气相色谱法检测蔬菜中7种有机磷农药残留

郗艳丽，葛红娟，王长文，樊丽花，刘正阳，马洪波，宋春梅

（吉林医药学院公共卫生学院，吉林吉林132013）

蔬菜是我们日常生活中必不可少的食物之一。蔬菜中富含许多对人体有益的有效成分，常食用蔬菜可以预防慢性、退行性疾病的发生。蔬菜害虫防治的最主要方法是喷洒农药，尤其是有机磷类农药的大量使用，大大降低了病虫害对蔬菜的危害。但同时农药残留问题又成为了一个比较突出的问题。有机磷农药残留已成为影响蔬菜食用安全的一个最主要问题。有机磷农药因其高效性和广谱性而被大量的生产和使用[1]，是目前世界上生产量和使用量最多的一类农药[2]，由此所带来的污染问题也日益突出[3-4]。人体长期摄入有机磷农药可产生蓄积作用，造成机体慢性中毒，甚至会导致癌症，子代发育障碍，甚至畸形，因农药导致的急性中毒事件也屡见不鲜[5-6]。加强有机磷农药残留监测，是保障人群安全的重要措施之一。建立快速稳定的检测体系，对保障蔬菜食用安全更是至关重要。本试验前期调研，筛选了7种最常用的有机磷农药，用气相色谱法检测蔬菜中有机磷农药残留量，建立一种快速检测有机磷农药残留的方法和体系。该方法的稳定性好，灵敏度高。

1 材料与方法

1.1 材料选取

蔬菜于7～8月份购自吉林市3家超市和2家大型农贸市场的早场时间。根据蔬菜的种类分别采购了叶菜类（菠菜、小白菜和韭菜）、果菜类（西红柿、黄瓜、青椒和茄子）以及根菜类（胡萝卜、白萝卜和土豆）共10种。

1.2 仪器与试剂

GC1100气相色谱仪（配有氮磷火焰光度检测器、SPH-300氮气发生器和SPN-300氢气发生器）：北京普析通用仪器有限责任公司；EV311旋转蒸发仪：莱伯泰科公司；HN200多功能氮吹仪：海能仪器股份有限公司；24UV超纯水器：美国Millipore公司；敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、乐果、杀螟松、对硫磷、水胺硫磷：均购自农业部环境保护科研检测所（浓度均为100μg/mL）；乙酸乙酯、无水硫酸钠（分析纯）：山东青岛市正大化学试剂厂。

1.3 方法

1.3.1 气相色谱条件

色谱柱：OV-1701（30 m×0.32 mm×0.25 μm）；升温程序：60℃保持1 min，以30℃/min上升到210℃，保持10 min，再以10℃/min升到240℃，保持6 min。检测器温度为260℃，进样口温度为250℃，不分流。载气为氮气（纯度 99.999%），压力 0.41 MPa，流速 1.20 mL/min，氢气压力0.39 MPa，空气压力0.41 MPa。

1.3.2 农药标准溶液的配置

取各农药标准溶液10 μL于1mL容量瓶中，加丙酮 30 μL，轻轻混匀，制成浓度为 10.00 μg/mL 的混合标准溶液，并逐级稀释成浓度为5.00、2.50、1.00、0.05 μg/mL的混合标准系列。按照“1.2.1”色谱条件进行测定，以峰面积为纵坐标，以标准溶液的浓度为横坐标作图，绘制出标准曲线。

1.3.3 最低检测限

将浓度为0.05 μg/mL的混合标准溶液逐级稀释，进样分析，当检测到的色谱峰高度为噪声高度的3倍（S/N=3）时，其所对应的浓度即为最低检测限，根据公式（1）计算出最低检测含量。

式中：D为农药检出限，mg/kg；N为噪声高度；Q为进样量，μL；I为信号响应值。

1.3.4 样品前处理

将蔬菜可食部分切碎，准确称取10 g置于250 mL碘量瓶中，加入25 mL乙酸乙酯，混匀后室温浸泡2 h，加入0.4 g活性炭脱色至无色，无水硫酸钠脱水，45℃旋转蒸发至2 mL，氮吹至近干，乙酸乙酯定容至5 mL，气相色谱仪测定，进样体积1 μL。

1.3.5 加标回收率

称取10 g切碎蔬菜置于碘量瓶中，分别添加1.0 μg/mL和5.0 μg/mL混合标准溶液，按样品前处理的方法提取，每个样品重复测定5次，计算回收率和相对标准偏差（RSD）。

