巨细胞病毒对人群发生高血压的影响

马晨芸，王克翔

(上海市第七人民医院医学检验科，上海200137)

巨细胞病毒对人群发生高血压的影响

马晨芸，王克翔

(上海市第七人民医院医学检验科，上海200137)

目的探讨巨细胞病毒对人群发生高血压的影响。方法收集2011年2月至2013年6月来我院接受治疗的168例高血压患者的血液标本作为观察组，同时收集160例体检正常者的血液标本作为对照组。检测并比较两组患者血浆标本中的巨细胞病毒特异性中和抗体、巨细胞病毒特异性IgG和IgM及巨细胞病毒UL93 DNA。结果观察组患者巨细胞病毒UL93DNA、巨细胞病毒特异性IgG和IgM的阳性率分别为73.21%、70.83%和4.20%，对照组患者分别为57.50%、49.38%和2.50%，观察组患者巨细胞病毒UL93DNA和IgG的阳性率高于对照组(P＜0.05)，而两组间巨细胞病毒特异性IgM阳性率差异无统计学意义(P＞0.05)。观察组患者血浆巨细胞病毒特异性中和抗体的几何滴度平均为(40.12±19.89)，对照组为(59.96±24.85)，两组患者间差异有统计学意义(P＜0.05)。结论高血压患者的巨细胞病毒感染率高于健康人群，高血压患者巨细胞病毒特异性中和抗体水平降低明显，这均表明巨细胞病毒感染与人群发生高血压存在相关性。

巨细胞病毒；高血压；特异性中和抗体；几何滴度

高血压是威胁人类健康的主要疾病之一。很早以前人们就确定高血压是心血管疾病的一种危险因素，但由于原因不明的原发性高血压患者占95%以上，因此在临床上很难对高血压做到早发现及早治疗[1]。高血压是环境因素及遗传因素共同作用的一种复杂性疾病，我国研究人员2011年报道了原发性高血压和人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus，HCMV)的感染有关[2]。HCMV是疱疹病毒科B亚科的一种，巨细胞病毒含有约235 kb，与其他疱疹病毒比较而言是其中最大的一种[3]。人群中HCMV的感染率很高，在发达国家HCMV的感染率约为60%；而在发展中国家或在社会经济较低的团体及某些特殊的人群中，HCMV的感染率会超过95%[4]。本研究以高血压患者和体检正常者的血液标本作为研究对象，探讨巨细胞病毒感染对人群发生高血压的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2011年2月至2013年6月来我院治疗的168例高血压患者的血液标本作为观察组，同时收集160例体检正常者的血液标本作为对照组。所选高血压患者的诊断符合2010年中国高血压的防治指南[5]。采集所有研究对象的外周血5 ml (EDTA抗凝)，离心后收集血浆，放于-20℃保存。

1.2 方法使用美国Biocheck公司提供的HCMV IgG和IgM的ELISA试剂盒，具体操作步骤按说明书来检测所有研究对象血浆中HCMV IgG和IgM的阳性率。HCMV IgG阳性的标本再采用间接免疫荧光染色技术来进行HCMV特异性中和抗体的检测，其具体步骤参考曹元应等的文献报道[1]。采用PCR技术来扩增HCMV UL93 DNA片段：5'-GGC AGC TAT CGT TGG GA-3'为其上游外侧引物；5'-GAT CCG ACC CAT TGT CTA AA-3'为其下游外侧引物，通过35个循环扩增后得到长度为522 bp的产物。然后取2 μl扩增的外侧产物为原料进行内侧扩增，为5'-TTA GCG CGT GAC CTG TTA CG-3'为其上游内侧引物；5'-TCT AAA TTG TTA CGC AGT CCG-3'为下游内侧引物，通过35个循环扩增后得到长度为249 bp的产物。本研究中参考HCMVAD169株基因的序列(GenBank：FJ527563)并利用Premier5.0软件来进行引物设计，最后请上海生工生物工程股份有限公司来合成此引物。用安徽医科大学微生物学教研室保存的从培养物中提取的HCMV AD169株病毒作为阳性对照，取5 μl PCR产物用2.5%的琼脂糖凝胶跑电泳，其阳性为出现特征性条带，并请上海生工生物工程股份有限公司对阳性结果进行DNA的测序。

