正天丸对戊巴比妥钠及巴比妥钠催眠作用的影响*

胡伟 周新卫 王德才(.枣庄职业学院医学院，山东枣庄77800;.泰山医学院附属新泰医院，山东新泰700; .泰山医学院药学院，山东泰安706)

正天丸对戊巴比妥钠及巴比妥钠催眠作用的影响*

胡伟1周新卫2王德才3
(1.枣庄职业学院医学院，山东枣庄277800;2.泰山医学院附属新泰医院，山东新泰271200; 3.泰山医学院药学院，山东泰安271016)

目的通过观察正天丸对戊巴比妥钠及巴比妥钠催眠作用的影响，了解正天丸对肝微粒体细胞色素P450活性的影响。方法将60只小鼠随机分为溶媒组(2%吐温-80，20 ml/kg)、氯霉素组(25 mg/kg)及正天丸低、高剂量组(3，6 g/kg)，每组15只，连续等容灌胃3d，末次给药1h后，再给小鼠腹腔注射戊巴比妥钠40 mg/kg或巴比妥钠180mg/kg，观察小鼠的睡眠潜伏期和睡眠时间。结果氯霉素组和低、高剂量的正天丸组使戊巴比妥钠对小鼠的催眠时间分别延长222.2%、123.1%、42.6%，其中氯霉素组和小剂量正天丸组与溶媒组比较，小鼠的睡眠时间显著延长，均P＜0.01。与溶媒组比较，高剂量的正天丸能显著延长巴比妥钠催眠潜伏期(P﹤0.01)，并缩短催眠时间(P﹤0.01)。结论正天丸可能抑制小鼠肝微粒体细胞色素P450活性，同时对中枢神经系统有兴奋作用。

正天丸;戊巴比妥钠;巴比妥钠;催眠作用;细胞色素P450

正天丸系由第一军医大学南方医院中医科陈宝田教授和赵新先主任药师根据祖国医药理论研制的纯中药制剂。以钩藤平肝息风，白芍养血敛阴、柔肝止痛，辅以细辛、防风、独活、羌活等祛风胜湿，川芎活血化瘀止痛，当归补血活血调经止痛，红花、鸡血藤以活血、补血、通络，附子散寒除湿等，临床上用于治疗各种慢性头痛，疗效显著［1］。半个多世纪以来，一直深受患者青睐，其主要有效成分包括钩藤碱、阿魏酸、川芎嗪、芍药苷、红花苷、当归素、苦杏仁苷、伪麻黄碱等［2］。组方中的独活、羌活、白芷、防风、当归等药材含有大量的香豆素类化合物［3］，有资料表明香豆素类化合物可抑制肝微粒体细胞色素P450(cytochrome P450，CYP)的活性从而干扰许多药物的药动学过程［4］。中成药正天丸对CYP活性有何影响，尚未见资料报道。本实验以戊巴比妥钠催眠时间作为CYP体内活性的指标，观察正天丸对戊巴比妥钠及巴比妥钠催眠作用的影响，以了解正天丸对CYP活性的影响，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 药品和试剂

正天丸，三九医药股份有限公司，批号0708272 (研碎，在不断搅拌下滴加2%吐温-80溶液，配制成0.15 g/ml和0.30 g/m l的正天丸混悬液，备用);氯霉素，南京白敬宇制药有限公司，批号060626;巴比妥钠，天津市港通化工有限公司，批号070628;戊巴比妥钠，北京化学试剂公司，批号061206;其它试剂均为国产分析纯。

1.2 动物

昆明种小鼠，体重20±2g，♀♂各半，由本院实验动物中心提供。

1.3 方法

1.3.1 正天丸对戊巴比妥钠催眠作用的影响取小鼠60只，随机分为4组，每组15只，分别给予5%吐温-80(溶媒对照组)、0.125%氯霉素、0.15 g/ml和0.30 g/ml的正天丸混悬液20 m l/kg灌胃，每日给药1次，连续3天。末次给药1h再分别腹腔注射(ip)0.4%戊巴比妥钠溶液10 ml/kg(40 mg/kg)。室温23～25℃，ip戊巴比妥钠时间均在上午9时左右。以小鼠翻正反射消失和恢复作为“入睡”和“苏醒”的指标，计算戊巴比妥钠对小鼠的催眠潜伏期(从ip戊巴比妥钠至翻正反射消失的间隔时间)和催眠时间(从翻正反射消失至恢复的间隔时间)［5］。

