乙型肝炎表面抗原定量与原发性肝癌的相关性研究

程晓光 张振华 王长泰 俞 舒 李 旭

·临床医学·

乙型肝炎表面抗原定量与原发性肝癌的相关性研究

程晓光 张振华 王长泰 俞 舒 李 旭

目的 比较慢性乙型肝炎(CHB)与HBV相关性原发性肝癌患者中乙肝表面抗原(HBsAg)和HBV DNA 载量情况。方法 采用化学发光法检测403例CHB及肝细胞肝癌(HCC)患者血清乙型肝炎病毒标志物滴度，采用荧光定量PCR技术检测患者血清HBV DNA载量。403例患者按照临床诊断分为CHB组(209例)和HCC组(194例)。结果 CHB组:血清HBsAg 滴度≥250 IU/mL 者占89.00%; HBV DNA≥1 000 copies /mL 者占88.40%。HCC 组: 血清HBsAg 滴度≥250 IU/mL 者占79.90%; HBV DNA≥1 000 copies /mL 者占67.70%。两组HBsAg≥250 IU/mL患者的比例差异、HBV DNA≥1 000 copies/mL 患者的比例差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 与CHB相比，HBV相关性原发性肝癌患者HBsAg、HBV DNA载量较低。

乙型肝炎表面抗原；慢性乙型肝炎；原发性肝癌；HBV-DNA载量

原发性肝癌是常见的恶性肿瘤之一，在我国的恶性肿瘤死亡顺位中仅次于胃癌、食管癌[1]。在中国,90%以上的原发性肝癌为肝细胞肝癌(hepa tocellular carcinoma,HCC)。乙型肝炎病史是我国原发性肝癌最主要的病原学因素[2]。乙肝表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)是用于检测患者长期预后的重要生物学指标[3，4]。为进一步了解HBsAg和HCC之间的关系，我院对403例CHB患者及乙肝相关性HCC患者HBsAg和HBV DNA载量进行了相关检测分析，以探讨 HBsAg与HBV DNA在乙肝相关的HCC发生、发展中的变化，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取安徽医科大学第一附属医院感染科2013年2月至 2014年5月经临床确诊的慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)与HCC患者403例，其中男性334例，女性69例，年龄15～82岁，平均45.45岁。按照临床诊断分为CHB组和HCC组，所有患者之前均未行有效抗病毒治疗，且于我院行乙肝五项定量检查示HBsAg阳性。CHB组患者209例，其中男性164例，女性45例，年龄15～80岁，平均36.95岁，诊断标准符合《慢性乙型肝炎防治指南》[5]。HCC组患者194例， 男性170例，女性24例，年龄21～82岁，平均54.60岁，诊断均符合2001年9月第八届全国肝癌学术会议上由中国抗癌协会肝癌专业委员会所修订出的《原发性肝癌的临床诊断与分期标准》所规定的标准[6]。所有病例均排除了自身免疫性肝病、血吸虫病、胃肠道疾病等相关疾病的干扰。

1.2 试剂与仪器 乙肝五项定量采用德国罗氏公司提供的Cobas 6000全自动分析仪测定，试剂由罗氏公司提供；HBV DNA载量水平的测定由上海之江有限公司提供的仪器和试剂测定。

1.3 方法与结果判定 以患者第1次入院确诊时检测的血清HBV DNA 及乙肝五项定量时的指标为研究指标。 所有患者HBsAg定量均为阳性(>0.05 IU/mL)，并且以HBsAg≥250 IU/mL为高滴度状态，同时HBV DNA≥1 000 copies/mL为阳性。 1.4 统计学方法 采用SPSS 17.0进行统计分析，计数资料以百分比表示，统计分析采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者HBsAg 滴度比较 CHB组中，HBsAg≥250 IU/mL 患者186例，占89.00%；HCC组中，HBsAg≥250 IU/mL患者155例，占79.90%。CHB组与HCC组比较，HBsAg≥250 IU/mL和HBsAg<250 IU/mL的患者比例差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 两组患者中HBsAg 滴度比较[例(%)]

2.2 两组患者与HBsAg滴度状态相关指标比较 CHB组HBsAg≥250 U/mL 的患者中，HBeAg阳性112例，HBV DNA阳性169例，抗-HBe阳性81例，与HBsAg<250 U/mL患者HBeAg、HBV DNA、抗-HBe阳性比较，差异有统计学意义(P<0.05)。HCC组HBsAg≥250 U/mL 患者中，HBeAg阳性42例，HBV DNA阳性110例，抗-HBe阳性104例，与HBsAg<250 U/mL患者HBeAg阳性、HBV DNA阳性、抗-HBe阳性比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。

表2 两组患者与HBsAg滴度状态相关指标结果比较(例)

