学方法 采用SPSS13.0软件进行统计分析，计量资料采用“x±s”表示，采用t检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

单独检测TC、TG（对照组），反应杯先测IP再测TC、TG（实验1组）与先测IP增加一套清洗程序再测TC、TG（实验2组）结果的比较见表1。

表1 不同方式检测TC、TG结果的比较(mmol/L)

3 讨论

全自动生化分析仪为检验科日常工作提供了很大的帮助，在提高检验质量方面做出了巨大的贡献。然而，无论多么精密的仪器设备，总有其不足之处，交叉污染就是生化仪使用过程中的一项永恒的话题，交叉污染包括样品针、试剂针、搅拌棒和反应杯之间的污染。目前研究较多的是试剂之间的交叉污染[1-6]，由于反应杯之间的交叉污染发生更为隐蔽，一些受污染的结果不易及时发现，影响到检验质量，应引起实验室工作人员的足够重视[7]。

在本实验中，反应杯在检测完IP后紧接着进行TC、TG的测定，其中TC结果比单独检测平均低1.89mmol/L，偏差达-39.4%，TG结果比单独检测平均低0.67mmol/L，偏差达-41.1%。IP的检测对TC、TG的测定结果均有明显的负干扰。测完IP后，通过增加一套清洗程序（碱性PW1）再测TC、TG，结果显示，其与对照组比较差异无统计学意义，由此可见，清洗在消除交叉污染方面起了很大的作用。为了进一步探讨引起反应杯发生交叉污染的原因，本研究在日本积水会社技术人员的帮助下，对IP试剂的主要成分进行了具体的分析，并且做了相关的实验，本研究推断：IP试剂①中的硫酸p-甲基氨基酚(10mmol/ L)具有很强的还原性，残留在反应杯中能够竞争性的与Trinder反应中的H2O2发生反应，使生成的红色醌亚胺化合物减少，结果呈明显的负干扰。这与我们平时工作中遇到的实际情况相一致，除TC、TG之外，尿酸(UA)、肌酐（Cr）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的检测原理也是Trinder反应，平时也经常会出现检测结果异常偏低复查后又正常的现象。于是本研究在这几项的检测过程中都增加了这套碱性清洗程序。现在生化结果出现异常偏低的现象明显减少、甚至消失，大大降低了标本复查率，减轻了生化室工作人员的压力。

西门子ADVIA2400自带一套不断更新的软件系统，针对其配套试剂在防止交叉污染方面做了很多设置：在生化仪上配备有碱性PW1探针清洗液，酸性PW2及含有次氯酸钠的PW3探针清洗液及探针冲洗程序[8]，通过选择适当的清洗液对样品针、试剂针、搅拌棒和反应杯进行清洗，能够有效减少可能发生的交叉污染。但本室一直使用的是开放试剂，这就要求我们要详细了解每个项目的检测原理及试剂组成，合理安排检测顺序，合理利用分析仪清洗程序，遇到异常结果及时查找原因，同时做好仪器的日常维护保养，只有这样才能尽量避免发生交叉污染，保证检测结果的准确性和可靠性。

[1] 于雷.生化自动分析仪项目间试剂的交叉污染及其避免方法[J].临床检验杂志，2003,21（3）：168.

[2] 黄倩婷,贾璋林,吕伟标,等.23种常用生化试剂交叉污染情况调查[J].检验医学与临床，2009,6（19）：1612-1613.

[3] 滕义建.试剂交叉污染对胆汁酸测定结果的影响[J].检验医学与临床,2013，10(4)：510-511.

[4] 汪亮.生化分析仪试剂间交叉污染对总胆汁酸测定的影响研究[J].国际检验医学杂志,2014,35（8）：1069-1070.

[5] 陈燕，黄泽玉，许喆，等.生化分析仪交叉污染发现和消除方法探索[J].标记免疫分析与临床,2015,22（3）：215-217.

[6] 王聪，赵凤梅，王慧慧.全自动生化分析仪测定血清磷后对血清肌酐检测的交叉污染[J].中国误诊学杂志,2011,11（32）：7874.

[7] 陈强.全自动生化分析仪试剂交叉污染及清洗实验操作方法的探讨[J].临床和实验医学杂志，2009,8(7)：61.

[8] 陈彬,邓小军,许永志.西门子ADVIA2400生化分析仪性能评价[J].检验医学与临床，2012,9（21）：2741.

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.35.101

江苏 225599 泰州市第二人民医院检验科（吉增军 徐士荣）