不同方法检测抗链球菌溶血素O的比较研究

米剑

【摘要】目的：对不同方法检测抗链球菌溶血素O进行比较研究。方法：选取我院2013年2月2014年3月间收治的80例链球菌感染患者，分别用溶血抑制法、乳胶凝集试验及自动化透射比浊法检测患者的血清ASO，对ASO增高率进行分析比较。结果：溶血抑制法检测的ASO增高率为30%，乳胶凝集试验检测的ASO增高率为37.5%，自动化透射比浊法检测的ASO增高率为43.75%，三组数据之间比较无统计学差异（P>0.05）。结论：ASO较低或较高水平增高时，溶血抑制法与乳胶法容易出现误差，而比浊法检测ASO的敏感性较佳，结果重复性好，检测ASO比较准确，值得于临床推广应用。

【关键词】不同方法，检测，抗链球菌溶血素O，比较研究

【中图分类号】R4 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2015）01-0112-02

溶血性链球菌的感染与急性肾小球肾炎、急性风湿热、风湿性关节炎、风湿性心脏病等都有关[1]。目前，常用来检测感染溶血性链球菌的方法主要有溶血抑制法、乳胶凝集试验及自动化透射比浊法等。这三种方法的检测原理各不相同，结果也存在差异[2]。为了进一步研究三种方法检测的临床价值，我院对2013年2月2014年3月间收治的80例链球菌感染患者采取不同方法检测抗链球菌溶血素O进行比较研究，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料

选取我院2013年2月2014年3月间收治的80例链球菌感染患者，男45例，女35例，年龄9-73岁，平均年龄（42.6±5.8）岁。其中20例急性肾小球肾炎患者，35例游走性关节疼痛伴发热患者，25例风湿热患者，所有患者均已了解治疗方案并签署了知情同意书，自愿接受检测安排。抽取患者4 mL空腹静脉血，分离血清备用，分离血清后-30℃冻存。

1.2方法

溶血抑制法检测：溶血素来自上海医化所，进行溶血抑制法检测；乳胶凝集试验检测法：将ASO胶乳灵敏度调整为200IU/ml，超过该滴度便按出现可见的凝集颗粒原理测定，具体 操作方法依据说明书实行；自动化透射比浊法检测法：（1）精密度评价：ASO质控品、校准品，样品为高浓度血清标本，分别重复测定50次，再计算均值与变异系数；（2）定标稳定性评价：于第0天定标同时测定质控品、校准品、高浓度血清标本，在接下来的3个月内，继续用该试剂进行检测，与第0天结果相比；（3）复溶后校准品的稳定性评价：用蒸馏水复溶冻干校准品后置于2-8℃，连续以此标本测定2个月，密切关注测定值变化；（4）线性测定范围评价：冻干校准品被不同量蒸馏水稀释为12个浓度水平，按照不准确度以确定线性测定范围；（5）抗干扰性评价：以递增方式将干扰物质加入血清标本，游离胆红素、血红蛋白、结合胆红素、类风湿因子及三酰甘油加入的最高浓度依次为0.18g/L、5.0g/L、0.21g/L、416 Iu/m1、12.82g/L，浊度在660nm处的最高吸光度是0.18。

1.3统计学处理

数据均通过SPSS19.0软件处理，计量资料用t检验，计数资料用卡方检验，当P<0.05时表示数据间比较差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 不同方法检测ASO增高率情况的比较

溶血抑制法检测的ASO增高率为30%，乳胶凝集试验检测的ASO增高率为37.5%，自动化透射比浊法检测的ASO增高率为43.75%，三组间数据比较无统计学差异（P>0.05）。具体见下表1。