1.3.2 正天丸对巴比妥钠催眠作用的影响取小鼠60只，随机分为4组，每组15只，实验条件、给药剂量和方法同1.3.1。末次给药1h再分别ip 0.18%巴比妥钠溶液10 ml/kg(180 mg/kg)。同上法观察巴比妥钠对小鼠的催眠潜伏期和催眠时间。

1.3.3 统计学处理运用SPSS15.0软件进行统计分析。数据以均数±标准差表示，组间比较采用方差分析。

2 结果

2.1 正天丸对戊巴比妥钠催眠作用的影响

ip戊巴比妥钠溶液或巴比妥钠溶液后小鼠表现为共济失调和自发活动减少，2小时内翻正反射未消失，视为“未睡眠”，催眠时间以“0”计。观察小鼠睡眠时间为6个小时，即360 min，在360 min后仍没“苏醒”的小鼠，为便于组间比较，睡眠时间以360 min计算。发生睡眠的小鼠潜伏期最长为110 min。为便于组间比较，将“未睡眠”鼠的潜伏期以110 min计算。

结果发现，氯霉素组和低、高剂量的正天丸组使戊巴比妥钠对小鼠的催眠时间分别延长222.2%、123.1%、42.6%，其中氯霉素组和小剂量正天丸组与溶媒对照组比较，小鼠的睡眠时间显著延长，均P＜0.01。各组催眠潜伏期的差异均无统计学意义。见表1。

表1 正天丸对戊巴比妥钠催眠作用的影响

表1 正天丸对戊巴比妥钠催眠作用的影响

注:与溶媒组比较，*P＜0.01。

组别剂量n催眠潜伏期(min)催眠时间(min)催眠时间变化率(% -15 10.7±6.2 103.5±29.0-氯霉素组25 mg/kg 15 7.5±1.7 333.5±62.7*222.2正天丸低剂量组3 g/kg 15 6.9±2.9 230.9±55.7*123.1正天丸高剂量组)溶媒组6 g/kg 15 7.9±3.9 147.6±34.4 42.6

2.2 正天丸对巴比妥钠催眠作用的影响

催眠潜伏期和催眠时间的计算方法同上。各组小鼠末次灌胃1 h后再分别ip巴比妥钠180 mg/ kg，结果发现溶媒组、氯霉素组和低、高剂量正天丸组2 h内翻正反射未消失的“未睡眠”鼠数分别是1只、3只、4只和9只，催眠时间以“0”计，潜伏期以110 min计算。与溶媒组比较，正天丸高剂量组催眠潜伏期显著延长，且显著缩短巴比妥钠对小鼠的催眠时间。氯霉素组和正天丸低剂量组对催眠潜伏期和催眠时间的影响，与溶媒组比较均无显著性差异。见表2。

表2 正天丸对巴比妥钠催眠作用的影响

表2 正天丸对巴比妥钠催眠作用的影响

注:与溶媒组比较，*P＜0.01。

组别剂量n催眠潜伏期(min)催眠时间(min)催眠时间变化率(%) -15 46.8±18.9 143.3±53.2-氯霉素组25mg/kg 15 60.3±22.3 113.3±60.9-20.9正天丸低剂量组3 g/kg 15 55.7±19.9 105.3±51.2-26.5正天丸高剂量组6 g/kg 15 88.3±26.1*42.5±49.6*溶媒组-70.3

3 讨论

肝微粒体CYP酶系统是药物代谢的关键酶，俗称肝药酶。药物对CYP活性的影响是药物间相互作用最重要的机制。戊巴比妥钠主要由CYP代谢灭活，故其催眠时间的长短反应了戊巴比妥钠在体内代谢速度的慢或快，对其催眠作用的影响可以反映对CYP的作用［5］。但是具有中枢抑制作用或兴奋作用的药物也可能延长或缩短戊巴比妥钠的催眠时间。巴比妥钠脂溶性低，主要以原形经肾脏排泄，对小鼠催眠时间的长短主要受药物中枢作用的影响，基本不受CYP抑制或诱导的影响。由实验结果看出，高剂量的正天丸组能延长巴比妥钠的催眠潜伏期，并显著缩短巴比妥钠对小鼠的催眠时间，提示正天丸对小鼠的中枢神经系统有兴奋作用。有资料表明，正天丸组方中的白芷含有大量的香豆素类组分，大剂量时具有中枢兴奋作用［6］。麻黄碱和伪麻黄碱是正天丸中抗炎镇痛的有效成分之一，二者均是肾上腺素受体激动剂，具有兴奋中枢神经和类肾上腺素样作用，显示血管收缩、心脏兴奋等效应［7］。本实验结果显示的正天丸的中枢兴奋作用可能与香豆素类、麻黄碱、伪麻黄碱等化学成分有关。

