HIF-1α、Survivin在非小细胞肺癌中的表达

聂　弘，高从荣，赵　敏，王　瑾，邹　强，万　军

HIF-1α、Survivin在非小细胞肺癌中的表达

聂弘1，高从荣1，赵敏2，王瑾2，邹强2，万军3

摘要目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、凋亡相关蛋白Survivin在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其与临床病理特征的关系，以及两种蛋白的相关性。方法采用免疫组化法检测52例NSCLC组织及20例癌旁组织中HIF-1α和Survivin的表达。结果NSCLC组织中Survivin、HIF-1α的阳性表达率分别为69%（36／52）和59%（31／52）均高于癌旁组织。HIF-1α、Survivin的表达与肿瘤临床分期及淋巴结转移病理分级相关（P＜0．05）。HIF-1α的表达与Survivin表达（r＝0．406，P＜0．05）呈正相关。结论在非小细胞肺癌癌组织中HIF-1α、生存素表达明显高于癌旁组织；HIF-1α和Survivin在肿瘤发生、发展过程中存在相互作用并与非小细胞肺癌发展及预后密切相关。

关键词缺氧诱导因子-1α；生存素；非小细胞肺癌

2015-08-01接收

非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）是肺癌最常见类型，约占肺癌的80%，其5年生存率仅15%左右［1］，国内有研究者报道缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α）、Survivin在多种恶性肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移过程中起着重要作用，并且HIF-1α和Survivin的过表达与多种恶性肿瘤的生物学行为密切相关［2-3］。该研究采用免疫组化法检测52例NSCLC组织及20例癌旁正常组织中HIF-1α和Survivin的表达情况，探讨两者与NSCLC临床病理特征的关系，并对HIF-1α与Survivin之间有无相关性进行分析，探讨两者与NSCLC发生发展及预后的关系，以期为NSCLC治疗提供依据。

1　材料与方法

1．1病例资料选取2012年11月～2015年4月安徽省合肥市第二人民医院胸心外科收治确诊为NSCLC的52例术后石蜡包埋标本，其中男30例，女22例；年龄44～76（54．8±10．9）岁。其中鳞癌34例，腺癌18例，按2009年（UICC）肺癌的TNM分期标准进行临床分期：Ⅰ期患者8例，Ⅱ期患者23例，Ⅲ期患者21例；52例患者中伴有淋巴结转移36例，无淋巴结转移患者16例。术前均未接受过化疗、放疗或免疫治疗，所有病例均有完整的临床资料及随访资料。对照组取20例手术癌旁5 cm以外肺组织。

1．2免疫组化法检测步骤采取SP两步法，按照试剂盒说明书严格执行。兔抗人Survivin多克隆抗体及兔抗人HIF-1α多克隆抗体、DBA试剂盒均由安科生物技术公司提供。应用德国病理图像分析仪进行观察和显微照相。Survivin的阳性产物主要表达于细胞质，少数在细胞核表达。HIF-1α阳性细胞全部为细胞质染色，根据阳性肿瘤细胞占肿瘤细胞总数的比例分为：Survivin阳性细胞数＜10%为阴性 （-），10%～25%为弱阳性 （＋），26%～50%为中度阳性（＋＋），＞50%为强阳性（＋＋＋），（＋～＋＋＋）均视为阳性表达。HIF-1α阳性细胞数＜1%为阴性（-），1%～10%为弱阳性（＋），11%～50%为中度阳性（＋＋），＞50%为强阳性（＋＋＋）。所有结果判断均有两名病理科医师采取盲法分别判断。

1．3统计学处理应用 SPSS 16．0统计软件进行分析，计量资料采用X2检验，其中两组样本间率的比较采用四格表资料的检验；多组样本间率的比较采用行×列表资料检验。

2　结果

2.1Survivin及H IF-1α在NSCLC中的表达情况免疫组化染色显示Survivin、HIF-1α均表达于NSCLC组织的细胞质中，阳性表达率均为69．0% （36／52）。

2.2H IF-1α、Survivin在NSCLC与癌旁正常肺组织中表达的比较Survivin、HIF-1α总阳性表达率分别为69．0%（36／52）、59．6%（31／52），二者表达率在NSCLC与癌旁正常肺组织间差异有统计学意义（P＜0．05）。见表1。

表1　Survivin、HIF-1α在NSCLC、癌旁正常肺组织中的表达（n）

2.3H IF-1α、Survivin表达水平与NSCLC患者临床病理特征的关系HIF-1α表达阳性率与组织的淋巴结转移（P＜0．05）、分化程度（P＜0．01）及TNM分期有关（P＜0．05）。NSCLC组织中Survivin表达阳性率与患者的性别、年龄无关（P＞0．05），而与癌组织的淋巴结转移（P＜0．01）、分化程度（P＜0．05）及TNM分期有关（P＜0．01）。见表2。

表2　Survivin、HIF-1α的表达与临床病理特征的关系

2.4H IF-1α与Survivin蛋白表达的相关性在36例Survivin蛋白表达阳性的患者中，26例HIF-1α蛋白表达呈阳性，22例HIF-1α蛋白表达阴性的患者中，Survivin蛋白表达呈阴性是12例。HIF-1α与Survivin在 NSCLC中的表达呈正相关（r＝0．406，P ＝0．030）。