表1 不同方法检测ASO增高率情况的比较

检测方法 例数 ASO增高率（%）

溶血抑制法 80 24 30

乳胶凝集试验 80 30 37.5

自动化透射比浊法 80 35 43.75

X2 3.25

P >0.05

3 讨论

链球菌溶血素O为A族溶血性链球菌代谢产物之一，是一种有溶血活性的蛋白质，具备抗原性[3-4]。在人体中A族溶血性链球菌作为正常菌群存在，正常情况下人体内抗链球菌溶血素O（ASO）有一定的基础值。通常当机体被感染A群溶血性链球菌后3周内，血清中就会出现ASO[5]，滴度直到病愈后几个月月到半年内才可以降为正常水平。所以ASO增高能够作为机体感染A群溶血性链球菌的标志。在临床上我们通常观察到有的AS患者出现不同程度的ASO增高，这些患者一般是难治性的AS。感染链球菌后[6]，该细胞壁上的胞浆及其分泌的蛋白质或者M蛋白发挥抗原作用，与免疫球蛋白相互结合后，成为免疫复合物，沉积在肾小球基底膜从而损伤了肾小球滤过膜。链球菌有些抗原具有阳性电荷，能够利用电荷反应同肾小球结构相互结合形成原位种植抗原，再结合免疫球蛋白后成为原位免疫复合物，从而激活补体，导致肾小球内系膜细胞及皮质细胞增生，吸引单核细胞与中性粒细胞浸润导致病变。测定抗鏈球菌溶血素O抗体，对诊断急性肾小球肾炎有十分重要的意义。有70-80%的急性肾小球肾炎患者能够因抗链球菌溶血素O抗体增高滴度。

以前多选择溶血抑制法检测ASO，该方法按照还原剂助O溶血素可以溶解红细胞的特点，观察ASO中和O溶血素溶血效果，定量检测ASO，虽然方法敏感，但是操作比较烦琐，影响试验因素多，结果重复性不佳[7]。近几年来，国外通常选择使用比浊法，其操作自动化，稳定的试剂，定量的结果，我国也正在逐渐引用，但因试验费用、仪器设备经常受到限制。现在比较普遍的方法是乳胶凝集试验，其敏感性差，只可以定性，影响的因素较多，对观察病情与疗效不利。本次研究我院同时采用了上述三种方法检测80份样本，结果显示溶血抑制法检测的ASO增高率为30%，乳胶凝集试验检测的ASO增高率为37.5%，自动化透射比浊法检测的ASO增高率为43.75%，三组数据之间比较无统计学差异（P>0.05）。检测的敏感性：自动化透射比浊法>乳胶凝集试验检测>溶血抑制法溶血法。值得注意的是，ASO水平较高抗体过剩时，溶血抑制法与乳胶法常规操作会呈假阴性，容易出现漏检、误检。故由此可知，上述三种方法相比，可见比浊法检测ASO的敏感性较佳，结果重复性好，检测ASO比较准确，值得推广。

参考文献：

[1]许仁美，柏永明，王亚莉，方凤. 住院儿抗链球菌溶血素O状态再评估[J]. 临床医学，2012，（11）：38-40.

[2]张淑琼，王凡. 奥林巴斯AU5400检测血清抗链球菌溶血素O的测量范围评价[J]. 检验医学与临床，2014，（7）：436-438.

[3]周晶晶，汪国生，李向培，厉小梅，钱龙. 血清抗链球菌溶血素O检测在强直性脊柱炎中的临床意义[J].安徽医科大学学报，2013，（4）：419-422.

[4]孙长俭，王晓艳，徐彩姝，张矩. 临床抗链球菌溶血素“O”、类风湿因子检测结果分析[J]. 国际检验医学杂志，2012，（21）：367-368.

[5]孙秀凤，曹丽群. 抗链球菌溶血素“O”（ASO）定量检测的临床应用体会[J]. 中国实用医药，2007，7（1）：72-73.

[6]陆巧英，吴鸣，陆燕. 过敏性紫癜、紫癜性肾炎患儿链球菌感染的检测与临床意义[J]. 浙江医学教育，2010，（01）：38-39.

[7]池继敏，张峰，张静. 不同类型关节炎患者血液及关节液中尿酸、抗链球菌溶血素O和类风湿因子含量比较[J]. 中华临床医师杂志，2013，（21）：47-48.