接骨丹对大鼠胫骨骨折愈合疗效的影像学研究

牛恒立，赵国彪，马中兴，陈晓东，白雪红

1兰州大学第二医院，甘肃 兰州 730030；2兰州大学药学院；3甘肃省秦安县人民医院；4甘肃药业信息研究所；5甘肃省人民医院

接骨丹对大鼠胫骨骨折愈合疗效的影像学研究

牛恒立1，赵国彪2，马中兴3，陈晓东4，白雪红5

1兰州大学第二医院，甘肃 兰州 730030；2兰州大学药学院；3甘肃省秦安县人民医院；4甘肃药业信息研究所；5甘肃省人民医院

目的：观察接骨丹对于骨折愈合及骨形成的影响。方法：采用开放性骨折模型制作方法制作大鼠骨缺损模型，通过拍摄胫骨X光片，并根据骨折肢X片评分标准，对各组大鼠在不同时间段进行相应的评分。在此评分基础上，考察接骨丹对于骨折愈合及骨形成的影响。结果：给药组相较于空白组骨缺损部位骨痂生成良好、骨缺损明显减小、骨折肢X线片评分明显高于空白对照组（P＜0.05）。 结论：接骨丹对于骨折愈合及骨形成有促进作用。

接骨丹；胫骨；骨损伤；骨缺损；X线片。

骨缺损指骨的结构完整性被破坏，是临床常见病。其典型的缺损局部临床表现，结合X线检查，即可明确诊断[1]。较小的骨缺损（通常指8mm以下），对于一个健康的非吸烟者来说，有可能自行愈合；但骨缺损过大，或者是在较小的骨头上的骨缺损，很难完全愈合[2]。甘肃民间中药接骨丹[3]由西藏山溪鲵组成，可促进细胞增殖、成骨性分化，提高碱性磷酸酶活性、钙盐沉积量、Ι型胶原含量、骨钙素含量和钙化结节数，口服后的代谢产物可刺激大鼠骨髓间充质干细胞增殖，并能促进其成骨性分化[4]。本研究通过大鼠开放型骨折模型制作方法制作骨损伤模型，同时通过此模型考察接骨丹对于骨折愈合及骨形成的促进作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器、设备 德国L E ICA R M-2015生物组织切片机，O l ym p u s BX41显微摄影系统，M i as病理图像分析系统。实验所用BM P-2兔抗鼠多克隆抗体为北京博奥森生物工程有限公司提供，即用型S A B C免疫组化试剂盒为福州迈新生物公司提供。

1.1.2 动物 S D大鼠40只，雌雄各半，（230± 50）g，购自于甘肃中医药大学S P F级动物实验中心，动物质量合格证号：0001112。

1.1.3 药物 接骨丹（西藏山溪鲵），购自于甘肃省渭源县黄香沟罗家磨，经定西市药检所鉴定；盐酸氯胺酮注射液(福建吉田药业有限公司，批号：110530)。

1.1.4 药物溶液配制 称取晒干研磨均匀的西藏山溪鲵适量，取生理盐水适量溶解，配制成0.025 g/mL的接骨丹混悬液。

1.2 方法

1.2.1 造模[3]各组大鼠腹腔注射氯胺酮（20m g/kg），待麻醉后，仰卧固定、对左后肢胫骨处进行脱毛处理、消毒，于左后肢胫骨下端切开1.5~2 cm切口，分离肌肉，避免血管神经损伤，暴露胫骨，用专用电钻于胫骨中端磨出宽4 mm深达髓腔骨缺损，逐层缝合，伤口不包扎不固定[5-7]，每天消毒，7天后分笼饲养。

1.2.2 分组 将造模成功大鼠随机分为2组：治疗组和空白对照组，每组20只。治疗组大鼠经灌胃给予治疗量接骨丹（0.25 g/kg），2次/d，连续给药28天，空白对照组灌服2mL生理盐水。

