HER-2、BRCA1和BRCA2联合检测在新疆维、汉族妇女乳腺癌诊断中的应用

董 朝， 刘春生， 马斌林

(新疆医科大学附属肿瘤医院乳腺头颈外科，新疆 乌鲁木齐 830011)



·临床研究·

HER-2、BRCA1和BRCA2联合检测在新疆维、汉族妇女乳腺癌诊断中的应用

董 朝， 刘春生， 马斌林

(新疆医科大学附属肿瘤医院乳腺头颈外科，新疆 乌鲁木齐 830011)

目的 研究HER-2、BRCA1和BRCA2联合检测在新疆维吾尔族、汉族妇女乳腺癌早期诊断中的应用。方法 通过组织芯片技术及免疫组织化学方法检测68例新疆维吾尔族散发性乳腺癌患者(观察组)、68例汉族散发性乳腺癌患者(对照组)乳腺癌组织中HER-2、BRCA1及BRCA2的表达。比较分析两者表达特点及与临床病理参数间的关系。结果 观察组中HER-2的表达阳性率为41.18%(28/68)，BRCA1表达阳性率为63.24%(43/68)，BRCA2的表达阳性率为57.35%(39/68)，均显著高于对照组的22.06%(15/68)，23.53%(16/68)，26.50%(18/68)，差异均有统计学意义(均P<0.05)。观察组中乳腺癌组织中HER-2、BRCA1及BRCA2的表达不具有相关性；对照组中，若HER-2阴性表达时，BRCA1与BRCA2的表达具有相关性(r=0.344，P=0.002)；若HER-2阳性表达时，BRCA1与BRCA2的表达不具有相关性(r=0.156,P=0.488)。新疆维吾尔族妇女BRCA1、HER-2表达与年龄、腋淋巴结转移情况、临床分期有相关性(P<0.05)，HER-2、BRCA2表达与肿瘤大小有相关性(P<0.05)。结论 新疆维吾尔族与汉族妇女散发性乳腺癌组织中HER-2、BRCA1及BRCA2的表达均存在差异。

新疆维吾尔族； 散发性乳腺肿瘤； HER-2； BRCA1； BRCA2

散发性乳腺癌，即是无法找到完整的癌变点的乳腺癌症[1]。女性的乳腺结构，是由皮肤、纤维组织、乳腺腺体和脂肪构成，而乳腺癌则是发生在乳腺腺上皮组织中的恶性肿瘤。近年来，通过考察与研究发现，由于地域，饮食，以及气候等多方面的原因，新疆维吾尔族地区女性患散发性乳腺癌的几率要远远超出汉族妇女[2-3]。本研究分析新疆维吾尔族妇女与汉族妇女乳腺癌组织中HER-2、BRCA1及BRCA2的表达差异，探讨新疆维吾尔族妇女与汉族妇女散发性乳腺癌患病情况。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2010年4月至2013年4月于新疆医科大学附属肿瘤医院确诊的68例新疆维吾尔族散发性乳腺癌女性患者为观察组，年龄27～68岁，平均年龄(45.6±2.8)岁，肿瘤病灶平均直径小于2.0cm。随机选择在我院进行治疗的汉族散发性乳腺癌患者68例作为对照组。对照组年龄分布25～72岁，平均年龄(48.3±3.2)岁，肿瘤病灶平均直径小于1.8cm。两组在年龄及肿瘤病灶平均直径等方面差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法[4]

所有标本均使用4%的甲醛固定，并用石蜡包埋，切片厚度3～5μm，之后采用免疫组织化学SP法进行检测，在55～60℃温箱中过夜，用PBS(pH=7.4)冲洗3次，每次5min，进行脱蜡。此后每张切片加50μl过氧化酶阻断溶液，以阻断内源性过氧化物的活性。再使用DAB显色试剂盒(AR1022)进行DAB显色，取1ml蒸馏水，加设计盒中A,B,C试剂各1滴，混匀后加至切片。室温显色，镜下控制反应时间，一般为5～30min。最后用蒸馏水进行洗涤，再用苏木素轻度复染2min，脱水，透明，封片，之后即可进行显微镜观察。并通过已知的切片作为对照，进行比对。并将结果进行记录，便于下一步比较。

1.3 阳性判断标准[5]

判断标准为在每一个切片中随机选取十个高倍镜视野，进行细致观察。视野内BRCA1和BRCA2的检测是以细胞核以及细胞浆内出现棕色颗粒而且细胞数均大于10%为阳性表达。HER-2的检测是以其细胞膜或细胞浆内出现棕黄色颗粒且细胞数大于25%为阳性表达。

1.4 统计学处理

以SPSS 13.0软件分析，数据比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组阳性表达率的比较分析

观察组中HER-2的表达阳性率为41.18%(28/68)，BRCA1表达阳性率为63.24%(43/68)，BRCA2的表达阳性率为57.35%(39/68)，均显著高于对照组的22.06%(15/68)，23.53%(16/68)，26.50%(18/68)，差异均有统计学意义(均P<0.05)，见表1。

表1 两组阳性表达率的比较

2.2 两组蛋白表达相关分析

观察组内乳腺癌组织中HER-2、BRCA1、BRCA2表达无明显差异。对照组乳腺癌组织中，若HER-2阴性表达时，BRCA1与BRCA2的表达具有相关性(r=0.344，P=0.002)；若HER-2阳性表达时，BRCA1与BRCA2的表达不具有相关性(r=0.156,P=0.488)，见表2。

