辛夷芳香性双四氢呋喃成分研究

李 竣，梅枝意，罗会畏，黄先菊，杨光忠

(中南民族大学 药学院，武汉 430074)

辛夷芳香性双四氢呋喃成分研究

李 竣，梅枝意，罗会畏，黄先菊，杨光忠

(中南民族大学 药学院，武汉 430074)

为阐明辛夷药材中芳香性双四氢呋喃化学成分，采用溶剂萃取、高速逆流分段、大孔树脂和半制备高效液相色谱分离和纯化，得到了4个高纯度芳香性双四氢呋喃木脂素单体化合物.通过1H NMR、13C NMR、MS等现代波谱学方法分别鉴定为：松脂醇二甲醚(1)，木兰脂素(2)，里立脂素B二甲醚(3)，epimagnolin B(4).辛夷芳香性成分的鉴定为其在医药、食品工业中的应用提供了更好的理论依据.

辛夷；高速逆流色谱；化学成分；木脂素

辛夷为木兰科植物望春花、玉兰或武当玉兰的干燥花蕾，花蕾紧凑，芳香浓郁，是一种名贵的香料和化工原料[1].作为传统中药，它能祛风寒、通鼻窍，可治疗风寒头痛、鼻塞、鼻渊、鼻流浊涕等[2]，因其毒性低、香型优于其他植物，除作为药用外还可替代人工合成的香料，用于食品加工、日常生活用品和化妆品[3].天然产物的香料以萜类、倍半萜类及其含氧衍生物为主要组成的油状液体，以气味和挥发油含量的高低来评价其质量的优劣.辛夷香料常通过水蒸气蒸馏法、溶剂法和超临界流体萃取等方法制取挥发油，但水蒸气蒸馏法提取挥发油成本较低，常破坏挥发油中热敏性香气成分，获得的精油与原植物香气差异很大，各种萃取方法也常导致挥发油中含有其他脂溶性杂质.

辛夷香料提取物中除萜类成分外，尚含有化学组成不清楚的小分子脂肪族化合物和小分子芳香族化合物[4]，挥发油成分检测主要通过GC、GC-MS等方法，不能在GC中气化的脂肪族和芳香族脂溶性杂质则难以被检测出来.目前对香料组成以外的脂溶性成分和生物活性尚缺乏全面了解，阻碍了辛夷挥发油在医药、食品和化妆品生产的使用推广.为更好地开发辛夷的香料成分，了解辛夷挥发油中脂溶性杂质的组成，本文选择脂溶性溶剂萃取辛夷挥发油部分，经过半制备高速逆流分段、半制备高效液相分离纯化，从辛夷香气部位中分离得到了4个木脂素成分，分别为松脂醇二甲醚(1)、木兰脂素(2)、里立脂素B二甲醚(3)、epimagnolin B(4).对辛夷挥发油中其他成分的鉴定也为其香料成分在食品、医药工业中的应用提供了更好的理论依据.

1 仪器和材料

1.1 仪器

高速逆流色谱仪(TBE-300B型,上海同田生化技术有限公司)，核磁共振仪(Bruker AM-400、Bruker DRX-500型, 美国Brucker公司)，质谱仪(Micromass ZabSpec MS System, ESI源, 英国Micromass公司)，色谱柱(YMC-Pack ODS-A, 250 mm×10 mm)，色谱仪(Ultimate 3000型, VWD、DAD detector, 美国戴安)，旋转蒸发仪(RE 52-98型,上海亚荣生化仪器厂)，循环真空泵(SHZ-III型,上海亚荣生化仪器厂)，电子天平(CP214型, 奥豪斯仪器有限公司)，电热鼓风干燥箱(101-OAB型, 天津市泰斯特仪器有限公司)，三用紫外分析仪(ZF-6型,上海嘉鹏科技有限公司).

1.2 试剂

D101大孔树脂(三星安徽树脂科技有限公司)，薄层层析硅胶板(青岛海洋化工厂)，HSCCC分离纯化、萃取和大孔树脂分离所用试剂均为分析纯(国药集团化学试剂有限公司)，高效液相所用甲醇、乙腈均为色谱纯(Tedia Company, USA)，蒸馏水.

1.3 材料

实验所用辛夷药材全部购置于湖北金贵中药饮片有限公司，经中南民族大学药学院李竣副教授鉴定为木兰科木兰属玉兰(MagnoliadenudateDesr.)的干燥花蕾.

2 实验方法

2.1 辛夷脂溶性部位的提取分离

3.2 kg 辛夷粉末用95%乙醇回流提取3次，每次2 h，抽滤，合并滤液，旋蒸减压浓缩，得约470 g深棕色浸膏，将浸膏以水混悬，用氯仿萃取，蒸干得浸膏，得氯仿层提取物241 g.取氯仿层浸膏75 g以D101大孔树脂层析柱分离，50%乙醇上样，分别用60%、80%和100%乙醇洗脱得到35.83 g和24.24 g的60%和80%乙醇部位为.取500 mg大孔树脂60%乙醇洗脱组分浸膏，用5 mLφ(正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶水)=4∶6∶4∶6 的溶液的下相溶解，制得样品溶液，将φ(正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶水)=4∶6∶4∶6这一溶剂体系的上相(固定相)和下相(流动相)按照1︰1的体积比比例泵入高速逆流色谱仪(HSCCC)的分离管路，待管路完全充满两相溶液后，调整转速至900 r/min(正向旋转)，同时将作为流动相的下相溶剂以3 mL/min的流速泵入分离管路.大约60 min之后，当两相溶剂体系达到动态分配平衡时，通过进样阀注入样品溶液.整个分离过程的温度由恒温循环器控制在25℃.检测波长为254 nm. HSCCC色谱图数据从进样后开始采集，根据色谱图一次收集各个部分，将270～300 min收集的组分(组分I,见图1).