2.3 两组患者乙肝相关标志物阳性病例比较 CHB组中，HBV DNA≥10 000 copies/mL的患者163例，HBV DNA≥1 000 copies/mL的患者183例，HBeAg阳性118例，抗-HBe阳性101例；HCC组中，HBV DNA≥10 000 copies/mL的患者95例，HBV DNA≥1 000 copies/mL的患者130例，HBeAg阳性47例，抗-HBe阳性137例。CHB组与HCC组患者HBV DNA≥10 000 copies/mL、HBV DNA≥1 000 copies/mL、HBeAg阳性、抗-HBe阳性患者数进行比较，差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

3 讨论

宿主感染HBV后临床经过可分为免疫耐受期、免疫清除期、低水平复制期及再活动期[7]。HBsAg滴度水平在免疫耐受期最高，低水平复制期时最低，尤其低水平复制期HBsAg滴度水平明显低于免疫耐受期、免疫清除期[8]。裴彦祯等[9]认为HBsAg滴度水平在CHB、HCC患者中逐渐降低，且与HBV DNA载量的水平呈正相关性。本研究发现，与CHB相比，HCC患者HBsAg和HBV DNA载量较低，而且在未抗病毒的情况下，高达32.99%的患者HBV DNA阴性，20.10%患者HBsAg<250 IU/L，比CHB患者高1倍。HBsAg滴度水平在免疫耐受期最高，其后开始逐渐下降[10]，可能有以下两点原因：病毒复制的宿主是正常的肝脏细胞，而随着肝脏炎症活动的反复进行，越来越多的肝脏细胞会受到损害，发展到肝癌阶段时，已有很多的肝脏组织及细胞受损，再加上肿瘤细胞的侵袭，使得肝脏细胞的数量进一步减少，因为宿主数量的明显减少，直接地影响了病毒复制的频率，从而降低了HBsAg的水平；在免疫清除期阶段，病毒复制及肝脏炎症活动一直在反复在发生，而这一长期的刺激过程可促进肝脏本身纤维化的加重形成肝硬化，甚至可以引发正常细胞及组织发生突变从而变成肝癌。

表3 两组患者乙肝相关标志物阳性病例比较[例(%)]

本研究发现CHB组中HBsAg滴度和HBV DNA载量有关，而且HBsAg滴度高者，HBeAg阳性率也明显升高，在HCC组似乎也有这种趋势，但是差异不显著，推测可能受到了年龄、性别、病毒变异尤其是BCP区、前C区变异的影响。

本研究发现在HCC组HBeAg阳性率仅仅为24.23%，而抗-HBe阳性率达到70.62%，HBeAg的缺失将导致机体免疫耐受被破坏，诱导炎症活动的产生；同时HBeAg又是细胞毒性T细胞的靶抗原，所以HBeAg的缺失会使变异株逃避宿主的免疫清除，在组织再生时HBeAg 缺失的肝细胞可大量增生，肝脏的纤维化程度可逐渐加重，使得发生癌变的几率增加[11]。HBeAg阴性CHB感染者的主要特点即是检出的HBV DNA水平和生化指标的不断变化。 而随着HBV DNA和ALT水平的不断起伏，肝脏内的慢性炎症会一直存在，持续损伤着肝细胞，导致肝脏纤维化甚至发生肝癌。根据相关研究可知，HBeAg阴性的CHB患者发生肝硬化的风险明显要高于HBeAg阳性的CHB患者[12，13]，也易引起肝癌的发生。

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(2014-12-31收稿 2015-07-02修回)

Association between hepatitis B virus surface antigen quantification and HBV-related hepatocellular carcinoma

ChengXiaoguang,ZhangZhenhua,WangChangtai,etal

DepartmentofInfectiousDiseases,theFirstAffiliatedHospitalofAuhuiMedicalUniversity,Hefei230022,China

Objective To compare the HBsAg and HBV DNA load between chronic Hepatitis B (CHB) and HBV-related hepatocellular carcinoma (HCC) patients. Methods A total of 403 patients with chronic Hepatitis B (CHB) and HCC were enrolled. HBV serological markers were tested by chemoluminescence method, and serum HBV-DNA level was detected by fluorescent quantitation PCR technology. All patients were divided into CHB group(209 patients)and HCC group(194 patients)according to clinical diagnosis. Results In CHB group, 89.00% patients had serum HBsAg titers≥250 IU/mL and 88.40% patients had HBV DNA≥1 000 copies/mL. In the meantime,79.90% and 67.70% patients with HCC had serum HBsAg titers≥250 IU/mL and HBV DNA≥1 000 copies/mL, respectively. The differences in HBsAg≥250 IU/mL, HBV DNA≥1 000 copies/mL between the two groups was significant (P<0.05). Conclusion Compared with chronic hepatitis B, the patients of HBV-related hepatocellular carcinoma has lower HBsAg and HBV DNA load.

Hepatitis B surface antigen;Chronic Hepatitis B;Hepatocelluar carcinoma;Hepatitis B viral load

国家自然科学基金项目(项目编号：81273142)；安徽省卫生厅科研基金(项目编号：2010C053)

230022 合肥 安徽医科大学第一附属医院感染科

李旭，aaylixu@qq.com

10.3969/j.issn.1000-0399.2015.09.003