各组小鼠戊巴比妥钠的催眠潜伏期差异不明显，但氯霉素和正天丸低剂量组与溶媒组比较，对小鼠的催眠时间具有显著的差异，提示正天丸对小鼠CYP有抑制作用。因CYP的抑制作用，致使戊巴比妥钠在体内代谢灭活减慢，血药浓度降低变缓，呈现睡眠时间的显著延长。抑制CYP表现为催眠时间延长，中枢兴奋则缩短催眠时间。正天丸对戊巴比妥钠催眠作用的影响则是两个因素综合作用的结果，即影响CYP的药动学因素和中枢兴奋作用的药效学因素共同作用的结果。正天丸大剂量组对戊巴比妥钠催眠作用的影响不明显，可能与大剂量正天丸的中枢兴奋作用加强则抵消CYP抑制引起催眠时间延长有关。正天丸主要方药组成有白芍、白芷、川芎、当归、地黄、独活、防风、附片、钩藤、红花、鸡血藤、麻黄、羌活、桃仁、细辛等，其中白芷、独活、防风、羌活、川芎等中药材均富含香豆素类化合物，正天丸对CYP的抑制作用可能与香豆素类化合物有关。

CYP同工酶种类繁多，本实验采用的阳性对照药氯霉素对参与临床常用药物代谢的多种CYP同工酶均有很强的抑制作用，选择性不明显［8］。正天丸对CYP的抑制作用是否有选择性，对临床常用药物代谢和疗效的影响等问题，尚需进一步的探讨。

［1］李涛，范吉平，曹克刚.正天丸组方配伍及功效特点解析［J］.中医药导报，2013，19(6):65-66.

［2］黄澜，黄惠琼，李玲玲.正天丸的HPLC特征图谱研究［J］.中国药房，2015，26(12):1713-1715.

［3］张恭孝，李聚仓，王德才.独活中总香豆素组分的含量测定［J］.中华中医药学刊，2010，28(12):2647-2648.

［4］李聚仓，郑辉，王德才.中药有效成分对细胞色素P450影响的研究进展［J］.医药导报，2011，30(3):342-244.

［5］徐叔云，卞如濂，陈修.药理学实验方法［M］.第2版.北京:人民卫生出版社，1991:489.

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［8］汪辉，彭仁绣.P450特异性化学抑制在外源化合物代谢中的作用［J］.药学学报，1999，34(11):877-880.

Influence of Zheng-tian pill on the hypnotic effects of pentobarbital sodium and barbital sodium in m ice

H
UWei1ZHOU Xin-wei2WANG De-cai3
(1.Medical School of Zaozhuang Vocational College，Zaozhuang 277800，China; 2 Affiliated Xintai Hospital of Taishan Medical Univeisity，Xintai271200，China; 3 Pharmacy College of Taishan Medical Univeisity，Taian 271016，China)

Objective:To observe the influence of Zheng-tian pill on the hypnotic effects of pentobarbital sodium and barbital sodium.Methods:Mice were randomly divided into solvent(5%Tween-80，20ml/kg)，chloromycetin(25 mg/ kg)and Zheng-tian pill(3，6 g/kg)groups，which were administered orally with equivalent volume，once a day and for three days.An hour later at the last administration，all the animalswere given pentobarbital sodium(40mg/kg，ip)or barbital sodium(180mg/kg，ip)，and then the latent period and duration of hypnosiswere observed.Results:Hypnotic duration of pentobarbital sodium was prolonged by 222.2%，123.1%and 42.6%in chloromycetin and two Zheng-tian pill groups respectively，chloromycetin group and Zheng-tian pill group at the lower dose compared with solvent group，there were evident difference(P﹤0.01)，and yet the large dose of Zheng-tian pill prolonged evidently hypnotic latentperiod(P﹤0.01)and shortened obviously hypnotic duration(P﹤0.01)of barbital sodium.Conclusion:The findings in this study suggest that Zheng-tian pill is likely to inhibit livermicrosomal cytochrome P450 activity and to excite the central nervous system at a higher dose in mice.

Zheng-tian pill;pentobarbital sodium;barbital sodium;hypnotic effect;cytochrome P450

R285.5

A

1004-7115(2015)09-0982-03

10.3969/j.issn.1004-7115.2015.09.001

2015-04-05)

胡伟(1974—)，男，山东枣庄人，讲师，主要从事药理学教学与科研工作。

王德才(1962—)，男，教授，主要从事中药药理学研究。