厚朴散与香薷散TLC鉴别中展开系统的改进研究

吴 兰，李金超，巩忠福，赵彦岭

（1.河北省兽药监察所，石家庄050035；2.中国兽医药品监察所，北京100081）

厚朴散与香薷散TLC鉴别中展开系统的改进研究

吴 兰1，李金超1，巩忠福2，赵彦岭1

（1.河北省兽药监察所，石家庄050035；2.中国兽医药品监察所，北京100081）

为了研究厚朴散和香薷散现行质量标准中含苯展开剂的替代方法，分别以三氯甲烷－乙酸乙酯（10∶1）和环己烷－乙酸乙酯－异丙醇－甲醇－水－三乙胺（3∶3.5∶1∶1.5∶0.5∶1）为展开剂，开展对厚朴散中厚朴和香薷散中黄连的薄层色谱鉴别试验。结果表明，经改进后的薄层色谱方法斑点清晰，分离效果良好，专属性强，可避免毒性试剂苯对检验人员及环境的危害。

苯；厚朴散；香薷散；TLC

厚朴散与香薷散是收载于《中华人民共和国兽药典》（二○一○年版二部）［1］（以下简称《中国兽药典》）的两个成方制剂。在现行质量标准中，厚朴散中厚朴和香薷散中黄连的薄层色谱鉴别均采用了含苯的展开系统。按照国际癌症组织（IARC）对化学物质致癌性的分级，苯为一类致癌物，即确认人类致癌物［2］。据文献报道，长期接触低浓度苯及苯系物可引起慢性中毒，苯及苯系物的慢性毒性和职业危害主要体现在骨髓造血功能的损害、女性生殖机能的损害、致癌作用、神经系统的改变、发育毒性和刺激皮肤黏膜等［3－5］，苯对环境也有较大危害［6］。本研究试图建立更加环保的展开系统，以替换厚朴散和香薷散现行质量标准中厚朴和黄连薄层色谱鉴别的含苯展开系统。

1 材料

1.1 仪器 Linomat5半自动点样仪，ADC2自动展开仪和TLC Visualizer薄层色谱成像系统均为瑞士卡玛公司生产；硅胶GF254薄层板和硅胶G薄层板，100 mm×200 mm，厚度0.20～0.25 mm，均为青岛海洋化工厂分厂生产；甲醇、三氯甲烷、甲苯、乙酸乙酯、环己烷、异丙醇和三乙胺等试剂均为分析纯。

1.2 试剂与药品 厚朴酚对照品（批号110729－200411），厚朴酚对照品（批号110730－201011），盐酸小檗碱对照品（批号110713－200911），黄连（三角叶黄连）对照药材（批号120913－201109）均由中国食品药品检定研究院提供。

厚朴散样品4批（自配及3批企业产品），香薷散样品7批（自配及6批企业产品），各阴性对照样品（自配），自配样品所用原药材均购于石家庄神威大药房。

2 方法与结果

2.1 厚朴散中厚朴的薄层色谱鉴别

2.1.1 供试品溶液的制备 取厚朴散样品4 g，加甲醇20 mL，浸渍15 min，时时振摇，滤过，滤液浓缩至约5 mL，作为供试品溶液。

2.1.2 对照品溶液的制备 取厚朴酚对照品与和厚朴酚对照品，加甲醇制成每1 mL各含有1 mg的混合溶液，作为对照品溶液。

2.1.3 厚朴阴性对照溶液的制备 取缺厚朴的“厚朴散”阴性对照样品，照2.1.1项下的方法，制成阴性对照溶液。

2.1.4 薄层鉴别 吸取上述三种溶液各5 μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷－乙酸乙酯（10∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254 nm）下检视，观察结果。

2.1.5 结果 色谱分离效果良好，斑点清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的两个斑点。厚朴阴性对照无干扰，方法具专属性。图谱见图1。

2.2 香薷散中黄连的薄层色谱鉴别

图1 厚朴的薄层色谱鉴别结果

2.2.1 供试品溶液的制备 取香薷散样品2 g，加甲醇20 mL，超声处理15 min，滤过，滤液作为供试品溶液。

2.2.2 对照药材溶液的制备 取黄连对照药材0.2 g，照2.2.1项下的方法，制成对照药材溶液。

2.2.3 对照品溶液的制备 取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。

2.2.4 黄连阴性对照溶液的制备 取缺黄连的“香薷散”阴性对照样品，照2.2.1项下的方法，制成阴性对照溶液。

2.2.5 薄层鉴别 吸取上述四种溶液各2 μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以环己烷－乙酸乙酯－异丙醇－甲醇－水－三乙胺（3∶3.5∶1∶1.5∶0.5∶1）为展开剂，置用浓氨溶液和展开剂同时饱和30 min的展开缸内，展开，取出，晾干。置紫外光灯（365 nm）下检视，观察结果。

2.2.6 结果 色谱分离效果良好，斑点清晰；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。黄连阴性对照无干扰，方法具专属性，图谱见图2。

图2 黄连的薄层色谱鉴别结果

3 讨论

《中国兽药典》厚朴散中厚朴与香薷散中黄连的TLC鉴别采用的展开剂中均含有毒性较大的试剂苯，本试验研究改变了展开剂的种类和配比，使用毒性较小的试剂替代了苯，与现行质量标准比较，分离效果更佳，斑点更清晰，且避免了毒性试剂苯对检验人员及环境的危害。

