光学显微镜在尿红细胞形态检查中的应用价值

薛白，李靖，王奔放

(江苏护理职业学院检验药学系，江苏 淮安223300)

血尿是泌尿系统疾病最常见的临床表现之一。血尿来源的确定对于疾病的临床治疗有着较为重要的意义。鉴别血尿来源的方法有很多，国内相继使用相差显微镜[1]、扫描电镜、血细胞分析仪、全自动尿沉渣分析仪、普通光镜(染色或不染色)[2]等。这些方法通过对尿红细胞形态的检查，帮助我们鉴别血尿的来源，主要包括肾小球源性血尿和非肾小球源性血尿。

目前应用相差显微镜或联合全自动尿沉渣分析仪观察血尿中红细胞形态来鉴别血尿来源己有较多研究[3]，而普通光学显微镜由于其使用方便、成本低等特点也逐渐受到各医院，特别是基层医院的青睐。但就使用普通光学显微镜来检查尿红细胞形态，进而对血尿的定位诊断价值仍存有争议。本实验室通过在普通光学显微镜下确定血尿诊断的敏感性和特异性，从而对普通光镜检测血尿来源的可行性提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2014年3-7月笔者所在医院门诊及病房泌尿科患者183例新鲜中段尿液样本，其中男98例，女85例，年龄6～75岁。102例经临床病史、实验室检查、B超、静脉肾盂造影、膀胱镜、CT、和(或)肾活检等，证实为肾小球病变．其中急慢性肾小球肾炎87例、狼疮性肾炎5例、肾囊肿3例、肾病综合征7例；另81例行泌尿系造影或膀胱镜或B超检查等，确诊为非肾小球病变，其中肾结石42例、输尿管结石14例、膀胱癌9例、尿路感染16例。

1.2 方法

1.2.1 设备仪器选用 Olympus显微镜、改良牛鲍计数板、刻度离心管、离心机等。

1.2.2 操作方法 取患者清晨新鲜中段尿液20 ml，注入一次性刻度离心管中立即送检，1500 r/min离心5 min，弃去上清液，留0.2 ml尿沉渣，轻轻混匀后取1滴充入牛鲍计数板中，用普通光学显微镜观察尿中红细胞形态，记录尿红细胞数、畸形红细胞数及红细胞畸形率。

1.3 尿红细胞形态判断标准

1.3.1正常尿红细胞形态 红细胞形态较为完整，膜光滑，血红蛋白充盈好，胞体大小基本正常。常见的形态有：(1)正常红细胞大小形态与外周血正常红细胞相似，呈双面凹圆盘状；(2)球形红细胞胞体正常或偏小，表面光滑呈球形；(3)淡影样红细胞扁平肿胀，直径较大，表面光滑，血红蛋白含量减少或消失；(4)桑葚形红细胞呈皱缩球形[4]。

1.3.2 畸形尿红细胞形态 红细胞膜有缺损，血红蛋白多逸出，细胞形态大小差异明显。常见的形态有：(1)芽孢状，细胞质外伸，细胞膜外凸，带有1个或多个芽孢；(2)线状，红细胞呈线形甚至扭曲折叠；(3)炸面包卷样，红细胞膜呈明显的内外两圈、四周肥厚、形似炸面包卷；(4)串珠样，红细胞膜下致密颗粒状沉淀；(5)酵母样：红细胞固缩呈酵母菌样；(6)戒形、靶形红细胞；(7)膜缺损红细胞：红细胞膜不完整，部分血红蛋白丢失；(8)膜穿孔样红细胞：细胞质有空白亮点；(9)碎片状，红细胞碎裂成片状或碎屑。以上参照黄锋先等[5]，李雪峰和王厚照[6]尿红细胞形态分类方法。

1.4 血尿判断标准 尿中红细胞＞8000个/ml。肾小球性血尿：尿畸形红细胞类型在2种以上(非均一性血尿)，且占红细胞总数＞70%[7]；非肾小球性血尿：尿中大部分为正常红细胞或异常细胞种类不超过2种(均一性血尿)，畸形细胞＜30%；混合型血尿：为上述两种血尿的混合，尿中畸形红细胞数＞30%，但＜70%，胞体大小差异明显，且有血红蛋白逸出。