3　讨论

Survivin是哺乳类凋亡抑制蛋白的重要成员，广泛表达于人类各种肿瘤组织中．具有促使细胞转化，调节细胞有丝分裂和抑制细胞凋亡等作用。Survivin蛋白是一种位于细胞核与细胞质之间的穿梭蛋白，Survivin过表达可能促进肿瘤细胞逃避生长监控，抑制了肿瘤细胞凋亡，使异常细胞的生存增殖能力增强，导致肿瘤浸润和转移，更易发生淋巴结转移，对恶性肿瘤的发生、发展起重要作用［4］。大量研究［2-3］显示，Survivin在食管癌、乳腺癌及肝癌的表达情况与患者的年龄、性别、肿瘤位置等情况无关。而与临床分期、肿瘤分级关系密切。Survivin能否作为肺癌患者预后的参考指标，Yang et al［5］认为Survivin在鳞癌中表达最高，其表达与淋巴结转移、肿瘤分化程度、TNM分期及预后相关，并在肿瘤发生发展过程中起重要的促进作用［5-6］。邹亚峰等［7］的免疫组化研究结果显示：Survivin在I期和Ⅱ期的NSCLC患者的表达水平明显低于Ⅲ期患者。本研究也表明，在NSCLC组织中，Survivin与组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移关系密切，提示Survivin在NSCLC的发生发展过程中，特别是在NSCLC侵袭转移过程中起着非常重要的作用。

NSCLC的发生发展过程中有许多转录调控因子的参与，HIF-1是近年发现的一种是由HIF-1α、HIF-1β组成的异源二聚体转录因子，其中HIF-1α决定HIF-1活性，在低氧环境中HIF-1发挥转录和基因调控作用，HIF-1α的下游基因有40多种［8］，其中转化生长因子-β（TGF-β）、血管内皮生长因子（VEGF）等对肿瘤的生长发展起促进作用，目前，已在多种恶性肿瘤组织及坏死的肿瘤组织中甚至癌前病变中检测到HIF-1α蛋白的过度表达，而相应良性病变中及正常的肺组织中HIF-1α表达很低，冯跃庆等［9］研究显示，在乳腺癌中，肿瘤TNM分期越晚，恶性度越高及发生淋巴结转移者HIF-1α表达越高，HIF-1α表达率与患者生存率相关。冯春来等［10］发现肺肿瘤组织及坏死的肿瘤组织中HIF-1α过度表达，而正常的肺组织中HIF-1α表达很低，推测HIF-1α表达与淋巴结转移及临床分期有密切关系。本研究也得出相同结论，推测HIF-1α可能是肺癌进展和转移的一个重要因素。

有研究［11-12］显示在缺氧环境中Survivin表达增加，在乳腺癌、结直肠癌中的HIF-1α和 Survivin表达呈正相关，可能HIF-1α直接诱导或间接影响Survivin，增强抑制细胞凋亡，沈圆兵等［13］研究发现HIF-1α基因沉默可以使下游靶基因Survivin的表达下调，抑制肺腺癌的生长。进一步研究［14-15］显示HIF-1α对胰岛素样生长因子和Notch-1受体诱导的Survivin的表达有协调作用，上述实验都表明HIF-1α在Survivin的表达调控中起着重要的作用。本研究结果也表明，在NSCLC中，HIF-1α和Survivin的表达呈显著正相关，提示两者在NSCLC的发生及发展中有协同作用。

参考文献

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The expression of H IF-1αand Survivin in hum an non-small cell lung cancer

Nie Hong1，Gao Congrong1，Zhao Min2，et al
（1Dept of Cardiothoracic Surgery，2Dept of Pathology，The Affiliated Hefei Hospital of AnhuiMedical University The Second People′s Hospital of Hefei），Hefei230011）

AbstractObjectiveTo study the expression of hypoxia-inducible factor-1α（HIF-1α）and Survivin in human non-small cell lung cancer（NSCLC），and the relationship between such expression and clinicopathological features of NSCLC．Methods52 cases of tissue specimen including NSCLC，neighboring noncancerous tissue were collected．These specimenswere detected by immunohistochemicalmethods．Resu ltsThe expression of HIF-1αand Survivin showed significant difference（P＜0．01）between NSCLC tissues and neighboring noncancerous tissues．The positive rates of expression of HIF-1α，Survivin were correlated with the tumor differentiation degree，lymphnode metastasis and tumor stage（P＜0．05），and significantand positive correlation was observed between the positiverate of expression of Survivin and HIF-1α（P＜0．05）．ConclusionThe overexpression of HIF-1αand Survivin is found in NSCLC．Survivin and HIF-1αmay play a synergistic role in the genesis and progression of themalignancy，and theremay be a certain synergy between Survivin in the process of tumor occurrence and development．

Key wordsHIF-1α；Survivin；non-small cell lung cancer

中图分类号R 655．3

文献标志码A

文章编号1000-1492（2015）11-1674-03

基金项目：安徽省自然科学基金（编号：1208085QH159）

作者单位：安徽医科大学附属合肥医院（合肥市第二人民医院）1胸心外科、2病理科，合肥2300113安徽医科大学第一附属医院胸外科，合肥230022

作者简介：聂弘，男，副主任医师，责任作者，E-mail：hfzyywknh＠126．com