垫料管理对毒害艾美耳球虫疫苗虫株免疫效果的影响

王文莉刘丽丹廖贵城吴松明唐建红谭志坚翁亚彪

（1.佛山市正典生物技术有限公司，广东佛山528138；2.华南农业大学兽医学院，广州510642）

垫料管理对毒害艾美耳球虫疫苗虫株免疫效果的影响

王文莉1，刘丽丹1，廖贵城1，吴松明1，唐建红1，谭志坚1，翁亚彪1，2∗

（1.佛山市正典生物技术有限公司，广东佛山528138；2.华南农业大学兽医学院，广州510642）

为比较垫料管理对毒害艾美耳球虫疫苗虫株免疫效果的影响，采用谷壳和木屑为垫料，垫料厚度分别为1、2、4 cm，以及定期翻动垫料和不翻动垫料的管理方式对疫苗反应期鸡肠道病变程度和相对增重的影响，以及对攻虫后鸡肠道病变程度、相对增重和免疫保护效果的影响。在疫苗反应期，各免疫组的肠道病变轻微，相对增重与空白对照组无显著差异（P＞0.05）；免疫21 d后攻虫，所有免疫组均能抵抗1×105个毒害艾美耳球虫强毒孢子化卵囊的攻击，而且肠道病变轻微，相对增重与空白对照组无显著差异（P＞0.05）。试验结果表明，厚垫料可提高毒害艾美耳球虫的免疫均匀性，免疫效果稍优于薄垫料。

垫料管理；毒害艾美耳球虫；疫苗虫株；免疫效果

鸡球虫病（chicken coccidiosis）是由一种或多种艾美耳球虫（Eimeria）寄生于鸡肠道黏膜上皮细胞而引起的以肠炎、腹泻、生长迟缓、饲料转化率下降和死亡为特征的流行性疾病。鸡球虫病每年给全球带来的经济损失有30多亿美元，而给我国造成的经济损失高达25亿元人民币［1］。在鸡艾美耳球虫7个种中，毒害艾美耳球虫（Eimeria necatrix）具有较强的致病力，主要侵害小肠中段，引起急性的小肠球虫病，影响营养物质的吸收并易引起继发性坏死肠炎［2］。当自然感染条件下，毒害艾美耳球虫可造成超过25%死亡率 ，当在试验感染时死亡率可达100%［3］。

目前，鸡球虫病以药物防治为主，在饲料中连续添加预防性抗球虫药物是养鸡业中普遍采用的方法［4］。但球虫对几乎所有的抗球虫药物都能产生抗药性，且往往表现多重抗药和交叉抗药，同时药物还能影响鸡只生长、增加了饲养成本，也造成鸡肉、蛋的药物残留［5－6］。因此，使用球虫疫苗不仅可避免因使用抗球虫药物造成的药物残留，还能克服使用化学药物成本高、用药时间长、易产生抗药性等弊端［7］。

球虫疫苗免疫后的垫料管理是球虫免疫成功的关键因素，鸡群接种球虫疫苗后，球虫卵囊随粪便排出到垫料上，创造适宜疫苗子代卵囊孢子化条件，让鸡群经受适度的重复感染，从而顺利地实现“二免三免”，对鸡群建立坚强的免疫力极为重要。有鉴于此，使用球虫病疫苗免疫预防球虫病时，对垫料的种类、湿度和更换有一些特殊要求［8］。为此，本试验根据不同的垫料管理方式，对免疫接种毒害艾美耳球虫疫苗虫株后的免疫效果进行了研究。