图1 60%大孔树脂洗脱部位HSCCC分离色谱图Fig.1 HSCCC chromatogram of 60% macroporous resin elution part

2.2 HPLC制备色谱分离

YMC-Pack ODS-A色谱柱(250 mm×10mm,5μm)，柱温 40℃，流动相：0～100% 甲醇-水为流动相；梯度洗脱，检测波长为254 nm，进样量100 μL，洗脱时间26 min，理论板数按峰计算不低于3000.通过制备HPLC分离(见图2)，得到4个化合物松脂醇二甲醚1(45.2 mg)，木兰脂素2 (66.7 mg)，里立脂素B二甲醚3 (15.6 mg)，epimagnolin B 4 (17.4 mg) (见图3).

图2 组分I 的HPLC色谱图Fig.2 HPLC chromatogram of Fraction I

图3 化合物1～4结构Fig.3 The structures of compound 1～4

3 化合物的结构鉴定

化合物1：松脂醇二甲醚，无色油状物，ESI-MSm/z：386[M]+，分子式为C22H26O6.1H NMR数据见表1，表中数据与文献[5]松脂醇二甲醚的数据相符，故鉴定为松脂醇二甲醚.

化合物 2：木兰脂素，无色油状物，ESI-MSm/z: 416[M]+，分子式为C23H28O7.1H NMR和13C NMR数据见表1，表中数据与文献[6]木兰脂素的数据相符，故鉴定为木兰脂素.

化合物3： 里立脂素B二甲醚，无色油状物, ESI-MSm/z：446 [M]+，分子式为C24H30O8.1H NMR数据见表1，以上数据与文献[7]里立脂素B二甲醚的数据相符，故鉴定为里立脂素B二甲醚.

化合物4：epimagnolin B，无色油状物，ESI-MSm/z：416[M]+，分子式为C23H28O7.1H NMR，13C NMR数据见表1，以上数据与文献[8]epimagnolin B的数据相符，故鉴定为epimagnolin B.

4 结语

随着人们生活质量的提高，绿色的有机的香料正在逐渐受到人们的青睐，从天然产物中提取、研究与开发高效、安全的天然香料，是当今食品添加剂研究领域的热点之一.同时，运用经典的提取分离方法，筛选出具有较好抗菌效果的中草药，并解析其化学组成成分，为今后食品添加剂的合理高效应用提供理论依据.食品的防腐保鲜始终是一个亟待解决的重要问题[9]，辛夷挥发油能明显改善和修饰卷烟香气, 有降低烟气的粗糙度、改善吸味、减轻刺激性、去除杂气的作用[10].

本文从辛夷香料中分离得到4个木脂素类化合物，木脂素类化合物作为一种植物雌激素已引起营养学家、食物化学家和药物学家的普遍关注，具有调节激素平衡、抗氧化活性、抗肿瘤活性、等多种生物活性[11].

辛夷香料成分中尚有化学组成不清楚的小分子脂肪族、芳香类化合物.挥发油常规的检测方法GC，GC-MS难以检测其不挥发的杂质，若不能预知未知杂质的生物活性，则其安全性难以保证.通过HSCCC-HPLC制备的方法能快速检验未知成分，具有操作简单、分离纯度高、制备量大等特点，对快速简单制备未知的天然产物成分具有实际使用价值.

表1 化合物1～4的氢谱和碳谱数据

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[3] 赵铭钦. 卷烟调香学 [M]. 北京: 科学出版社,2008.

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[11] 李 欣,袁建平,刘 昕,等. 木脂素----一类重要的天然植物[J].中国中药杂志,2006,31 (24):2021-2025,2089.

Study on the Aromatic Ditetrahydrofuran Constituents fromMagnoliadenudataDesr.

LiJun,MeiZhiyi,LuoHuiwei,HuangXianju,YangGuangzhong

(College of Pharmacy, South-Central University for Nationalities, Wuhan 430074, China)

In order to investigate the ditetrahydrofuran constituents of spicery fromMagnoliadenudataDesr., solvent extraction, high speed counter-current chromatography (HSCCC), macroporous resin and semi-preparative high performance liquid chromatography (HPLC) were used and four highly purified aromatic lignans were obtained. They were identified as pinoresinol dimethy ether (1), magnolin (2), lirioresinol-B dimethyl ether (3) and epimagnolin B (4).The structures of these compounds were elucidated based on the1H NMR,13C NMR,and MS characterization. The identification of these aromatic components ofMagnoliadenudateDesr. provided a theoretical basis for its application in medicine and food industry.

MagnoliadenudateDesr.; high speed counter-current chromatography; chemical composition; lignin

2014-10-08

李 竣(1975-)，男，副教授，博士，研究方向：天然药物化学成分及质量标准，E-mail：lijun-pharm@hotmail.com

国家自然科学基金资助项目(31000157)，湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队计划资助项目(T201220)

R284.1

A

1672-4321(2015)03-0037-04