紫外分光光度法测定吲哚美辛片含量及肠溶片的释放度*

吕倩 李婷婷 李珂

(泰山医学院药学院，山东泰安271016)

紫外分光光度法测定吲哚美辛片含量及肠溶片的释放度*

吕倩 李婷婷 李珂

(泰山医学院药学院，山东泰安271016)

目的建立吲哚美辛的紫外分光光度法，并用于吲哚美辛片中吲哚美辛含量及肠溶片释放度的测定。方法采用紫外分光光度法，以磷酸盐缓冲液(pH7.2)—甲醇(1∶1)为溶剂，最大吸收波长320 nm。结果吲哚美辛标准品溶液在10～35 μg/ml的浓度范围内，A=0.0195C+0.0554(μg/ml)线性关系良好，相关系数为0.9995 (n=6);样品在7h内稳定，RSD%为0.25%;平均回收率分别为95.96%，96.85%，98.82%，RSD分别为0.31%，0.36%，0.15%。结论该含量测定方法准确，快速，简单，可靠，可用于吲哚美辛片含量及肠溶片释放度的测定，较适用于生产过程中的质量控制。

紫外分光光度法;吲哚美辛片;吲哚美辛肠溶片;含量测定

吲哚美辛片是常用的前列腺素合成酶抑制药之一，为非甾体消炎解热镇痛药，有显著的抗炎及解热作用，对炎性痛有明显的镇痛效果［1］。其作用机理为通过抑制环氧化酶，从而减少前列腺素的合成，制止炎症组织痛觉神经冲动的形成，抑制炎性反应。主要适用于:①关节炎，可缓解疼痛和肿胀;②软组织损伤和炎症;③解热;④其他:用于治疗偏头痛、痛经、手术后痛、创伤后痛等。了解药品中吲哚美辛的含量，能使我们能够安全合理的用药以及为生产过程的质量控制提供依据。用高效液相法［2－5］可测定吲哚美辛的含量，但用高效液相法测定其含量具有分析成本高、高效液相色谱仪价格及日常维护费用贵、分析时间比较长等缺点。

吲哚美辛在紫外光区有明显的特征吸收，因此本研究采用紫外分光光度法直接测定吲哚美辛片剂的含量，具有操作简便快捷、灵敏度高、精密度及重现性好、仪器设备简单等优点，尤其适用于生产过程中的质量控制。

1 仪器与试剂

1.1 仪器

岛津UV－2550紫外可见分光光度仪(日本岛津公司);电子分析天平(赛多利斯科学仪器北京有限公司);ZRS－8G智能溶出试验仪(天津市天大天发科技有限公司);KQ－500E型医用超声波清洗器(昆山超声仪器有限公司)。

1.2 药品及试剂

吲哚美辛原料药(浙江太仓制药有限公司，生产批号090807);吲哚美辛片(临汾奇林药业有限公司，产品批号1309151，规格为25 mg/片);吲哚美辛肠溶片(临汾宝珠制药有限公司，产品批号131001，规格为25 mg/片);吲哚美辛肠溶片(山西云鹏制药有限公司，产品批号A130702，规格为25 mg/片);纯净水(纯净水公司提供);甲醇(分析纯，天津市永大化学试剂有限公司);盐酸(分析纯，济南试剂总厂)。磷酸二氢钾(分析纯，天津市科密欧化学试剂开发中心);氢氧化钠(分析纯，天津市永大化学试剂有限公司)。

2 实验方法与结果

2.1 测定波长的确定

用移液管精密吸取对照品储备液5.0 ml，置100 ml容量瓶中，用磷酸盐缓冲液(pH7.2)—甲醇(1∶1)溶解，溶液稀释至刻度，摇匀，稀释成25 μg/ ml的溶液，在200～400 nm范围内进行紫外光谱扫描，得到吲哚美辛的紫外吸收光谱见图1，实验结果表明吲哚美辛片的紫外最大吸收波长为320 nm，因此本实验选择320 nm作为测定波长。

2.2 溶液的配制

2.2.1 稀盐酸溶液的配制0.1 mol/L的稀盐酸的配制:取36.5%的浓盐酸8.4 ml加991.6 ml纯净水。

2.2.2 磷酸盐缓冲液的配制pH7.2的磷酸盐缓冲液的配制［6］:精密称取0.7000 g氢氧化钠于烧杯中，加纯净水，搅拌溶解，再加入精密称取3.4000 g的磷酸二氢钾，搅拌溶解，用水稀释至500 ml，摇匀即得。

pH6.8的磷酸盐缓冲液的配制［6］:精密称取0.9440 g氢氧化钠于烧杯中，加纯净水，搅拌溶解，再加入精密称取6.8000 g的磷酸二氢钾，搅拌溶解，用水稀释至1000 ml，摇匀即得。

