气相-内标法测定白兰地中甲醇、乙酸乙酯、糠醛和高级醇

莫燕霞，殷居易，顾晓俊，陈梅珍，何卫敏，吴维儿（宁波出入境检验检疫局，浙江宁波315800）

气相-内标法测定白兰地中甲醇、乙酸乙酯、糠醛和高级醇

莫燕霞，殷居易，顾晓俊，陈梅珍，何卫敏，吴维儿
（宁波出入境检验检疫局，浙江宁波315800）

摘要：建立了气相-内标标准曲线法同时测定白兰地中甲醇、乙酸乙酯、糠醛、高级醇（正丙醇+异戊醇+异丁醇+正丁醇+仲丁醇）含量的方法，样品添加内标后直接进样，经CP-Wax 57毛细管色谱柱分离后用FID检测器进行分析。在所建立的最佳试验条件下，白兰地中各组分峰得到有效分离，标准曲线相关系数均在0.999 60以上，回收率在94.9%～117.7%之间。该方法灵敏、易操作、准确可靠，能够对白兰地中甲醇、乙酸乙酯、糠醛、高级醇进行准确的定性定量分析。

关键词：气相-内标标准曲线法；甲醇；乙酸乙酯；糠醛；高级醇；白兰地

白兰地是以葡萄为原料，经发酵、蒸馏、橡木桶陈酿、调配而成的蒸馏酒。除了水和乙醇外，还含有酸类、酯类、醛类、醇类等多种风味化合物。白兰地在其蒸酒过程中极易产生多余甲醇，甲醇是一种无色、有酒精气味、易挥发的液体，超量对人体具有较强毒性作用，主要表现在损伤视力，严重者双目失明，甚至致人死亡。我国对白兰地中甲醇有着严格要求：GB2757-2012《食品安全国家标准蒸馏酒及其配制酒》[1]规定甲醇≤2.0 g/L，因此对白兰地中甲醇的准确测定和质量控制显得至关重要。酯类、醛类、糠醛和高级醇等在白兰地

目前白兰地（蒸馏酒）中甲醇的检测方法主要采用GB/T 5009.48-2003《蒸馏酒和配制酒卫生标准分析方法》[2]规定的外标法，分析结果的准确度和精密度与进样量有密切关系，进样技术的好坏直接影响测定结果的准确性。GB/T 11856-2008《白兰地》[3]规定白兰地酯类（以乙酸乙酯计）用滴定法测定，操作复杂且滴定终点不易判断；测定糠醛和高级醇时使用不同的内标物，需要单独分析，费时费力；且采用单点测试，增加了试验误差。本研究以甲基异丁基甲醇作为内标，采用内标标准曲线法，毛细管柱-氢焰离子化检测器同时测定白兰地中甲醇、乙酸乙酯、糠醛、高级醇（正丙醇+异戊醇+异丁醇+正丁醇+仲丁醇）含量，与外标法和滴定法等方法比较，具有快速高效、准确度高、重现性好、不受进样误差影响等优点。

1　材料与方法

1.1仪器

7890气相色谱仪配置氢焰离子化检测器、色谱柱，Agilent CP-Wax 57（50m×250μm，0.2μm）：美国安捷伦；梅特勒-托利多XS204（分度值0.1mg）电子天平：瑞士Mettler。

1.2试剂

甲醇、乙酸乙酯、糠醛、正丙醇、异戊醇、异丁醇、正丁醇、仲丁醇、甲基异丁基甲醇（内标）；无水乙醇：色谱纯；水：超纯水。

进样口温度：220℃，检测器（FID）温度：300℃，氢气流量：60mL/min；空气流量：400mL/min；尾吹氮气流量：25mL/min；柱温：起始温度40℃，保持2min，以6℃/min上升到180℃，保持2min后运行：200℃保持3min。

1.4方法

1.4.1标准溶液配制

各组分标准储备液：吸取甲醇、乙酸乙酯、糠醛、正丙醇、异戊醇、异丁醇、正丁醇、仲丁醇色谱纯各200μL，分别置于10mL容量瓶中，用电子天平准确称量，用40%（体积分数）乙醇溶液定容，计算质量浓度，得到各个组分的单一标准品储备液，于冰箱保存。

内标溶液：吸取甲基异丁基甲醇内标液200μL，置于10m L容量瓶中，用电子天平准确称量，用40%（体积分数）乙醇溶液定容，计算其质量浓度，于冰箱保存。

1.5标准曲线的建立

依次准确吸取各组分标准储备液0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、2.0m L于100m L容量瓶中，用40%（体积分数）乙醇溶液定容，计算各组分质量浓度，得到6个不同浓度的混合标准使用溶液。

在一定范围内，反应温度越低，钴的析出超电压就越大，反应就越困难，且镉的复溶机率就越小。控制除铜镉温度为55～60 ℃，降低镉复溶机率，减少钴损失。

准确吸取上述混合标准使用溶液各10 mL于25mL比色管中，依次加入0.1mL甲基异丁基甲醇内标溶液，摇匀。取该系列标准溶液，根据1.3项所述色谱条件，平行测定3次，每次进样1μL，以各组分与内标浓度比为横坐标，各组分与内标峰面积比为纵坐标绘制各组分标准曲线，建立校正表，在气相色谱化学工作站里自动完成上述分析过程。