1.4 样品的测定及数据处理

样品经0.45 μm的微孔滤膜过滤后，进样1 μL测定。测得样品中农药的峰面积，按照公式（2）计算样品中农药的含量。

式中：Xi为样品中有机磷农药 i含量，mg/kg；Ai为样品中有机磷农药i的峰面积，μV·S；Ci为样品提取液中的有机磷农药的浓度，μg/mL；V为浓缩后动容的体积，mL；m为用于提取的样品的量，g；Ais为混合标准溶液中有机磷农药i的峰面积，μV·S；Cis为混合标准溶液中有机磷农药i的浓度，μg/mL。

1.5 国家标准农药最大残留限量（MRLs）

国家标准规定蔬菜中各种农药最大残留限量见表1（摘自GB 2763-2014《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》）。

表1 国标规定蔬菜中各种农药的最大残留限量（MRLs）Table 1 The standard of maximum residue limits for pesticides in vegetables mg/kg

2 结果与分析

2.1 标准曲线及检出限

在设定的气相条件下测定标准系列溶液，得到7种农药的标准曲线，见图1。回归方程、相关系数及最低检出浓度结果见表2。

图1 气相色谱法检测7种有机磷农药标准品色谱图Fig.1 Determination of seven organophosphorus standard samples for pesticide by gas chromatography

表2 气相色谱法检测蔬菜中7种有机磷农药的标准曲线和检出限Table 2 Determination of standard curve and detection limit of seven organophosphorus pesticide residues in vegetables by gas chromatography

7 种有机磷农药在 0.05 μg/mL～10.00 μg/mL 的浓度范围内线性关系良好，线性相关系数为0.986～0.999。最低检出浓度为 0.02 μg/mL～0.05 μg/mL，最低检出含量为0.01 mg/kg～0.025 mg/kg。

2.2 加标回收率

按照气相检测条件，分别检测1.0μg/mL和5.0μg/mL 2个浓度的加标回收率。在相同条件下，对标准品溶液连续进样5次，测定封面积，计算相对标准偏差（RSD），结果见表3。

当标准品浓度为1.0 μg/mL时的加标回收率为71%～86%，RSD在5.8%～16.0%范围之间；标准品浓度为5.0 μg/mL时的加标回收率为92%～96%，RSD在1.4%～5.0%范围内。本试验所采取的样品前处理方法准确度，仪器的精密度良好，能够满足后续检测的需要。

表3 气相色谱法检测蔬菜中7种有机磷农药的加标回收率（±s，n=5）Table 3 Determination of recovery rate of seven organophosphorus pesticide residues in vegetables by gas chromatography

表3 气相色谱法检测蔬菜中7种有机磷农药的加标回收率（±s，n=5）Table 3 Determination of recovery rate of seven organophosphorus pesticide residues in vegetables by gas chromatography

农药 1.0 μg/mL 5.0 μg/mL测定值/（μg/mL）回收率/%RSD/%测定值/（μg/mL）回收率/%RSD/%敌敌畏 0.71±0.32 71 12.7 4.62±0.32 92 5.0甲胺磷 0.77±0.11 77 14.3 4.74±0.13 95 2.7乙酰甲胺磷 0.72±0.09 72 12.5 4.74±0.13 95 2.7乐果 0.75±0.12 75 16.0 4.74±0.13 95 2.7杀螟松 0.86±0.05 86 6.1 4.82±0.07 96 1.4对硫磷 0.82±0.07 82 8.5 4.69±0.08 94 1.7水胺硫磷 0.86±0.05 86 5.8 4.71±0.11 94 2.3

2.3 蔬菜的检测结果

将本方法用于吉林市市售蔬菜的检测，样品检测均未超过国家标准。该方法操作简单，提高了工作效率，可用于大量样品的分析检测。

3 结论

本研究利用气相色谱建立了蔬菜中7种有机磷农药同时检测的方法，通过对不同来源蔬菜的检测，验证了该检测方法的实用性。该方法简单，试剂使用量少，成本低廉，灵敏度和准确度高，检测速度快，能满足农药快速筛查的需要。

[1] 汪娌娜,徐军.气相色谱法测定蔬菜中15种有机磷农药残留[J].中国卫生检验杂志,2009,19(1):63-65

[2] 吴福中,王锦海,刘志红,等.气相色谱法测定蔬菜中7种残留有机磷农药[J].中国农学通报,2009,25(19):59-61

[3] 汪雅谷,张四荣.无污染蔬菜生产的理论与实践[M].北京:中国农业出版社,2001:13

[4] 葛晓光,张智敏.绿色蔬菜生产[M].北京:中国农业出版社,1997:54

[5] 徐彬.400例口服有机磷农药中毒抢救分析[J].中国卫生标准管理,2015,6(1):108-110

[6]杨伟红.急性有机磷农药中毒早期血药浓度与CD分子的相关性及临床意义[J].临床急诊杂志,2015,16(1):50-53