2.2.3 对照品储备液的配制取氢氯噻嗪原料药50.02 mg，精密称定置100 ml容量瓶中，加甲醇50 ml，振摇10 min使全部溶解，用磷酸盐缓冲液(pH7.2)稀释至刻度，摇匀，制成500 μg/ml吲哚美辛对照品储备液。

2.2.4 供试品溶液的配制取吲哚美辛片20片(临汾奇林药业有限公司，产品批号1309151)，精密称定为1.2848 g，研细，精密称取片粉64.34 mg(约相当于吲哚美辛25 mg)，置100 ml容量瓶中，加入甲醇70 ml，微温使吲哚美辛溶解，放冷至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过;精密量取续滤液1 ml，置10 ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液(pH7.2)—甲醇(1∶1)至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.3 方法学考察和样品测定

2.3.1 标准曲线的绘制精密吸取上述对照品储备液，配制浓度分别为10 μg/ml、15 μg/ml、20 μg/ ml、25 μg/ml、30 μg/ml、35 μg/ml的溶液，以溶剂做空白，照紫外分光光度法于320 nm波长处，测定各溶液的吸光度，以吲哚美辛浓度(C)为横坐标，吸收度(A)为纵坐标，进行线性回归，计算得回归方程为A=0.0195C+0.0554(μg/ml)，结果显示氢氯噻嗪在10～35 μg/ml浓度范围内的吸光度有良好的线性关系，相关系数r=0.9995。

2.3.2 稳定性试验将上述配制的浓度为25 μg/ ml供试品溶液分别在0、1、2、3、4、5、6、7h测定溶液的吸光度。结果显示，溶液在7 h内稳定，平均值为0.5224，RSD为0.31%，表明溶液的稳定性良好。

2.3.3 重复性试验称取吲哚美辛片粉6份(临汾奇林药业有限公司，产品批号1309151)，每份约64.24 mg(约相当于吲哚美辛25 mg)，精密称定，分别置100 ml容量瓶中，加入甲醇70 ml，微温使吲哚美辛溶解，放冷至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，弃去初滤液，取续滤液1.0 ml分别置6个10 ml容量瓶中，加磷酸盐缓冲液(pH7.2)—甲醇(1∶

1)，稀释至刻度，摇匀，照紫外分光光度法于320 nm波长处测定吸光度，计算出样品中吲哚美辛的含量。结果表明此试验重复性良好。

2.3.4 回收率试验精密称取吲哚美辛片粉9份(临汾奇林药业有限公司，产品批号1309151)，每份3.05 mg(约含吲哚美辛1 mg)，每3份一组，分别置10 ml容量瓶中，用适量甲醇溶解，第一组加吲哚美辛标准品0.8 mg，第二组加吲哚美辛标准品1.0 mg，第三组加吲哚美辛标准品1.2 mg，分别用磷酸盐缓冲液(pH7.2)—甲醇(1∶1)定容至刻度，摇匀，过滤，弃去初滤液，分别精密移取续滤液1.0 ml至9个10 ml容量瓶中，加磷酸盐缓冲液(pH7.2)—甲醇(1∶1)稀释至刻度，照紫外－可见分光光度法(中国药典2010年版二部附录ⅣA)于320 nm波长处，测定溶液的吸光度，计算回收率。

表2 回收率试验结果

2.3.5 含量测定取吲哚美辛片20片，精密称定，研细，精密称取片粉适量(约相当于吲哚美辛25 mg)，精密称定，至100 ml量瓶中，加适量甲醇70 ml，微温使吲哚美辛溶解，放冷至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，精密量取续滤液1.0 ml至10 ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液(pH7.2)—甲醇(1∶1)稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液;另取其他规格吲哚美辛片，同法制成每1 ml中约含氢氯噻嗪25 μg的溶液，照紫外分光光度法(中国药典2010年版二部附录IVA)于320 nm波长处，测定溶液的吸收度，计算，即得本品3批样品测定结果。结果见表3。

表3 吲哚美辛片含量测定结果

2.3.6 释放度的测定［7，8］酸中释放度:照释放度测定法(附录XD第二法)，采用溶出度测定法第一法装置，加入1000 ml 0.1 mol/L盐酸溶液为释放介质注入每个溶出杯，实际量取的体积与规定体积的偏差应不超过±1%，待溶出介质温度恒定在37℃±0.5℃时，取吲哚美辛肠溶片6片分别投人ZRS－8G智能溶出仪的六个转篮中，注意供试品表面不要有气泡，转速为每分钟100转，依法操作，经2 h后，分别吸取溶液10 ml，滤过，自取样只滤过应在30秒内完成，照紫外－可见分光光度法(附录ⅣA)，在320 nm的波长处测定吸光度，计算每片酸中的释放量。

缓冲液中释放度:经2 h时，立即将转篮升出液面，供试片均不得有裂缝或崩解等现象，随即将转篮浸入磷酸盐缓冲液(pH6.8)1000 ml释放介质中，转速为100转每分钟，继续依法操作，经45min时，取溶液滤过，自取样至滤过应在30 s内完成，照紫外—可见分光光度法(附录ⅣA)，在320 nm的波长处测定吸光度，计算每片缓冲液中的释放量。