1.6样品的测定

准确吸取样品10mL于25mL比色管中，加入0.1mL甲基异丁基甲醇内标溶液，摇匀。根据1.3项所述色谱条件，进样1μL，测得样品色谱图，由气相色谱化学工作站自动进行分析。

2　结果与讨论

2.1色谱分离情况

按1.3方法进行试验，得到标准溶液和白兰地样品的色谱图，如图1所示。

图1　各组分的色谱图（a.标样；b.白兰地）Fig.1　Chrom atogram of components

2.2标准曲线和线性范围

根据1.3操作条件，将标准系列溶液依次进样，分别得到8种组分的线性范围、回归方程及相关系数，结果见表1。

2.3方法重复性

准确吸取1.4项下所配置的混合各组分标准储备液一定体积于100mL容量瓶中，用40%（体积分数）乙醇溶液定容，计算组分质量浓度，得到单一浓度的混合标准使用溶液，吸取上述溶液10m L于25m L比色管中，加入0.1mL内标溶液，摇匀。同时准确吸取样品10mL和适量标准溶液于25mL比色管中，加入0.1mL内标溶液，摇匀，配制成供试品溶液。取上述两份溶液，在本试验所选用的色谱条件下连续进样6次，每次进样1μL，进行测定，结果见表2。标准品中各组分峰面积的RSD均小于3.0%，样品中各组分峰面积的RSD均小于4.0%，说明方法的精密度良好，满足测定要求。

表1　标准曲线回归方程、相关系数及检出限Table1　Regression equation of standard curve，correlation coefficientand detection lim it

表2　精密度试验（n=6）Table2　Precision experiment（n=6）

2.4加标回收率

配制低、中、高3个水平浓度的8种组分加标样品溶液，每个水平浓度进行6次平行测定，考察方法的回收率和精密度，结果见表3。

表3　样品加标回收试验（n=6）Table3　Recovery experiment（n=6）

从表3结果中可以看出：各组分回收率在94.9%～117.7%之间，该方法的准确度较高。

2.5稳定性试验

试验中考察了白兰地供试品溶液在8 h之内的稳定性，根据本试验中所选用的色谱条件，每隔1 h进样1μL，测得7种组分峰面积的RSD均小于6.0%。

3　方法应用

应用本文建立的方法，共检测白兰地样品6份，每份检测4批。具体结果如表4所示。

表4　白兰地中各组分含量Table 4　Contentsof the com poundsin brandy

4　结论

本文建立的方法简便、快速、灵敏、准确，对白兰地中甲醇、乙酸乙酯、糠醛、高级醇（正丙醇+异戊醇+异丁醇+正丁醇+仲丁醇）含量能有效地进行同时测定，并且各组分的分离良好，回收率及重现性均符合测定要求，此方法对于白兰地中甲醇、乙酸乙酯、糠醛、高级醇含量的检测有很好的适用性。

参考文献：

[1]中华人民共和国卫生部.GB2757-2012食品安全国家标准蒸馏酒及其配制酒[S].北京:中国标准出版社,2012

[2]中华人民共和国卫生部.GB/T 5009.48-2003蒸馏酒和配制酒卫生标准分析方法[S].北京:中国标准出版社,2003

[3]中华人民共和国卫生部国家质量监督检验检疫总局.GB/T 11856-2008白兰地[S].北京:中国标准出版社,2008

DO I：10.3969/j.issn.1005-6521.2015.21.038

基金项目：宁波市级科技计划项目（2012F1002）

作者简介：莫燕霞（1981—），女（汉），工程师，硕士研究生，研究方向：食品检测分析。理化检测中是非常重要的指标，与白兰地品质有着直接的联系。白兰地在贮存陈酿过程中萃取橡木桶中的香气成分（酯类、醛类等），使得各种成分相互协调融合，形成白兰地的特征香气。

收稿日期：2014-08-21

Development of A GC Internal Standard Method for Sim ultaneous Determ ination of Methyl Alcohol，Ethyl Acetate，Fur fural and Higher Alcohols in Brandy

MO Yan-xia，YIN Ju-yi，GU Xiao-jun，CHENMei-zhen，HEWei-min，WUWei-er
（Ningbo Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau，Ningbo315800，Zhejiang，China）

Abstract：A method was developed for the determination of themethyl alcohol，ethyl acetate，furfural and higher alcohols（propanol+isoamyl alcohol+isobutanol+n-butanol+tert-butyl alcohol）in brandy using GC internal standard method.The sampleswere directly injected into gas chromatography with internal standard，and separated by CP-Wax 57 capillary column and then detected by FID detector.Under these optimal experimental conditions，the calibration curve for the compounds was in good linearity with a correlation coefficientofupwards0.999 60.Recovery ratio of the compoundswas94.9%-117.7%.The results indicate that thismethod is handy，fast，veracious and practical for the routine analysis ofmethyl alcohol，ethyl acetate，furfuraland higheralcohols in brandy.

Keywords：GCinternalstandardcurvemethod；methylalcohol；ethylacetate；furfural；higheralcohols；brandy