表2 对照组中蛋白表达相关分析

2.3 新疆维吾尔族妇女HER-2、BRCA1、BRCA2的表达与临床病理因素间的关系

观察组中，BRCA1、HER-2表达与患者年龄、腋淋巴结转移情况、临床分期有相关性(P<0.05)。HER-2、BRCA2表达与肿瘤大小有相关性(P<0.05)，见表3。

表3 新疆维吾尔族妇女HER-2、BRCA1及BRCA2的表达与临床病理各因素间的关系

3 讨 论

乳腺疾病是困扰大多数女性的疾病之一。近年来，乳腺癌发病率逐步升高，而乳腺癌中有90%～95%的情况为散发性乳腺癌[6]。乳腺癌的发病机制尚未完全清楚，引起乳腺癌的主要原因有： (1) 月经初潮早,绝经迟；(2) 未婚，未育，晚育，未哺乳；(3) 患乳腺良性疾病未及时诊治；(4) 经医院活检证实患有乳腺非典型增生[7]；(5) 胸部接受过高剂量放射线的照射；(6) 长期服用外源性雌激素；(7) 绝经后肥胖；长期过量饮酒；(8) 携带与乳腺癌相关的突变基因等原因有关[8]。对于散发性乳腺癌而言，地域、气候等因素的影响要更加明显，新疆维吾尔族妇女患散发性乳腺癌的几率就要远远超过汉族妇女。研究[5，9]发现，HER-2、BRCA1及BRCA2的表达是新疆维吾尔族妇女患散发性乳腺癌高发的重要因素。

本研究通过对比新疆维吾尔族患散发性乳腺癌患者与汉族患者的乳腺癌组织，观察HER-2、BRCA1及BRCA2的表达情况，发现新疆维吾尔族妇女乳腺癌组织中HER-2的表达阳性率为41.18%，BRCA1表达阳性率为63.24%，BRCA2的表达阳性率为57.35%，均显著高于汉族妇女。这与黄崇植等[10]的研究结果一致，说明HER-2、BRCA1及BRCA2的表达的确存在地域性的差异。此外，通过显微镜观察及对比蛋白质表达分析记录，发现新疆维吾尔族妇女散发性乳腺癌组织中HER-2、BRCA1、BRCA2的表达不具有相关性，但是汉族妇女乳腺癌组织中HER-2、BRCA1、BRCA2的表达则有显著的相关性，这与孟荣荣等[11]的研究结果一致,表明蛋白质的表达对于不同人群有着不同的效果。进一步分析显示，新疆维吾尔族妇女乳腺癌组织中BRCA1、BRCA2及HER-2的表达与年龄、是否绝经、腋淋巴结转移等多项临床病理因素都相关，这与王宁等[12]的研究结果一致，说明了年龄等也是观测其表达的重要指标。研究[13]表明，新疆维吾尔族妇女与汉族妇女出现的表达差异可能是因为人种、遗传背景以及文化风俗饮食习惯的不同所带来的。研究[5，14]表明，BRCA1、BRCA2的缺失在新疆维吾尔族妇女散发性乳腺癌的诊断中起着决定性作用，这说明研究HER-2、BRCA1、BRCA1的必要性将进一步提高。

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Expression of HER-2, BRCA1 and BRCA2 in Han and Uygur patients with sporadic breast cancer in Xinjiang

DONGChao,LIUChun-sheng,MABin-lin

(Dept. of Head and Neck Surgery, Cancer Hospital, Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, Xinjiang Urgur Autonomous Region, China)

Objective To investigate the expression of HER-2, BRCA1 and BRCA2 in Han and Uygur patients with breast cancer in Xinjiang. Methods Expression of HER-2, BRCA1 and BRCA2 was detected by tissue microarray technique and immunohistochemical method in 68 Uygur patients and 68 Han patients with sporadic breast cancer from April 2010 to April 2013. The correlation of HER-2, BRCA1 and BRCA2 expression with clinicopathological parameters of disease was analyzed. Results The positive expression rates of HER-2, BRCA1 and BRCA2 in Uygur group were 41.18%(28/68), 63.24%(43/68) and 57.35%(39/68), respectively, which were significantly higher than those in Han group(22.06%, 5/68; 23.53%, 6/68 and 26.50%,18/68, allP<0.05). The expression of HER-2, BRCA1 and BRCA2 was not correlated with each other in Uygur group. In Han group when HER-2 was positively expressed, the expression of BRCA1 was significantly correlated with BRCA2(r=0.344,P=0.002), but the correlation was not found when HER-2 was negative(r=0.156,P=0.488). In Uygur group the expression of HER-2 and BRCA1 was correlated with age, axillary lymph node metastasis and clinical stages(P<0.05), the expression of HER-2 and BRCA2 was correlated with tumor size(P<0.05). Conclusion The expressions of HER-2, BRCA1 and BRCA2 are different between Uygur and Han patients with breast cancer in Xinjiang.

Xinjiang Uygur; sporadic breast cancer; HER-2; BRCA1; BRCA2

10.16118/j.1008-0392.2015.01.019

2014-06-06

董 朝(1977—)，男，副主任医师，硕士.E-mail： 626195834@qq.com

马斌林.E-mail： doveydc@21cn.com

R 737.9

A

1008-0392(2015)01-0087-04