高效液相色谱法测定咳得宁糖浆中盐酸麻黄碱含量

高 洁 ，曲素欣 ，隋 娟

(1.山东省青岛市市南区社区卫生服务中心，山东 青岛 266002;2.山东省青岛市妇女儿童医院，山东 青岛 266034;3.山东大学齐鲁医院＜青岛＞，山东 青岛 266040)

咳得宁糖浆为医院制剂，由麻黄、杏仁、远志、甘草等中药组方，具有止咳、化痰、平喘功效，用于治疗咳嗽、急慢性支气管炎。方中麻黄为君药，其含量直接影响该制剂的疗效。盐酸麻黄碱是麻黄中的主要活性成分。为控制该制剂质量，笔者采用高效液相色谱法对咳得宁糖浆中盐酸麻黄碱的含量进行测定，现报道如下。

1 仪器与试药

LC－1200型高效液相色谱仪(安捷伦仪器有限公司)。盐酸麻黄碱对照品(中国食品药品检定研究院，批号为171241－201007);乙腈(美国fisher公司)为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯;咳得宁糖浆(山东大学齐鲁医院＜青岛＞医院自制，批号为 20130923，20130924，20130925)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Phenomenex C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流动相:乙腈 － 0.1% 磷酸溶液(10 ∶90);流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;进样量:10 μL;检测波长:210 nm。理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3 000。

2.2 溶液制备

精密量取咳得宁糖浆(批号为20130923)5 mL，加1%磷酸溶液定容至50 mL，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液[1－2]。取盐酸麻黄碱对照品10mg，精密称定，加1%磷酸制成每1 mL含50 μg的溶液，即得对照品溶液。取除麻黄的其余药材，按制备工艺和处方比例制备阴性制剂，按2.2项下方法制备阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

阴性干扰试验:取2.2项下3种溶液，依法进样测定，结果见图1。可见，其他成分对盐酸麻黄碱的测定无干扰。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察:精密吸取盐酸麻黄碱对照品溶液1，3，5，10，15，20 μL，注入液相色谱仪，按拟订色谱条件测定峰面积积，以峰面积积分值(Y)为纵坐标、进样量(X)为横坐标进行线性回归，得回归方程 Y=139 755 X －1 709，r=1.000 0(n=6)。结果盐酸麻黄碱进样量在0.058 30～0.374 4 mg范围内与峰面积积分值线性关系良好。

精密度试验:精密吸取同一对照品溶液10 μL，重复进样5次，测定盐酸麻黄碱峰面积积分值。结果的 RSD为0.21%(n=5)，表明仪器精密度良好。

重复性试验:取同一批(批号为20130923)样品6份，依法制备供试品溶液，进样测定盐酸麻黄碱含量。结果的 RSD为1.07%(n=6)，表明方法重复性良好。

稳定性试验:取同一供试品溶液，于12 h内每隔2 h进样1次，依法测定盐酸麻黄碱的峰面积。结果的 RSD为0.91%(n=6)，表明供试品溶液在12 h内稳定。

加样回收试验:精密量取已知含量的咳得宁糖浆(批号为20130923)适量，精密加入0.005 0 g/L盐酸麻黄碱对照品溶液，依法进样测定，计算回收率，结果见表1。

2.4 样品含量测定

按拟订方法对 3批样品(批号为 20130923，20130924，20130925)进行测定，结果样品中盐酸麻黄碱的含量分别为标示量的101%，102%，101%。

表1 盐酸麻黄碱加样回收试验结果(n=9)

3 讨论

取盐酸麻黄碱对照品适量，加1%磷酸溶解，于200～400 nm波长结果扫描，结果盐酸麻黄碱在210 nm波长处的吸收峰强度大，基线平直，同时参考文献[3－5]的测定结果，故选用210 nm波长作为检测波长。经反复试验并参考文献[6－8]，以乙腈－0.1%磷酸(5 ∶95)、乙腈 －0.1%磷酸(15 ∶85)作为流动相进行试验比较，结果以乙腈－0.1%磷酸溶液(10∶90)为流动相时，盐酸麻黄碱与其他组分的分离度能达到要求，空白试验也无干扰，故以此为流动相。在供试品溶液制备过程中，曾用氯仿[9]提取，经试验，回收率达不到要求，参考文献[10－11]采用甲醇溶解供试品溶液，峰形达不到要求。

文中建立的方法采用1%磷酸溶解供试品，无需提取，操作简便易行，峰形好，无干扰，重复性好，可为咳得宁糖浆的质量控制提供可靠方法。

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