1 材料与方法

1.1 材料 毒害艾美耳球虫早熟系虫株（鸡球虫病活疫苗疫苗虫株），毒害艾美耳球虫强毒株，均由佛山市正典生物技术有限公司提供。

1.2 试验动物 1日龄岭南黄鸡600羽：购自广东省农业科学院畜牧研究所种鸡场。

1.3 分组与处理 将600羽无球虫感染岭南黄鸡随机分成6组，每组100羽，第一组为空白对照组，置于以2 cm谷壳为垫料地上平养；第二组为免疫组1，置于以1 cm木屑为垫料地上平养；第三组为免疫组2，置于以2 cm谷壳为垫料地上平养；第四组为免疫组3，置于以4 cm谷壳为垫料地上平养；第五组为免疫组4，置于以2 cm谷壳为垫料地上平养；第六组为免疫组5，置于以4 cm谷壳为垫料地上平养；第五、六组于免疫后7、8、9 d每天翻动垫料。将各试验组隔离饲养于检验动物舍，饲喂无添加抗球虫药物和抗生素的全价饲料，饮水为洁净饮用水。各试验组无球虫感染岭南黄鸡于3日龄经口接种300个／羽毒害艾美耳球虫早熟虫株。试验分组及处理见表1。在开放条件下的鸡舍中（模拟国内养鸡大生产环境），免疫后21 d，各试验组分别取10羽鸡口服攻击1×105个毒害艾美耳球虫强毒孢子化卵囊，攻虫后观察5～7 d，记录各组鸡的粪便、精神状况和饮食欲，第7天各试验组全部称重，但未对每只鸡进行称重；攻虫后剖检每只鸡的肠道，记录病变记分。

在免疫后13 d（疫苗反应期），将免疫组和所有空白鸡进行称重，但未对每只鸡进行称重；并在免疫后的13 d～16 d（疫苗反应期），每天随机抽取4只鸡剖检肠道，观察小肠中段病变情况。

表1 试验分组及处理表

1.4 评价指标 对试验组免疫的临床状况，肠道病变记分和内容物，鸡群增重情况，免疫保护效果等各项指标进行观察和评价［9］。利用SPSS 18.0数理统计软件对两个试验之间相对增重和肠道病变记分的差异性进行比较。

2 结果

2.1 临床状况观察 在免疫后第13～16天，免疫组出现少量饲料样粪便，鸡群精神状态良好，饮食正常，剖检肠道病变轻微，均无出现因鸡球虫病临床症状而引起的死亡。攻虫后6 d，阳性组鸡只饮食欲明显下降，乃至废绝，精神极度沉郁，缩颈闭目，呆立一隅，羽毛逆立；粪便不成形，呈酱油色粘稠状。免疫组鸡只精神良好，有正常饮食，无明显临床发病症状，其中免疫组1、免疫组4鸡粪便出现2～8堆番茄粪，免疫组2、免疫组3、免疫组4鸡粪便正常，粪便。

2.2 疫苗反应期增重情况 在免疫后第13～16天，不同垫料、不同厚度谷壳作为垫料以及翻动垫料与不翻动垫料方法对试验鸡增重的影响结果见表2。增重结果可见，各试验组免疫接种前的平均增重相近，免疫后3 d，以木屑、谷壳作为两种不同垫料的免疫组1、免疫组2与空白对照组相对增重率分别为98.4%、96.7%；分别以2、4 cm不同厚度谷壳作为垫料的免疫组2、免疫组3鸡相对增重分别为96.7%、97.5%；翻动垫料、不翻动垫料的免疫组4、免疫组5鸡相对增重分别为97.2%、96.4%。

表2 免疫后第13天试验鸡增重情况表

2.3 疫苗反应期间肠道病变记分 不同垫料、不同厚度谷壳作为垫料以及翻动垫料与不翻动垫料方法疫苗反应期间肠道病变记分结果见表3。从表3疫苗反应期间肠道病变记分可见：免疫后第13～16天，免疫组1的小肠中段病变记分分别为0.63、0.83、0.50、0.28；免疫组2的小肠中段病变记分分别为0.43、0.50、0.50、0.00；免疫组3的小肠中段病变记分分别为0.43、0.50、0.50、0.00；免疫组4的小肠中段病变记分分别为0.50、0.50、0.30、0.00；免疫组5的小肠中段病变记分分别为0.30、0.28、0.50、0.00；所有免疫组鸡小肠中段平均病变记分均小于1.0分。

江西省对一些地方官员“新官不理旧事”现象也敲响了警钟。记者在江西采访时也对当地的举措进行了初步了解。时任江西省鹰潭市委书记陈兴超（现任江西省委常委、统战部部长）曾在该市市委七届九次全会上如是说：“如果我们的政策朝令夕改，甚至是说一套做一套，就不可能招得到商、引得到资。为此，要在积极构建社会诚信体系的同时，更要建设诚信政府，坚决杜绝政府出现不兑现承诺、‘新官不理旧事’等行为，始终做到‘言必信、行必果’。”

