Ki67表达与乳腺癌新辅助化疗疗效的关系

吴昱冶 黄美玲 潘妙君

广东省农垦中心医院肿瘤内科，广东湛江 524000

乳腺癌是肿瘤科临床常见病、多发病，其治疗越来越受到人们的重视。目前治疗方法多为：术前化疗-手术切除-术后化放疗，新辅助化疗（neoadjuvant chemotherapy，NC）指术前化疗。NC能缩小肿瘤体积，还可降低区域淋巴结分期，利于患者预后。Ki67与细胞的有丝分裂有关，与染色质相连，被看作是染色体的骨架，是能反映细胞群体增殖活性较可靠的生物学指标之一[1-5]。本研究旨在寻找局部晚期乳腺癌中生物学标志物Ki67对NC的预测价值，探讨对该疾病的最佳治疗方案。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院2010年1月~2014年1月收治入院的接受NC的乳腺癌患者80例，患者年龄24～70岁，中位年龄51岁，年龄≤35岁者4例（5.0%），>35岁者76例（95.0%）。 T1期 48例（60.0%），T2期 30例（37.5%），T3期2例（2.5%）。腋窝淋巴结有转移者37例（46.2%），无转移者43例（53.8%）。组织学级别：Ⅰ级4例（5.0%），Ⅱ级 50例（62.5%），Ⅲ级 26例（32.5%）。Ki67指数为0.9%~95.0%，平均27.8%。Ki67的阳性细胞比例≥30%者57例（71.2%），为高表达组，<30%者23例（28.8%），为低表达组；根据Ki67表达下降水平，将患者分为明显下降组66例（82.5%）、轻度下降组 14例（17.5%）。

1.2 入选标准

临床均已明确诊断为乳腺癌患者；心、肝、肾等脏器无功能障碍患者；无远处转移患者；未经放化疗、手术治疗及内分泌治疗患者。乳腺肿物＞3.0㎝，或乳腺有可测量肿物伴腋窝淋巴结转移；年龄20~70岁，PS评分为0~2分；依从性好，能理解本研究并签署知情同意书者。

1.3 排除标准

双侧乳腺癌患者、术前NC者、未进行前哨淋巴结活检或腋窝淋巴结清扫无法行腋窝淋巴结状态评估者以及临床病理资料缺失者。

1.4 治疗方法

多西他赛（TAX，哈药集团生物工程有限公司，批号：20080601）75 mg/m2，第 1 天，持续 3 h 静脉滴注，环磷酰胺（CTX，上海第十二制药厂，批号：900507）600 mg/m2，第1天，静脉注射，21 d为1个周期。给TAX、CTX时用心电监护仪监测血压、心率、呼吸等。预先给药：TAX注射液用药前1 d开始口服地塞米松（白云山天星制药股份有限公司，批号：060402）7.5 mg，2次/d，连用3 d；化疗前 30 min静脉注射法莫替丁（上海信宜药厂有限公司，批号：H10950278）40 mg。化疗3个周期后，根据临床情况及患者保乳意愿行改良根治术或保乳手术。

1.5 方法

1.5.1 检测方法 采用SP免疫组织化学法染色，所有试剂及S-P试剂盒均购自北京中山生物技术有限公司。石蜡标本5μm连续切片。脱蜡，梯度乙醇水化，高温抗原修复，PBS冲洗，3%过氧化氧阻断过氧化氢酶，血清封闭，加1抗，孵育l h，加2抗并微波修复。加链霉素卵白素，DAB显色，苏木素复染，自来水冲洗返蓝，梯度乙醇脱水，树胶封片。用PBS液代替1抗作阴性对照。

1.5.2 结果判定 通过评估染色强度和细胞阳性率进行半定量分析，结果根据染色强度和细胞阳性率分数相加所得总和，分成0~2分阴性（-），3~4分阳性（+）和5～6分强阳性（++）3个等级。运用Miler and Payne（MP）治疗反应评价系统评价病理学疗效：1级为浸润癌组织的数量无变化；2级为浸润癌组织的数量减少比例≤30%；3级为浸润癌组织的数量明显减少31%～90%；4级为浸润癌组织的数量>90%，仅有少数残余的癌细胞散在分布；5级为所有切片均无浸润性癌残存，可以有残存的导管内癌成分。病理疗效评价由2名病理科医师独立盲法阅片完成。自定义MP 3～5级为病理有效，MP 1～2级为病理无效。

1.6 统计学处理

数据应用SPSS 18.0软件包进行处理，计数资料采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

MP治疗反应评价结果：1级8例，2级16例，3级49例，4级4例，5级3例。高表达组的病理有效率显著高于低表达组（χ2=6.218，P<0.05），明显下降组显著高于轻度下降组（χ2=10.083，P<0.05）（表 1）。

表1 不同组病理有效率的比较[n（%）]

3 讨论

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，年龄、肿瘤大小、腋窝淋巴结状况、组织分化程度、雌激素受体、孕激素受体和人表皮生长因子受体2等因素是指导乳腺癌治疗和预后预测的重要指标[6-9]。现已公认乳腺癌不仅是一个局部病灶，而更是一个全身性疾病，当肿瘤直径为2~3 cm时，具有腋窝淋巴结肿大潜在危险性＞60%，而远处微小转移的危险性＞50%，最终导致失败的是远处转移，潜在患者体内的微小转移灶，往往成为致死的隐患。据统计，20%的局部晚期乳腺癌对化疗不敏感，NC将延误其局部治疗时机，故国内外多项研究寻找预测NC疗效有关因素。NC具有降低患者临床分期、提高保乳手术率、可以直观观察肿瘤对化疗药物的敏感性等优势，故成为乳腺癌的重要治疗手段。Ki67是细胞增殖的相关抗原，由Gerdes等首先发现，仅在增殖细胞核中表达，是与增殖细胞相关的核抗原，可反映肿瘤细胞活性，与恶性肿瘤的发展、转移和预后高度相关[10]，被认为是较理想的检测细胞增殖活性的指标，对预测乳腺癌预后及指导治疗具有重要意义。本研究探讨Ki67表达与乳腺癌NC疗效的关系，结果显示，Ki67高表达组的病理有效率显著高于低表达组，Ki67表达明显下降组显著高于轻度下降组（P<0.05），提示Ki67可作为预测和评估乳腺癌NC疗效的生物学指标。Ki67高表达（≥30%）的乳腺癌患者5年生存率低，复发转移率高，预后较差，因此预测NC疗效对局部晚期乳腺癌治疗决策至关重要[11-14]。寻找有效预测生物学指标，能明显提高局部晚期乳腺癌的治疗效果。

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