离子色谱法测定硫酸头孢噻利中三氟乙酸残留

陈 芳，李润岩，吴春敏

（1.石药集团欧意药业有限责任公司，河北 石家庄 050000；2.河北省食品检验研究院 河北省食品安全重点实验室，河北 石家庄 050091）

硫酸头孢噻利化学名称为7β－［（z）－2－（2－氨基－4－噻唑基）－2－（2－甲氧亚氨基乙酰氨基）］－3－［3－氨基－2－（2－羟乙基）－1－吡唑鎓基］甲基－3－头孢烯－4－羧酸硫酸盐［1］，属于第四代注射用头孢菌素，是一种高效广谱抗菌药物。该产品于1998年在日本首次上市。在硫酸头孢噻利的制备过程中，三氟乙酸作为一种有机催化剂来使用的［2］，由于三氟乙酸属于四类溶剂，在临床使用中存在毒性，因此必须严格控制其在成品中的残留量。

目前，部分学者对环境中［3－6］及部分药品中［7－10］的三氟乙酸残留进行了研究分析，但是对硫酸头孢噻利中三氟乙酸的残留检测鲜有报道。本文采用离子色谱法建立了硫酸头孢噻利中三氟乙酸残留的检测方法，灵敏度高，重现性好，适用于药物中该物质的质控。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

DionexICS－3000型离子色谱仪（美国戴安公司），配DIONEX ASRS 4mm阴离子抑制器、DIONEX EG50自动淋洗液发生器、电导检测器和Chromeleon工作站。

三氟乙酸标准品购自于Sigma公司，纯度＞98%；试验用水为18.25MΩ·cm超纯水（自制）。

硫酸头孢噻利供试品由石药集团某公司提供。

标准储备溶液：精确称取适量三氟乙酸标准品，用超纯水溶解并定容，配成浓度约为1mg／mL的标准贮备液，置于冰箱中4℃保存备用。根据需要配成适当浓度的标准使用液。

1.2 样品前处理

精密称定硫酸头孢噻利样品0.1g（精确至0.001g），于10mL带刻度比色试管中，加入适量的超纯水溶解并定容至2mL。漩涡2min，超声10min，5000r／min离心3min，过0.45μm滤膜，待测。

1.3 色谱条件

采用Dionex IonPac AS19（4mm×25cm）阴离子交换色谱柱及相应的IonPac AS19（4mm×5cm）阴离子保护柱；DIONEX ASRS 4mm阴离子抑制器，外加水抑制模式，抑制电流100mA；DIONEX EG50自动淋洗液发生器，为1.0mmol／L氢氧化钾溶液，流速为1.0mL／min；电导检测器，检测池温度：30℃；进样体积为25μL。

2 结果与分析

2.1 超声时间的选择

在其他条件相同的条件下，实验考察了不同的超声时间（0、5、10、20、30min）对检测结果的影响。实验结果表明，当超声时间未达到10min之前，三氟乙酸的检测结果随超声时间的增长而增大，当超声时间超过10min以后，检测结果基本持平。因此，我们选择超声时间为10min。

2.2 色谱柱的选择

我们考察了AS19和AS11两种色谱柱，实验结果发现，同等浓度时，三氟乙酸在AS19色谱柱上响应值更好，而且峰型对称，因此，本实验选择AS19色谱柱为今后实验的分析柱。

2.3 色谱条件的选择

实验研究了不同浓度淋洗液和检测器温度对三氟乙酸检测结果的影响。实验结果表明，淋洗液浓度为1.0mmol／L，检测池温度为30℃时，即可获得较好的检测结果。在该色谱条件下对标准溶液进行测试，三氟乙酸的保留时间约为6.440min。结果见图1所示。

图1 三氟乙酸标准离子色谱图

2.4 线性关系、检出限和定量限

配制浓度依次为0、0.1、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0μg／mL的三氟乙酸标准溶液，按照“1.3”的色谱方法将标准溶液注入离子色谱仪，并记录色谱图。以标准溶液浓度为横坐标，色谱峰面积为纵坐标绘制标准曲线。实验结果表明，在0.1～10.0μg／mL范围内，色谱峰面积和浓度呈良好线性关系。线性方程为Y＝0.0799X，r＝0.9997。

取浓度为1.0μg／mL的三氟乙酸标准溶液逐级稀释，按照3倍信噪比（S／N＝3）和10倍信噪比（S／N＝10）分别计算方法的检出限为0.03μg／mL和定量限为0.10μg／mL。

2.5 样品加标回收率试验

取未检出三氟乙酸的样品9份，3份为一组，按照5倍定量限，10倍定量限和50倍定量限的方式，依次加入浓度为10μg／mL的标液0.1mL、0.2mL、1.0mL，加超纯水定容至2mL。将该系列样品依次注入离子色谱仪中，每个样品重复进样6次，计算该方法的精密度和加标回收率。测试结果见表1所示。低、中、高3个浓度水平的平均回收率（n＝6）依次为97.9%、98.5%、98.9%，精密度的 RSD值分别为1.51%、1.18%和1.04%。

2.6 样品检测

分别取3批样品，按照“1.2、1.3”进行样品处理和测试，平行测定2份，结果三批样品中均未检出三氟乙酸残留。

表1 阴性样品中三氟乙酸加标回收率（n＝6）和精密度实验

3 结论

本文建立的离子色谱法检测硫酸头孢噻利中三氟乙酸残留的分析方法，优化了前处理条件和仪器条件，该方法的检出限为0.03μg／mL，可以满足三氟乙酸残留检测的要求。实验结果表明，该方法灵敏度高，准确性好，结果令人满意。可以为监管部门对三氟乙酸残留的监测提供科学依据。

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