不同检测方法在检查梅毒螺旋体抗体中的应用价值研究

赵肖云，谢乃亮，钟美华，莫帆

（1.右江民族医学院检验学院2012级检验医学本科，广西 百色 533000 E－mail：zhaoxiaoyunyy＠163.com；2.广西梧州市人民医院，广西 梧州 543000）

梅毒是一种由梅毒螺旋体（treponema pallidum，TP）引起的慢性传染性疾病。95%的梅毒患者是通过性传播和血液传播，极少数可通过物品传播。TP通过黏膜或者破损的皮肤进入人体后，经淋巴系统及血液播散至全身，几乎可以侵犯全身各脏器和组织，引起人体所有的器官和组织的病变，对人体危害重，传染性强，且患者感染后的临床表现极为复杂，部分患者可多年无症状而呈潜伏状态，严重危险公共卫生安全［1］。目前，血清学试验是实验室诊断梅毒的主要方法，每一种检测方法都有其特殊的诊断价值，而检测方法的优劣关系到结果的准确性，影响患者的诊断与治疗［2］。为进一步了解甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）、梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）、梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA－TP）三种检测方法在检查梅毒螺旋体抗体中的应用价值，本研究分别对TRUST、TPPA、ELISA－TP三种检测方法进行比较，现报告如下。

1 资料和方法

1.1 标本来源 收集2013年1月～2014年6月我院收治的90例经临床确诊为梅毒感染患者的90份血清标本，另随机抽取非梅毒患者的90份血清标本，共180份血清标本为研究对象。

1.2 检测设备

1.2.1 检测试剂 TRUST试剂购自上海荣盛生物药业有限公司，TPPA试剂购自日本富士瑞必欧株式会社，ELISA－TP试剂购自上海科华生物工程股份有限公司。

1.2.2 检测仪器 上海科华KR13st－360酶标仪，恒温箱，振荡器。

1.3 检测方法 以上各试验操作步骤及结果判断均严格按照试剂盒所附说明书进行。

1.4 检测指标 计算三种检测方法的阳性率，同时分别计算TRUST、TPPA、ELISA－TP三种检测方法的灵敏度、特异度和Youden指数。灵敏度＝真阳性数／（真阳性数＋假阴性数）×100%，特异度＝真阴性数／（真阴性数＋假阳性数）×100%，Youden指数＝（灵敏度＋特异度）－1。

1.5 统计学方法 数据的分析采用SPSS 18.0统计软件，计数资料的组间比较采用χ2检验，三组间的两两比较采用Bonferroni法调整检验水准，以P＜0.0167为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 三种检测方法检测血清学标本结果比较 研究结果表明，三种检测方法在检测梅毒患者的90份血清标本时，TRUST检测的阳性率为83.33%，TPPA为95.56%，ELISA－TP为98.89%，三种方法比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。TRUST检测的阳性率与TPPA比较差异有统计学意义（χ2＝7.120，P＝0.008），与ELISA－TP比较差异具有统计学意义（χ2＝13.445，P＜0.001）。TPPA 检测的阳性率与ELISA－TP比较差异无统计学意义（χ2＝1.851，P＝0.174）。三种检测方法在检测非梅毒患者的90份血清标本时，TRUST检测的假阳性率为7.78%，TPPA为1.11%，ELISA－TP为2.22%，三种方法比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。TRUST检测的假阳性率与TPPA比较差异无统计学意义（χ2＝2.854，P＝0.091），与ELISA－TP比较差异无统计学意义（χ2＝1.410，P＝0.235）。TPPA 检测的阳性率与ELISA－TP比较差异无统计学意义（χ2＝0.339，P＝0.560），见表1。

表1 三种检测方法检测血清学标本结果比较 （n，%）

2.2 三种检测方法检测血清学标本的灵敏度和特异度比较 研究结果显示，三种检测方法中灵敏度最高的 为 ELISA － TP（98.89%），其 次 为 TPPA（95.56%），最后为 TRUST（83.33%）；特异度最高的为TPPA（98.89%），其次为 ELISA－TP（97.78%），最低为 TRUST（92.22%）；Youden指数最高的为ELISA－TP（0.97），其次为 TPPA（0.94），最后为TRUST（0.78），见表2。

表2 三种检测方法检测血清学标本的灵敏度和特异度比较

3 讨论

近年来，国内外梅毒的发病率一直居高不下，且和艾滋病的传播途径相同，可大大增加感染和传播艾滋病的危险，是一个全球关注的公共卫生问题。目前，梅毒的血清学检查已列入我国献血员和临床患者输血前、手术前以及各种创伤性检查的常规项目［3］，因此选择一种灵敏度高、特异度强、方便快捷的检测方法，对于梅毒的诊断及治疗具有重要意义。