1.2.3 影像学检查 于术后第4、7、14、21、28天随机在各组选取4只大鼠（雌雄各半）进行影像学检查。

1.2.4 影像学检查条件 影像学检查在63 k v、374mA、22mses、8.1mAs的条件下进行X线扫描拍片。

1.2.5 骨损伤X片评分 骨损伤的愈合情况根据影像学检查结果，按下述标准进行评分[8-10]：1）错位：已缺损胫骨无错位包括错位＜0.1 cm的得1分；有错位包括骨折断端错位未超过其断端的1/2或骨折端轻度成角的得0分。2）骨缺损：已缺损胫骨缺损部位部分模糊或消失的得1分；未有明显变化的得0分。3）连接：已缺损胫骨骨折端连接成一整体的得1分；未连接的得0分。4）腓骨：腓骨未断裂或断裂后连接的得1分；腓骨断裂的得0分。5）愈合：已缺损胫骨未愈合包括无内外骨痂或骨折缝依旧的得0分；骨折愈合包括有内外轻度骨痂改变，同时骨折缝变浅或模糊的得1分。

2 结果

2.1 接骨丹对大鼠胫骨骨折X线片评分值的影响 在给予药物治疗第4、7天后骨缺损清晰可见，同时空白对照组骨缺损亦未有任何变化2组相比较无显著性差异（P＞0.05）；在给药14天给药组骨折断端有大量骨痂生成骨缺损开始明显变小，空白对照组虽然也有骨痂生成但骨缺损变化不大，两者存在显著性差异（P＜0.05）；给药21天后骨缺损进一步变小甚至消失，相比较空白对照组骨缺损的变化不明显；给药28天后骨缺损胫骨基本连接成一个整体，骨愈合显著，空白对照组骨缺损变小，但骨愈合现象明显无给药组显著，两者之间存在明显差异（P＜0.05）。见表1。

表1 接骨丹对大鼠胫骨骨折X线片评分的影响

3 讨论

中药治疗骨折愈合已在临床实践中证明有一定的优势，中医认为“跌打损伤皆瘀血在内而不散也，血不活则瘀不能去，瘀不去则折不能续”，肝失血养则骨折愈合得较为缓慢。而甘肃民间中药接骨丹在广大劳动人民中就是作为接骨续筋的药物，且可以用来养肝。X线检查可以较好地反应骨折愈合情况。所以本实验中我们采用X线检查方法来对各组大鼠的骨损伤愈合及治疗效果进行评分。从研究结果我们可以得出接骨丹能明显改善骨折愈合情况，提高影像学检查评分，大大缩短骨折的愈合时间，促进骨折的愈合。同时，随着给药时间的增加，骨损伤的改善变得尤为明显。此项研究为临床使用、研究接骨丹治疗骨损伤提供实验基础和经验，而在治疗骨损伤中哪种主要成分发挥作用，以及作用的部位、靶点、通路，是我们以后研究的方向和重点。

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Study on ClinicalEffectsof JieGu Pills in Healing Ratw ith Tibial Fracture from Im aging

NIU Hengli1,ZHAOGuobiao2,MA Zhongxing3,CHEN Xiaodong4*,BAIXuehong5
1 Lanzhou University Second Hospital,Lanzhou 730030,China; 2 Pharmacy College of Lanzhou University;3 Qin’an County People’s Hospital; 4 Gansu Pharmaceutical Information Institute;5 Gansu Provincial Hospital

Objective:To survey the effects of JieGu pills on the healing of bone fracture and bone formation. Methods:Ratmodel w ith bone defectwas prepared by themethod of open fracturemodelmaking,the rats in the groupswere scaled in different times by taking tibial X ray and evaluation standards of bone fracture limb X ray.On the foundation,to investigate the effects of JieGu pill on the healing of bone fracture and bone formation.Results: Compared w ith the blank group,themedication group showed better formation of callus and lessbone defects,higher than blank control group in the scales of bone fracture limb X ray obviously(P＜0.05).Conclusion:JieGu pill could promote the healing ofbone fracture and bone formation.

JieGu pill;tibia;bone injury;bone defect;X ray

R683

B

1004-6852(2015)08-0175-02

2014-11-18

牛恒立，男，大学本科，副主任药师，研究方向，中药药理学。

陈晓东，男，大学本科，主管药师，研究方向，中药信息化。