根据2010年版中国药典释放度测定法(附录XD第二法方法2)，酸中释放量每片的释放量均不大于标示量的10%，结果见表4，从表中可以看出两厂家生产的吲哚美辛在酸中的释放度均不大于10%的要求，符合2010年版中国药典的规定，而且两个厂家的吲哚美辛肠溶片均未见裂片，符合中国药典对吲哚美辛肠溶片在酸性介质中的溶出规定，说明药品是合格的;根据2010年版中国药典释放度测定法(附录XD第二法方法2)，缓冲液中释放量每片的释放量均不小于70%，结果见表5，从表中可以看出两厂家生产的吲哚美辛在酸中的释放度均不小于70%的要求，符合2010年版中国药典的规定，说明药品是合格的

表4 吲哚美辛肠溶片酸中释放度测定结果

表5 吲哚美辛肠溶片在缓冲液中释放度测定结果

3 讨论

3.1 辅料的干扰［9］

本实验研究过程中，在确定最大吸收波长的同时对空白辅料(淀粉、胶化淀粉、聚乙烯比咯烷酮、硬脂酸、滑石粉等混合辅料)的吸收波长进行了测定，结果表明药品辅料在200－400nm波长范围内无吸收，不干扰样品的测定，故选择的波长范围在200～400 nm之间。

3.2 溶剂的选择

吲哚美辛在水中溶解性差，根据中国药典(2010年版)，本研究采用甲醇作为溶剂，以磷酸盐缓冲溶液(pH7.2)－甲醇(1:1)稀释后测定。

3.3 影响因素

应用转篮实验时，应注意转篮的洁净程度，一般在阳光下观察转篮的空隙是否有堵塞，如有堵塞，可采用超声或在稀硝酸中煮沸、再在水中煮沸的办法进行，直至确认无任何堵塞物的存在，否则将会影响数据的准确性。实验前应注意外围水浴高度超过溶出杯里液面高度，否则将影响溶出杯中溶出液的温度，导致结果偏低。

［1］赵排风，郭重仪，陈天义等.不除肠溶衣测定吲哚美辛肠溶片的含量［J］.中国药师，2002，5(10):634－635.

［2］孙银华.HPLC法测定吲哚美辛片含量及有关物质［J］.中国药事，2012，26(2):172－177.

［3］高颖，吴艺君，金蓉蓉，等.高效液相法测定吲哚美辛缓释微球的含量［J］.药物生物技术，2012，19(2):0150－0152.

［4］Wang HM，Zhang GY.Indomethacin suppresses growth of colon cancer via inhibition of angiogenesis in vivo［J］.World J Gastroenterol.2005，11(3):340.

［5］Heller J.Ocular delivery using poly(ortho esters)［J］.Adv Drug Deliv Rev.2005，57(14):2053.

［6］中华人民共和国药典，二部.2010:附录177.

［7］许善初，邢蓉，石庆平等.6厂家吲哚美辛肠溶片体外溶出试验比较［J］.蚌埠医学院学报，2004，29(5):467－468.

［8］国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)［M］.北京:化学工业出版社，2000:296，附录75.

［9］辛俊衡.HPLC法测定吲哚美辛片剂的含量［J］.中国药事，2004，18(4):238.

［10］国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)［S］.2010版.北京:中国医药科技出版社，2010:附录XC:附录85－86.

Determination of the Indom －metacin content and release of Indom metacin Enteric －coated Tablets by Uv －vis method

LV Qian LI Ting－ting LI Ke
(Pharmacy Department，Taishan Medical University，Taian 271016，China)

Objective:To establish a Uv－vis method for Indom－metacin，and apply it into the determin of release ratel of Indom metacin Enteric－coated Tablets.Method:Adopting Uv－vis phosphate buffer solution(Ph7.2)－alcohl(1∶1) as dissolvant to determin its absorbance at the biggest assimilate wavelength.Results:Indom metacin’s standard substance dissolvent in the 10～35 μg/ml concentration renge，A=0.0195C+0.0554(μg/ml)(r=0.9995)good liner ralation.The sample will be stabilization in 7h(RSD=0.25%)，the average of Indom metacin Enteric－coated Tablets(n=6)were 95.96%(RSD=0.31%)，98.85%(RSD=0.36%)，98.82%(RSD=0.15%).Conclusion:The method is accurate，convienent，sensitive and reliable with high reproducibility and used for content determination of release ratel of Indom metacin Enteric－coated Tablets and management control in the productive process.

Uv－vis;indom mectain;indom mecain;enteric－coated tablt;content determination

R917

A

1004-7115(2015)08-0884-04

10.3969/j.issn.1004-7115.2015.8.013

2015－5－28)

吕倩(1995—)，女，山东济南人，泰山医学院药学院本科学生。

李珂，泰山医学院药学院副教授，E－mail:kli@tsmc.edu.cn。