1.3 统计学方法应用软件GraphPad.Prism. v5.0分析HCMV的几何滴度，其余数据采用SPSS16.0软件包进行统计分析，计量资料以均数±标准差(±s)表示，两组间比较采用独立样本t检验，计数资料比较采用χ2检验，以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组受试者的一般资料比较两组患者的年龄、性别、体重指数、吸烟与饮酒等方面比较差异均无统计学意义(P＜0.05)，而在其他心血管疾病上观察组明显高于对照组(P＜0.05)，见表1。

表1 两组受试者的一般资料比较(±s)

表1 两组受试者的一般资料比较(±s)

组别观察组(n=168)对照组(n=160) t或χ2值P值男/女89/79 85/75 0.081 0.856年龄(岁) 41.25±5.34 39.89±3.58 0.351 0.924体重指数(kg/m2) 61.19±6.14 59.89±3.48 0.547 0.651吸烟[例(%)] 39(23.21) 38(23.75) 2.574 0.145饮酒[例(%)] 51(31.88) 49(30.63) 2.617 0.096伴随其他心血管病[例(%)] 37(22.02) 10(6.25) 8.274 0.001

2.2 两组受试者的HCMVUL93 DNA、HCMV IgG及IgM检测阳性率比较观察组患者的HCMV IgG和HCMV UL93 DNA阳性率均高于对照组(P＜0.05)，而HCMV IgM阳性率两组间比较差异无统计学意义(P＞0.05)，见表2。

表2 两组受试者的HCMVUL93 DNA、HCMV IgG及IgM检测阳性率比较[例(%)]

2.3 两组受试者HCMV特异性中和抗体检测结果比较对HCMV IgG阳性的两组受试者的血浆标本采用快速微量中和实验进行抗体滴度检测，结果显示，观察组患者血浆样品的50%中和滴度的几何平均数为(32.58±12.55)，低于正常对照组的(63.01±21.03)，其差异有统计学意义(P=0.028)，见图1。

图1 HCMV特异性中和抗体

3 讨论

高血压为环境因素及遗传因素共同作用的复杂疾病，许多因素均能影响高血压的发生。除传统公认的影响因素外，睡眠、巨细胞病毒感染、糖尿病、尿酸等也是导致高血压的重要因素[6]。人巨细胞病毒(HCMV)是普遍存在的只会感染人类的一种病原体，HCMV与血管炎性疾病密切相关，它可以破坏血管壁的完整性，进而会导致血管内皮细胞和平滑肌细胞的功能紊乱[7]；HCMV还可以潜伏于唾液腺、肾脏、乳腺及白细胞中，等待宿主机体的免疫功能低下时，可被激活感染，进而能导致多种器官的疾病[8]。已有动物实验证实HCMV可以直接引起小鼠的动脉血压升高，引起小鼠血浆某些炎性因子的含量增加，导致血管紧张素Ⅱ上升，进而引起血管的收缩，提示HCMV与高血压之间存在着某种联系[9]。

本研究结果显示，高血压患者的HCMV UL93 DNA和HCMV IgG阳性率分别为73.21%与70.83%，明显高于正常人的57.50%与49.38%，这种结果表明HCMV的感染和高血压的发生存在一定的联系，这与曹元应等[1]的研究结果相符合。高血压患者的HCMV IgM比血压正常人的高些，但是两组间的差异没有统计学意义，这可能是因为HCMV IgM代表了HCMV的近期感染，而HCMV IgG代表着HCMV的既往感染，其特异性及敏感性均很高。