表3 疫苗反应期间小肠中段平均病变记分表 （n＝4）

2.4 攻虫免疫保护效果 免疫后第21天，使用毒害艾美耳球虫强毒株攻虫。攻虫后6 d，发现所有免疫组均能耐受强毒株的攻击，详细增重情况、病变记分和死亡率如表4所示。阳性组平均增重为106.8g，相对增重率为47.9%，粪便记分3.5分，小肠中段平均病变记分3.2分，死亡率为10%。所有免疫组的相对增重范围93.7%～95.5%，粪便记分除免疫组1为0.5，其他均为0分；小肠中段病变记分范围为0～2分，平均病变记分范围为0～ 1.2分，免疫组无鸡只死亡。免疫组鸡攻虫后小肠中段病变记分明显低于阳性对照组，阳性对照组鸡剖检可见小肠浆膜面布满红色出血点和白色斑点，肠腔中含有多量的血凝块和坏死脱落的黏膜组织，肠黏膜面粗糙，肠壁增厚；免疫组攻虫后的增重、粪便记分及病变记分等指标均优于阳性对照组。因此，本试验结果表明免疫21 d后，免疫组均能抵抗1×105个毒害艾美耳球虫强毒孢子化卵囊。

表4 免疫后21 d攻虫后增重，粪便记分，小肠中段变记分，以及鸡死亡率

3 讨论与分析

3.1 垫料管理对鸡增重的影响 从实验结果可知：通过以木屑与谷壳作为垫料，2、4 cm不同厚度谷壳为垫料以及翻动垫料与不翻动垫料的方法，对鸡的平均增重和相对增重率均无影响；这与黎观红［10］报道结果一致。有研究表明：不同厚度的垫料2.0、3.0、4.0、5.0 cm对肉鸡的生产性能影响不显著［11－12］。

3.2 疫苗反应期间肠道病变情况 于免疫后足13～16 d疫苗反应期，各免疫组鸡群精神状态良好，饮食正常，均无出现因鸡球虫病临床症状而引起的死亡，剖检肠道病变轻微，免疫组鸡盲肠、小肠中段、十二指肠的平均病变记分均小于1.0分。由数据可说明：不同垫料、不同厚度谷壳作为垫料以及翻动垫料与不翻动垫料方法对免疫接种鸡群疫苗反应期间肠道损伤均无显著差异，不会加重疫苗反应，具有良好的安全性。

3.3 免疫保护效果 使用球虫病疫苗免疫预防球虫病，需要通过创造适宜疫苗子代卵囊孢子化的条件，对垫料的种类、湿度和更换作特殊要求，让鸡群经受适度的重复感染，对鸡群建立坚强的免疫力极为重要，孔庆飞等［8］对这方面曾作过报道。从试验结果可以看出，不同种类的垫料、不同厚度的垫料以及翻动与不翻动垫料方法均能使鸡群产生抗球虫免疫保护力，而且厚垫料更有助于提高毒害艾美耳球虫的免疫保护效果。

从球虫免疫力形成的过程分析，鸡群接种球虫疫苗后，球虫通过鸡体内发育繁殖排泄出子代卵囊累积于垫料中，免疫力建立关键在于垫料中累积的卵囊，在适宜的温、湿度条件下发育为具有感染力的孢子化卵囊，鸡群通过自然感染这些孢子化卵囊，使球虫免疫力得以强化，经过2～3次循环感染，逐渐形成比较坚强的免疫力［13］。当卵囊循环量不足，免疫鸡群没有获得更均匀地重复循环感染，导致免疫保护均匀性不一致。厚垫料对球虫免疫力建立和均匀性优于薄垫料，主要由于厚垫料不易潮湿、板结，有利于卵囊均匀分布；由于毒害艾美耳球虫在盲肠内形成卵囊，且卵囊主要分布于盲肠粪中，而鸡每天盲肠粪排泄数量较少。因此，厚垫料有利于盲肠粪中的卵囊充分混合稀释和翻动，从而均匀分布各个角落，为鸡群获得均匀的重复感染创造条件。

