抗凝剂对血小板计数的影响

薛 可

抗凝剂对血小板计数的影响

薛 可

目的 观察不同抗凝剂对血小板计数的影响。方法 使用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)和柠檬酸钠两种抗凝剂采血真空管, 并随机采集148例患者的血常规标本, 然后运用SYSMEX-1800i血细胞分析仪进行检测。另外, 对血液标本进行涂片, 在显微镜下观察血小板的凝集状况, 计数血小板数量。结果 乙二胺四乙酸二钾和柠檬酸钠抗凝样本显微镜检测血小板聚集的情况之间存在差异, 采集依赖性假性血小板减少症患者血液之后立刻进行检测, 结果显示差异具有统计学意义(P＜0.05)；2 h和4 h后仪器法检测结果差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论 乙二胺四乙酸二钾有可能会造成血小板假性减少,使用柠檬酸钠抗凝在一定程度上可以减少乙二胺四乙酸二钾对血小板计数的影响, 另外, 时间等其他因素也会导致血小板假性较少。

血小板；乙二胺四乙酸二钾；柠檬酸钠；血小板凝集

在人体内, 血小板在止血和血栓形成过程中起着比较重要的作用, 并且, 还参与到了动脉粥样硬化和炎性反应的过程中, 因此, 血小板计数在诊断和治疗血栓和出血性疾病中有着非常重要的意义［1］。据临床分析, 血小板聚集会造成血小板数量假性大量减少, 从而导致假性血小板减少。由于假性血小板的发生率比较低, 容易导致临床上出现漏诊的情况,假如在诊断疾病时没有及时发现血小板减少的现象, 则容易发生误诊［2］。本次研究主要探究不同的抗凝剂对血小板计数的影响, 为临床诊断提供可靠的理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本次研究选取2011～2013年在本院接受治疗的148例患者, 其中男72例, 女76例。

1.2 仪器与试剂 使用SYSMEX-1800i血细胞分析仪, EDTA-K2和柠檬酸钠真空抗凝管。SYSMEX-1800i全套试剂,校准品以及质控品。

1.3 方法 在测定过程中每天使用质控品作质控, 每隔6个月对仪器进行一次校准。根据仪器操作规程严格进行操作,使用血细胞分析仪检测血标本, 并且同时制备血涂片, 观察形态和血小板聚集的状况, 进行血小板计数。

1.4 统计学方法 应用SPSS19.0统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差( -x±s)表示, 采用t检验；计数资料采用χ2检验。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

直接涂片显示：EDTA-K2和柠檬酸钠抗凝血涂片显微镜观察发现存在血小板聚集的现象, 见表1。SYSMEX-1800i血细胞分析仪计数结果显示, 对患者进行采血之后立刻对EDTA-K2进行检查, 抗凝血小板计数平均值显著低于柠檬酸钠抗凝剂, 而且2 h后、4 h后仪器法检测结果显示差异有统计学意义(P＜0.05), 见表2。经过t检验和χ2分析显示, EDTA-K2组差异有统计学意义(F=60.42, P＜0.05)；柠檬酸钠组差异有统计学意义(F=98.04, P＜0.05)；两组之间不同时间, t值分别为6.374、6.482、4.191, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。

表1 两种抗凝管不同时间对血小板聚集的影响(n)

表2 两种抗凝管不同时间对血小板计数的影响( x-±s, ×109/L)

3 讨论

乙二胺四乙酸(EDTA)盐不会对红细胞、白细胞形态产生较大的影响, 因此, 国际血液标准化委员会建议将EDTA-K2当作血细胞计数的抗凝剂, 并且被广泛应用于世界各地。但是, EDTA-K2容易导致血小板中的某些成分发生变化, 从而造成血小板聚集、堆积的现象, 最后导致血细胞计数仪无法正确地识别血小板, 造成血小板假性减少［3］。

目前, 关于EDTA-K2导致血小板假性减少的报导虽然比较多, 但是对于发生的机制目前还尚未有统一的定论。有学者认为发生的原因是, 在作为免疫介导的血液中, 出现的冷抗血小板自身抗体, 这种EDTA依赖的冷抗血小板自身抗体可以和单核细胞或者是淋巴细胞膜上Fc受体, 出现卫星现象。抗凝剂的问题就是EDTA造成血小板减少的关键问题,临床上有学者认为, 可以改用柠檬酸钠抗凝样本从而获取准确地血小板计数, 排除血小板聚集的影响可以得到更加准确的血小板计数, 本次研究主要围绕着观察和比较两种抗凝剂对血小板计数的影响, 找到更可靠的抗凝方法, 从而实现血小板计数更加精准地目的, 为临床诊治工作提供可靠的理论依据［4］。

分析本次研究结果发现, 两种抗凝剂对血小板的凝集造成较大的差异, EDTA-K2对血小板计数的影响效果比柠檬酸钠更大, 同时, 还证实了标本静置的时间也会对血小板假性减少产生影响, 2 h内EDTA-K2对血小板假性减少的影响效果比柠檬酸钠更加明显, 并且随着时间的不断延长而减小,符合刘铁牛等［5］提出的血小板假性减少和标本静置时间、实际、抗凝剂、溶血、溶血素、血小板大小以及形态等有关系。但是, 由于血小板计数还受到采血时间、方式以及采血之后是否摇匀等因素的影响, 因此, 在日常工作中, 还应该对血细胞分析仪检测血小板结果减低的病例经过涂片镜下观察、显微镜下手工计数等方式来尽量减少血小板计数假性减少错误的发生。另外, 还需要医生在实际检测的过程中提高自身的业务能力, 还要多和临床联系, 尽量减少误差。

［1］ 李宝琴, 张永珍, 张丽, 等.抗凝剂致血小板计数偏差的原因探讨.河北医药, 2013, 2(20):29-30.

［2］ 杜维东, 耿晓茹.不加抗凝剂回输腹腔内出血323例报告.中国社区医师(医学专业半月刊), 2012, 7(4):74-75.

［3］ 姜学慧, 王英芳.比较两种抗凝剂对血小板测定结果的影响与分析.中国医学创新, 2012, 14(35):85-86.

［4］ 冯永青, 翟春玺.不同时间、温度、抗凝剂对血浆凝血酶原时间测定结果的影响.陕西医学检验, 2014, 2(1):214-215.

［5］ 刘铁牛, 周萍.乙二胺四乙酸二钾抗凝剂致血小板依赖性凝集79例分析.华南国防医学杂志, 2012, 11(3):96-97.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.16.085

2014-12-29］

450000 郑州大学附属郑州中心医院检验科