厚朴的薄层色谱鉴别在《中国兽药典》收载的药材厚朴和其他含厚朴的制剂［1］中及国内现有文献报道中，使用的展开剂有含苯［7－9］和不含苯［10－12］两类。在以含苯的溶剂系统为展开剂的方法中，使用的薄层板有硅胶GF254板和硅胶G板两种，而在以不含苯的溶剂系统为展开剂的方法中，使用的均是硅胶G薄层板；两种方法中，使用硅胶G薄层板的在展开后均需喷以1%香草醛硫酸溶液加热显色，操作较繁琐，且香草醛硫酸溶液的腐蚀性和刺激性较强。新建立的方法采用不含苯的展开系统，以“三氯甲烷－乙酸乙酯（10∶1）”为展开剂，使用硅胶 GF254薄层板，展开后直接置紫外光灯（254 nm）下检视，不需喷显色剂，操作更简便，效果良好。

在厚朴的薄层色谱鉴别试验中，曾用不同的展开剂做了筛选试验，分别考察了甲苯－甲醇（17∶1）、三氯甲烷－甲苯－乙酸乙酯（5∶4∶1）两种展开系统，结果表明阴性有干扰，专属性差，方法不可行，均未采用。

黄连的薄层色谱鉴别在《中国兽药典》收载的药材黄连［1］中采用不含苯的展开系统，而在含黄连的制剂［1］中仍采用含苯的展开系统。本试验对香薷散中的黄连采用黄连药材的方法进行了研究试验，以不含苯的“环己烷－乙酸乙酯－异丙醇－甲醇－水－三乙胺（3∶3.5∶1∶1.5∶0.5∶1）”为展开剂，与现行质量标准比较，分离效果更佳，斑点更清晰。

在黄连的薄层色谱鉴别试验中，对展开缸只用浓氨溶液饱和30 min及用浓氨溶液和展开剂同时饱和30 min进行了对比，结果表明用浓氨溶液和展开剂同时饱和30 min分离效果更佳。

薄层色谱鉴别法是中药检测中不可缺少的重要手段，而在薄层色谱鉴别中不可避免的要使用到多种有机溶剂，其中常用的有机溶剂以苯的毒性最大，长期接触对检验人员的身体健康势必会造成伤害，同时也会对环境造成危害，因此选用低毒的有机溶剂进行检测，把对人员及环境的危害尽可能的控制到最低限度，是今后制定新的检测标准时必须要考虑的首要问题，同时建议对现有兽药制剂标准的TLC鉴别法中含有苯的展开系统开展替代研究。

［1］中国兽药典委员会.中华人民共和国兽药典二○一○年版二部［S］.

［2］中华人民共和国卫生部.中华人民共和国国家职业卫生标准GBZ2.1－2007［S］.

［3］赵 霞，贾 光，李秋荣，等.北京市某区苯及苯系物作业女工健康状况调查分析［J］.慢性病学杂志，2014，15（3）：167－170.

［4］张 千，纪 琴，魏 星，等.职业性苯及苯系物暴露对男性作业人员血常规的影响［J］.职业与健康，2013，29（21）：2785－2787.

［5］罗 洁.1968例接触低浓度苯及苯系物作业工人的疾病谱分析［J］.医学动物防制，2012，28（8）：901－903，906

［6］安正阳，范红俊，李振青.有毒可燃液体－苯及其同系物应急救援过程中的环境保护［J］.科技资讯，2010（01）：139－140.

［7］崔晓丽，何小东，许立峰.木香顺气丸中木香及厚朴定性鉴别［J］.中成药，2002，24（5）：398－399.

［8］官福森，门 婧.霍香正气片中厚朴的薄层色谱鉴别方法的改进［J］.黑龙江医药科学，2001，24（3）：87.

［9］刘红宇，李 宏.理气颗粒剂的薄层色谱鉴别［J］.湖南中医学院学报，2000，20（4）：32－33.

［10］赵纯玉，饶伟文，覃 晓.厚朴等药材TLC条件的优选试验［J］.首都医药，2011，06（下）：54－55.

［11］苏莱曼·哈力克，李 莉，刘晓芳，等.胃尔宁片质量标准的研究［J］.中草药，1996，27（7）：400－402.

［12］王联政，吴子航，赵长发.厚朴及其伪品的薄层鉴别［J］.佳木斯医学院学报，1992，15（3）：58.

（编 辑：陈 希）

Study on Improvement of TLC Development System in Powders of Houpo San and Xiangru San

WU Lan1，LI Jin－chao1，GONG Zhong－fu2，ZHAO Yan－ling1
（1.Hebei Provincial Institute of Supervision for Veterinary Drug，Shijiazhuang050035，China；2.China Institute of Veterinary Drug Control，Beijing100081，China）

In order to investigate the method to substitute development system including benzene for thin layer chromatography in current standards of Houpo San and Xiangru San，experiments of thin layer chromatography for officinal magnolia bark in Houpo San and golden thread in Xiangru San were conducted with mixtures of chloroform－ethyl acetate（10∶1） and cyclohexane－ethyl acetate－isopropyl alcohol－methanol－watertriethylamine（3∶3.5∶1∶1.5∶0.5∶1）as development systems，respectively.The results showed that the improved TLC method is not only feasible with clear spots，effective separation and good specificity，but also protecting of exposed persons and environment from harm of benzene.

benzene；Houpo San；Xiangrusan；TLC

2014－12－31

A

1002－1280（2015）04－0021－03

S853.7

吴 兰，高级工程师，从事兽药检测工作。E－mail：wllx643＠126.com