四种血吸虫病检测方法在传播控制地区病情监测中的对比观察

佘有彬

(南京市六合区疾病预防控制中心，江苏 南京211500)

南京市六合区位于长江下游北岸，地型自南向北渐升高，南部多河网，是江滩型的血吸虫病流行区。经过50多年的积极防治，全区于2009年达到了血吸虫病传播控制标准[1，2]。为掌握达标后血吸虫病疫情变化，在该区东沟镇大河口村设一个血吸虫病防治监测点，在2012年的病情监测中，我们采用免疫学检测(ELISA、DDIA)和病原学检测(Kato-Katz法粪检、粪便集卵孵化)4种诊断方法[3]，对583例受检对象的血液和粪便样本进行对比检测观察，就4种诊断方法的敏感性、特异度及其相互间的关联性进行了分析，结果如下。

1 材料与方法

1.1 人群的选择 2012年10-11月，选择六合区东沟镇大河口村6周岁以上(含6周岁)常住居民共583人为检测对象。

1.2 仪器设备 检测使用的设备有：Wellsccan MK3型自动酶标仪、Wellsccan MK3型自动洗板机 、电热恒温培养箱(HH、BII、420)、光照培养箱(LRH-250-G)、 可调移液器 (0~200μl)、 三角烧瓶、Kato-Katz定量板、Olympus显微镜等

1.3 检测方法 采用ELISA和DDIA法检测待测血清中抗体，ELISA法是一种特殊的试剂分析方法,在免疫酶技术的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术[4]，使用上海市寄生虫病防治研究所生产的试剂盒，DDIA法采用无锡赛德科技开发有限公司生产的试剂盒。

采用尼龙绢集卵孵化法(3送3检)和改良加藤法(kato-katz法，1送3检)检测毛蚴和虫卵。

免疫学检测和病原学检测的操作要求参见 《中华人民共和国卫生行业标准 血吸虫病诊断标准(WS261-2006)，附录 B 和附录 C》。

2 结果

2.1 血清学与病原学检测结果 对583例受检对象的血液和粪便检测结果为，ELISA法、DDIA法、集卵孵化法、Kato-Katz阳性率分别为3.26%(19/583)，3.43%(20/583)，0.34%(2/583)和 0.34%(2/583)，由此可见血清学检测方法的阳性率与当地居民抗体水平有关。

2.2 集卵孵化法与Kato-Katz法的比较 结果见表1，一致性检验显示集卵孵化法与改良加藤法的检测方法敏感度完全一致(Kappa=1.0)。

表1 集卵孵化法与改良加藤法的检测结果

2.3 ELISA法与DDIA法的比较 结果见表2，一致性检验显示ELISA法与DDIA法的检测方法敏感性一致程度相当满意(Kappa=1.0)。

表2 ELISA法与DDIA法的检测结果

3 讨论

在大规模血吸虫病防治中连续多年的扩大化疗和预防服药必然使血吸虫的排卵及卵的孵化收到抑制[5]，导致病原学检测的检出率低。本文结果显示：集卵孵化法与Kato-Katz法两者一致性检验能有相当满意的一致程度，但孵化法在现场大规模使用很困难、成本高、需花费大量的人力、物力，而Kato-Katz法操作比较简单、省工省力等，现场大规模病原学查病中，Kato-Katz法的适用性优于孵化法。

ELISA与DDIA都有较高的检出率，一致性检验能有相当满意的一致程度，ELISA法在检测过程中费时、需要专用仪器设备、操作烦琐，而DDIA法省时、不需仪器设备、操作简单、判断直观[6]。所以在现场免疫学查病方法DDIA法优于ELISA法。按全国血吸虫病综合治理重点项目查病化疗技术方案开展现场工作时，免疫学检测的特异性都不够理想，且抗体检测难以区分过去感染(包括经化疗治愈者)与现症感染，检测阳性不一定是反映出现症病人，其诊断价值有限。所以本文认为在现场查病时，用免疫学检测方法过筛后，阳性者再用病原学检测方法确定体内有无活虫存在，效果会更好。

[1]雷正龙,郑浩,张利娟,等.2010年全国血吸虫病疫情通报[J].中国血吸虫病杂志,2011,2(6):599-604.

[2]梁幼生,黄轶昕,洪清标,等.江苏省实现血吸虫病传播控制的新策略与新技术[J].中国血吸虫病防治杂志,2012,24(2):119-122.

[3]中国人民共和国卫生行业标准WS261-2006.血吸虫病诊断标准[S],2006:附录 B,附录 C.

[4]谭立明.ELISA法检测的影响因素及其对策[J].实验与检验医学,2013,31(4):300-305.

[5]祝红庆,曹淳力,王强,等.山丘型流行区血吸虫感染者人数低估原因探讨[J].中国血吸虫病杂志,2006,18(3):214-216.

[6]孙乐平,黄轶昕,洪清标,等.胶体染料试纸条试验在血吸虫病大规模现场查病中应用价值的评价 [J].中国血吸虫病防治杂志,2004,16(6):426-431.