狐狸不同部位皮下毛囊组织结构观察

王 康 栾元金 蔡玉梅 李宝全 石有斐 崔文平 马文杰 郭慧君*（山东农业大学动物科技学院 山东 泰安 271018 山东省龙口市东莱街道畜牧兽医工作站）

狐狸是一种以生产毛皮为主的重要经济动物。随着人们生活水平的提高，对毛皮产品需求也日益增加，现阶段我国主要依靠人工饲养狐狸来提高毛皮的产量。2009年山东狐狸的人工饲养量达到656万多只，生产狐皮540万余张，狐狸的养殖加工愈来愈成为农民增加收入、国家出口创汇的新济增长点[1]。但有关狐狸毛皮发育的基础研究还很薄弱，限制了对狐狸毛皮发育的调控技术开发以及深加工技术的开发。本研究主要对雄性狐狸不同部位的毛囊结构进行观察比较，为其加工利用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物 6只发育正常、健康的30月龄雄性北极(大理石霜)狐，体重在7.0～8.5kg，来源于泰安郊区范镇个体养殖户；采样季节为当年6月中旬。.

1.2 方法（1）取样：电击处死动物，选取颈部、背部、前肢、后肢和尾部毛皮4cm×4cm大小区域。用生理盐水打湿，用刀片将毛皮表面的毛发刮净。采取各个部位的组织块的大小以不超过0.5cm3为宜。按照参考文献所提供的方法[2]分别制作连续纵切切切片和横切切片。（2）固定：把毛皮组织样品迅速投入10%中性福尔马林溶液，室温下固定至少24h。（3）脱水：固定后的组织块在进行脱水前用流水冲洗18～24h，然后用梯度酒精依次处理。酒精浓度分别为：70%、80%、85%、90%、95%、100%。处理时间分别为：过夜、1、1、1、>1、>1h。（4）透明：分2次进行：第1次用二甲苯Ⅰ浸泡10min，第2次用二甲苯Ⅱ浸泡10min。（5）浸蜡：将透明好的毛皮组织块浸入融化的石蜡内，停留时间为30min。（6）包埋：将浸好蜡的组织放入盛有溶化石蜡的包埋柜里，使组织块埋于石蜡中。（7）切片：将制成的组织块用切片机按需要的厚度(皮肤组织一般为5～7μm，切成薄片)。（8）展片、贴片：切下的组织蜡片在相应温水进行展片；在展平的蜡片附近，取一清洁载玻片垂直插入水中，然后缓缓上提载玻片，蜡片会自动附在于载玻片上，将其置于38℃温箱中烘干。（9）脱蜡：取已经干燥的切片，放于盛有二甲苯I和二甲苯II的染缸内依次脱蜡10min和5min。（10）染色：根据参考文献所提供的方法[3]进行。自二甲苯中取出切片，放在格板内，滴少量的树胶于组织片中央，切片进行苏木素-伊红(HE)染色。（11）镜检与照相：利用不同放大倍数的显微镜进行比较观察，并选择性照相分析。

2 结果

2.1 不同部位毛囊纵截面组织切片比较 成年狐狸背部、腿部及尾部纵切切片经HE染色后，显示较清晰的毛囊轮廓(见图1)。毛囊根部细胞核一般被染成蓝紫色，其它组织呈现粉红色至桃红色。狐狸皮肤组织由表皮、真皮和皮下结缔组织组成。表皮为复层上皮，结构致密；真皮分为乳头层和网状层。典型的毛囊呈漏斗状，末端膨大部分是毛球，毛球向内弯曲，形成一勺状结构，毛根倾斜与皮肤表面呈锐角，毛根与毛根呈平行排列。初级毛囊毛球分布在真皮层的底部，直径较大，发育较早。次级毛囊直径较小且生长较浅，分布在真皮层的中部，毛囊深度变化较大。毛囊从内到外分别为毛干、内根鞘、外根鞘、结缔组织鞘，初级毛囊的结缔组织鞘和外根鞘较厚，结构也很致密。初级毛囊和次级毛囊的毛干又由毛小皮、毛皮质和髓质组成。