1.5 统计学处理 采用SPSS 13.0进行数据统计，计数资料采用卡方检验，P<0.05具有统计学意义。

2 结果

肾小球性血尿与非肾小球性血尿中畸形红细胞含量见表1，以出现非均一性形态计算红细胞畸形率；从中得出，光镜下尿畸形红细胞对诊断肾小球性血尿敏感性为87.3%，特异性为82.7%；两组尿畸形红细胞含量(%)组间比较P=0.00<0.05，结果差别有统计学意义。

表1 183例肾性和非肾性血尿患者普通光镜观察红细胞形态统计(n)

3 讨论

尿液中红细胞数量增多，超过8000个/ml一般提示泌尿系统疾病，并且常伴随着红细胞形态异常，其形成原因有很多。尿液主要由血液经过肾脏时，经肾小球滤过膜滤过，大部分水和一些小分子物质进入肾脏而形成。当肾小球滤过膜发生病变，孔径变大时，血液中的红细胞也进入肾脏，同时又受到肾小球滤过膜的挤压变形，从而表现出多种畸形状红细胞，呈现形态的不均一性。除此以外，红细胞形态也会受尿液中酸碱度和渗透压值的影响。在碱性、高渗尿中红细胞皱缩变形；在酸性、低渗尿中红细胞胀大甚至破裂成影红细胞或面包圈样[8]。在非肾小球性血尿中，由于不存在肾小球滤过膜病变的前提，红细胞形态一般不发生改变，即使有尿pH和渗透浓度的影响，也是呈现均一性的形态改变。

在本文一共183例标本中，利用普通光学显微镜诊断肾小球源性血尿的敏感性是87.3%，与国内用相差显微镜诊断肾源性血尿的临床数据敏感性[3]相近；而特异性是82.7%，与相关文献报道有些差异[9]，可能原因是标本收集后放置时间过久或离心时间过长等，从而出现皱缩或胀大的同时伴随着裂片红等形态；也有可能是科室工作人员在细胞形态观察上相对经验缺乏等。本文中肾性和非肾性红细胞形态畸形率P<0.05，提示在肾源性血尿诊断上，肾小球源性红细胞畸形率明显高于非肾小球源性，与相关文献报道基本一致[10]。说明将普通光学显微镜应用在尿红细胞形态鉴别上，从而帮助临床进行血尿的肾源性鉴别是可行的，并有较大的临床应用价值。同时普通光镜相比相差显微镜等仪器，成本较低，更易于在基层医院检验科普及使用。但由于普通光学显微镜在细胞形态表现的清晰度上确是没有相差显微镜高，这也要求检测者具有较强的细胞形态辨认能力。同时，为提高结果准确性，也可以联合尿化学检测结果或病人临床资料，从而做出更为正确的诊断。

[1]李树平,刘文东.相差显微镜检查肾小球性血尿的诊断标准评价[J].实验与检验医学,2010,28(3):301-302.

[2]王平平,马文.普通光镜检查尿红细胞形态在血尿来源诊断中的价值[J].国际检验医学杂志,2012,33(23):20-21.

[3]肖笑,叶任高,蒋文功.尿红细胞位相显微镜检查诊断肾小球性血尿的临床评估[J].中国中西医结合肾病杂志,2004,5(3):32.

[4]范金斌.血尿红细胞形态及其分类在临床应用中的价值[J].实验与检验医学,2011,29(6):645-646.

[5]黄锋先,董秀清,叶任高,等.普通光镜对血尿定位诊断的评价[J].中华肾脏病杂志,1996,12(2):104-105.

[6]李雪峰,王厚照.尿红细胞形态鉴别血尿来源的应用价值探讨[J].医学论坛杂志,2010,31(14):35-36.

[7]刘成玉,罗春丽.临床检验基础[M].北京:人民卫生出版社,2013:170.

[8]从玉隆,马骏龙.几种检侧尿红细胞方法的价值与互补关系[J].中华检验医学杂志2002,25(5):263-264.

[9]许艳茹.光镜下尿红细胞形态检查在血尿诊断中的应用价值[J].国际检验医学杂志,2012,33(10):21-22.

[10]卢新兆,黄晓华.尿中红细胞形态在肾小球肾炎诊断中的应用价值[J].检验医学与临床,2011,8(16):27.