4 结论

由毒害艾美耳球虫引起的鸡球虫病，是目前禽养殖场中发病高，危害严重的疾病之一，而且该虫种生活史和卵囊排泄规律较其他几个虫株均特殊。从免疫效果来看，厚垫料可提高毒害艾美耳球虫的免疫均匀性，综合效果也稍优于薄垫料。因此，养殖场在使用含有毒害艾美耳球虫虫种的疫苗时，尽量铺上厚垫料（4 cm厚度或以上较合适），同时还要保持垫料干爽，防止垫料过于潮湿或板结。

［1］翁亚彪.鸡球虫病疫苗应用前景［J］.养禽与禽病防治，2009（01）：2－3.

［3］张龙现，蒋金书，刘 群，等.毒害艾美耳球虫纯种卵囊收集鉴定及致病性测定［J］.中国兽医杂志，2001，09：12－13.

［4］王学红，梁剑平，刘 宇，等.鸡抗球虫药物的种类及应用［J］.中国家禽，2011，32（15）：48－51.

［5］杨 娜，曾明华，吴丽君，等.三种抗球虫药对鸡球虫病的对比疗效［J］.中国兽药杂志，2012，02：16－18.

［6］Chapman H D.The Use of Enzyme Electrophoresis for the Identi⁃fication of the Species ofEimeriaPresent in Field Isolates of Coc⁃cidia［J］.Parasitology，1982，85（Pt 3）：437－442.

［7］赵立香，李荣权.鸡球虫疫苗研究进展［J］.养禽与禽病防治，2009（12）：2－3.

［8］孔庆飞，翁亚彪，林绮萍，等.鸡球虫病疫苗研究简况及其在肉鸡生产上的应用前景［J］.养禽与禽病防治，2005（11）：7－9.

［9］闫鸿斌，贾万忠，田广孚，等.四价鸡球虫苗的免疫效果研究［J］.中国预防兽医学报，2009，3（31）：236－240.

［10］黎观红.不同垫料对肉鸡生产性能的影响及垫料肥值的评价［J］.江西畜牧兽医杂志，2004（01）：40－41.

［11］Haque M I，Chowdhury S D.Use of rice husk litter at different depths for broiler chicks during summer［J］.Br Poult Sci，1994，35（5）：809－812.

［12］Anisuzzaman M，Chowdhury S D.Use of four types of litter for rearing broilers［J］.Br Poult Sci，1996，37（3）：541－545.

［13］段嘉树.鸡球虫病免疫：Ⅰ.球虫病特点和免疫原理［J］.中国动物保健，2004，4：7－12.

（编 辑：陈 希）

Vaccines Strains ofEimeria necatrixImmunization Effects Affected by Padding Management

WANG Wen－li1，LIU Li－dan1，LIAO Gui－cheng1，WU Song－ming1，TANG Jian－hong1，TAN Zhi－jian1，WENG Ya－biao1，2∗
（1.Foshan Standard Biotech Co.，Ltd，Foshan，Guangdong528138，China；2.College of Veterinary Medicine，South China Agricultural University，Guangzhou510624，China）

In the present study，different kinds of padding，different depth of padding and different padding management may affectE.necatriximmunization effects.During vaccine reaction period，intestinal lesions of immunization groups were slight，and there was no significant difference of weight gain between immunization groups and negative control group（P＞0.05）.On 6thday after 21 d immunization，all chickens in immunization group could produce good protection against the challenge of 1.0×105high virulenceE.necatrixoocysts.Besides，intestinal lesions of immunization groups were slight，and there was no significant difference of weight gain between immunization groups and negative control group（P＞0.05）.Results showed that thickness padding could improve the uniformities of immunity ofE.necatrix，and immunization effects in thickness padding group were better than that of thin padding group.

padding management；Eimeria necatrix；vaccine strain；immunization effects

2014－10－16

A

1002－1280（2015）01－0024－05

S855.9

鸡球虫病药敏虫株七价活疫苗的研制及其应用研究（2011C01）

王文莉，硕士研究生，从事兽医寄生虫研究。

翁亚彪。E－mail：ybweng＠qq.com