本研究结果还显示，采用快速微量中和实验对两组受试者中HCMV IgG抗体均阳性的血浆标本进行抗体滴度检测，高血压患者血浆样品的50%中和滴度的几何平均数明显低于正常人群，提示高血压患者对HCMV特异性体液免疫功能明显地降低，这与已有研究相符合，这样的结果进一步证实体液免疫在预防先天性HCMV感染方面起着重要预知作用，同时能使我们联想到HCMV抗体阳性的孕妇能为其子宫内的胎儿提供一定的保护作用，这与先天性HCMV感染的概率在一定程度上有所减少有关。

综上所述，高血压的发病是由于受到诸如睡眠、巨细胞病毒感染、尿酸及糖尿病等多种因素的影响，高血压患者巨细胞病毒的感染率明显高于健康人群，表明巨细胞病毒感染与人群发生高血压存在相关性。

[1]曹元应,甘霖,赵俊,等.高血压患者人巨细胞病毒感染率及其血浆中和抗体水平分析[J].第二军医大学学报,2014,35(1)∶37-42.

[2]Li S,Zhu J,Zhang W,et al.Signature microRNA expression profile of essential hypertension ans its novel link to human cytomegalovirus infection[J].Circulation,2011,124(5)∶175-184.

[3]刘刚,李书琴,胡恩赑,等.人巨细胞病毒的定量检验和临床意义[J].现代生物医学进展,2012,12(33)∶6597-6600.

[4]Griffiths PD,Emery VC,Milne RC.Cytomegalovirus.In∶Douglas D,Richmand,Whitley RJ,editors[M].Clinical virology.3rded. ASM Press,2009∶475-506.

[5]刘力生.中国高血压防治指南2010[J].中华高血压杂志,2011,19 (6)∶701-704.

[6]李云,杨鹏,吴寿岭.高血压危险因素研究进展[J].实用预防医学,2014,21(4)∶511-513.

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[9]Cheng J,Ke Q,Jin Z,Wang HL,et al.Cytomegalovirus infection causes an increase of arterial blood pressure[J].Plos Pathog,2009, 5∶e1000427.

Effect of cytomegalovirus on the occurrence of hypertension in human.

MA Chen-yun,WANG Ke-xiang. Department of Medical Laboratory,Shanghai Seventh People's Hospital,Shanghai 200137,CHINA

ObjectiveTo explore the effect of human cytomegalovirus(HCMV)on the occurrence of hypertension.MethodsBlood samples were collected from 168 hypertensive patients(the experimental group)from February 2011 to June 2013 and 160 normal subjects(the control group).The HCMV specific neutralizing antibodies,HCMV UL93 DNA,HCMV IgG and HCMV IgM of the two groups were detected and compared.ResultsThe positive rates of HCMV UL93 DNA,HCMV IgG,HCMV IgM were 73.21%,70.83%and 4.20%in the experimental group and 57.50%,49.38%,2.50%in the control group,with statistically significant differences in HCMV UL93 DNA,HCMV IgG(P＜0.05)and no statistically significant difference in HCMV IgM(P＞0.05).The geometric titer of plasma HCMV specific neutralizing antibodies was(40.12±19.89)in the experimental group and(59.96±24.85)in the control group, and the difference between the two groups was statistically significant.ConclusionThe HCMV infection rate in hypertensive patients is higher than that in health people,and the geometric titers of plasma HCMV specific neutralizing antibodies is lower in hypertensive patients.There is a correlation between hypertension and HCMV infection.

Cytomegalovirus;Hypertension;Specific neutralizing antibodies;Geometric titers

R544.1

A

1003—6350（2015）12—1786—03

2014-08-25)

浦东新区卫生系统优秀青年医学人才培养计划项目(编号：PWRq2012-35)

马晨芸。E-mail：huditwyt@126.com

doi∶10.3969/j.issn.1003-6350.2015.12.0639