图2 狐狸不同部位皮下毛囊组织横截面切片和染色处理结果(40×10,HE)

2.2 不同部位毛囊横截面组织切片比较 对颈部、前腿上部、背部和后大腿部位进行皮下2mm处做连续切片，选取1～5张进行HE染色，显微镜观察(见图2)。显示颈部和前腿部毛囊密实，背部和后腿部毛囊较稀疏；颈部皮下是以单毛囊单毛发或双毛发为主的次级毛囊，在前腿部和背部是以单毛囊多毛发为主的初级毛囊，在后腿部则是初级毛囊和次级毛囊混合结构。

3 讨论

（1）狐狸是一种经济价值相对较高的毛皮用动物，其毛皮发育程度决定毛皮的质量及其经济价值。由于我国对狐狸的科学研究相对较少，特别是毛皮形态发育方面，导致对毛皮发育调控和加工利用的技术开发方面缺乏科学依据。（2）本研究主要对成年雄性狐狸不同部位的毛皮组织采用常规切片技术和HE染色技术对毛囊结构进行观察。从形态结构来看，狐狸被毛由针毛和绒毛组成，皮肤毛囊也分为初级毛囊和次级毛囊，构成复合毛囊，这与王卓等和Paus等观察到的水貂毛囊结构基本一样[4,5]。狐狸的初级毛囊和次级毛囊内均有发达的髓质，髓质腔可见大小不一的静止空气层，这对狐狸毛皮的隔热保温起到很好的保障；毛囊的毛根部呈弯钩状，这有利于毛根牢固地固着在皮内，不容易脱落；另外，比较发现初级毛囊的位置较次级毛囊更深些，这对针毛和绒毛不同生物学特性的形成可能具有重要的作用。（3）从横切切片来看，狐狸颈部、前腿部毛囊致密，显示更多的毛发数量，但在颈部主要是次级毛囊为主，也就是说主要是绒毛较多，而在前腿部主要是初级毛囊为主，主要是针毛较多。在背部皮下分布较多的是初级毛囊，每个毛囊内含有3～5个次级毛囊，显示背部以针毛为主，绒毛和针毛之间具有结构上的从属关系。在后腿部显示初级毛囊与次级毛囊不同的结构层次，意味着针毛与绒毛的比例在发生变化，这可能与6月中旬狐狸季节性换毛有很大关联。（4）在生产中，狐狸的绒毛长短及其与针毛比例对毛皮的质量、形状及其价格影响较大。绒毛短齐、所占比例大、毛色光亮都会提高毛皮的质量，这均与次级毛囊和初级毛囊的发育有很大关系[6]。基于初级毛囊和次级毛囊结构的发育调控将是开发提高狐狸毛皮质量技术的科学依据。

[1]杨景晁,曲绪仙,马泽芳等.山东省毛皮动物养殖业发展现状与对策[J].经济动物学报,2013,17(1):41-44.

[2]梁东,杨福合,邢秀梅等.利用冷冻切片法与石蜡切片法对水貂组织切片进行优化研究[J].特产研究,2011(1):5-8.

[3]李红芬,郑肇巽,马品耀等.HE染色原理和试剂配制及染色过程中的若干问题的探讨[J].医学信息(上旬刊),2011,24(4):1985-1986.

[4]王卓,李光玉,杨雅涵等.初生水貂皮肤毛囊发育组织学观察[J].中国畜牧兽医,2014,41(8):201-205.

[5]PausR,CotsarelisG.Thebiologyofhairfollicles[J].TheNew EnglandJournalofMedicine,1999,341(7):491-497.

[6]高雅琴,王宏博,梁丽娜等.蓝狐、水貂和獭兔的毛纤维显微结构观察[J].安徽农业科学,2009,37(31):15275-15277.