TP于1905年由Schaudinn和Hoffmann发现，是小而纤细的螺旋状微生物，因其透明不染色，故又称苍白螺旋体。TP含有很多抗原物质，多数为非特异性（如心磷脂），少数为特异性（如TP抗原），一旦侵入人体后，可在机体产生两种抗体，一种为非特异性抗体，另一种为特异性抗体（即抗TP抗体）［4］。

临床上常采用TRUST检测非特异性抗体，即用心磷脂做抗原，检测血清中的抗心磷脂抗体，该方法操作简便快捷，可用于大量人群的筛查［5］，但由于非特异性抗体通常出现较晚，在一期梅毒时多呈阴性，对于梅毒的早期筛查易造成假阳性，且该抗体还可多见于其它疾病，如类风湿性关节炎、红斑狼疮等自身免疫性疾病以及肿瘤性疾病，特异性不高［6］。故在本次研究中采用TRUST进行检测时，TRUST检测出梅毒患者的阳性率明显低于TPPA和ELISA－TP，检测非梅毒患者的假阳性率明显高于TPPA和ELISA－TP，灵敏度和特异度不高，Youden指数也明显低于TPPA和ELISA－TP。

本研究结果显示，ELISA－TP检测梅毒患者血清标本阳性率高达98.89%，TPPA达95.56%。原因在于，TPPA和ELISA－TP均为梅毒螺旋体抗原血清实验，临床上主要用于检测特异性抗体，实验敏感性及特异性均较高，而TPPA的工作原理是将从感染TP的家兔睾丸中提取的TP纯化，并以超声粉碎后作为抗原，以明胶颗粒作为载体，若抗体过多时，抗原抗体的结合不能形成大的复合物，抑制可见的反应出现，造成灵敏度不高。若想避免该现象，需将标本多步稀释，操作繁琐，成本较高［7］。研究表明，TPPA检测非梅毒患者血清标本假阳性率仅为1.11%，ELISA－TP为2.22%，均低于TRUST的7.78%。由于ELISATP易受标本溶血、细菌污染、标本存放过久等因素影响［8］，呈假阳性的概率明显大于 TPPA，却又低于TRUST。研究结果显示，Youden指数最高的为ELISA－TP（0.97），其次为 TPPA（0.94），最后为TRUST（0.78）。说明，在本次研究中ELISA－TP的实验效果更好，真实性更强。但鉴于特异性抗体对机体无保护作用，经足量抗梅毒治疗后仍持续存在，甚至终身，故TPPA和ELISA－TP检测结果不能用于观察疗效、复发及再感染评估。

综上所述，TPPA和ELISA－TP的灵敏度、特异度以及Youden指数均高于TRUST，更适合用作临床诊断梅毒的实验室检测方法，但每种检验方法均有各自的特点，临床工作者需根据患者实际情况，选择正确的优化组合进行检测，提高检出率与诊断正确率。

［1］ 胥国强，康清秀，蒲泽宴，等.4种方法检测梅毒螺旋体抗体结果的比较及应用评价［J］.国际检验医学杂志，2011，32（16）：1869－1870.

［2］ 王碧玉，曾自如.胶体金法、酶联免疫吸附试验和明胶颗粒凝集试验检测血清梅毒抗体的结果比较［J］.右江民族医学院学报，2011，33（2）：210－211.

［3］ 刘静，刘婕，巩瑜，等.5种血清学方法检测梅毒螺旋休抗体的评价［J］.现代检验医学杂志，2014，29（4）：103－105.

［4］ 顾友祥，姜俊.多种梅毒抗体检测方法的比较［J］.检验医学与临床，2012，9（4）：391－392.

［5］ 杨晓东，吴大富，饶丽华，等.三种梅毒抗体检测方法在临床应用中的评价［J］.山西医药杂志，2014，43（22）：2691－2692.

［6］ 汪伟，鲁怀伟.梅毒4种检测方法的比较［J］.安徽医学，2013，34（2）：193－194.

［7］ 陈云，王厚照，张玲，等.梅毒螺旋体抗体三种检测方法的价值比较［J］.临床军医杂志，2012，40（5）：1197－1198.

［8］ 马连学，李艳菊.梅毒螺旋体抗体三种血清学方法应用评价［J］.中国实验诊断学，2010，14（1）：116－117.