慢性肾脏疾病患者人附睾蛋白4水平变化

马潇潇　任瑞锋　张建杰　边英新　李俊　管燕

作者单位: 062552河北省任丘市，华北石油管理局总医院妇产科(马潇潇、张建杰、边英新、李俊、管燕)，核医学科(任瑞锋)

慢性肾脏疾病患者人附睾蛋白4水平变化

马潇潇任瑞锋张建杰边英新李俊管燕

作者单位: 062552河北省任丘市，华北石油管理局总医院妇产科(马潇潇、张建杰、边英新、李俊、管燕)，核医学科(任瑞锋)

【摘要】目的本研究旨在观察人附睾蛋白4(HE4)血清水平是否受到肾功能影响。方法入选127例慢性肾脏疾病(CKD)女性患者为研究组，依据肾功能情况分为3组: CKD 2期(n=69)、CKD 3期(n=36)、CKD 4～5期(n=22)，70位健康女性为对照组，分别使用ELISA法和电化学发光免疫分析检测HE4和CA125血清浓度。肾功能是通过估计肾小球滤过率计算，依据MDRD公式。结果(1) CKD各阶段HE4血清水平与对照组比较均明显升高(P ＜0.01)。(2) CKD2期血清HE4水平虽然多数在正常范围内但与对照组比较明显升高(P＜0.01)。无论绝经前组还是绝经后组患者HE4水平均明显高于对照组(P＜0.01) ; CA125水平与对照组比较无明显升高(P＞0.05)，2个亚组与对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05)。(3) CKD3期患者血清HE4水平与对照组比较明显升高且多数超出诊断阈值(P＜0.01)。绝经前和绝经后2个亚组HE4水平均显著升高(P＜0.01) ; CA125水平无论是整体还是绝经前和绝经后2个亚组均无明显升高(P＞0.05)。(4) CKD4-5期患者HE4水平无论是整体还是绝经前和绝经后2个亚组均明显升高(P＜0.01) ; CA125浓度整体和绝经前和绝经后组均明显高于对照组(P＜0.05)。结论HE4水平在慢性肾病女性患者中升高。因此，HE4结果在有肾脏疾病的女性中谨慎解释。

【关键词】慢性肾脏疾病;人附睾蛋白4水平;癌抗原125

项目来源:中国石油华北油田科技信息支持项目(编号: 2013-HBG-19-3)

E-mail: guanyanzyy@ sina.com

卵巢癌是妇科恶性肿瘤致死的首要原因［1］。经过初次手术和积极的化疗早期卵巢癌患者5年存活率可达到90%，但晚期卵巢癌患者预后仍然较差［2］。目前癌抗原125(CA125)仍是应用最广泛的检测卵巢癌的肿瘤标志物［3］，然而其诊断早期卵巢癌敏感性较低，另外有许多情况例如:子宫内膜异位症、卵巢囊肿、盆腔炎或肝功能异常，CA125血清水平会出现不同程度升高的情况［4，5］。此外，CA125异常升高见于其他恶性肿瘤疾病，如乳腺癌，肺癌或胰腺癌［5］。因此，需要有一种具有更高的灵敏性和特异性的肿瘤标志物［6，7］。最近近期有学者进行了许多临床研究评估人附睾蛋白4(HE4)单独或联合CA125预测盆腔包块良恶性［8－11］的临床价值，美国食品与药品管理局已经批准HE4作为监测卵巢上皮癌复发、进展的指标。然而只有很少关于HE4水平波动的研究。有研究显示健康女性HE4的血清水平与月经周期不同阶段相关［12］。本研究首次观察HE4和CA125的水平是否受肾功能的影响。

1　资料与方法

1.1一般资料本研究共入选127例华北石油管理局总医院妇产科和肾内科门诊就诊的慢性肾脏疾病(CKD)患者。其中绝经前48例，绝经后79例，入选患者合并各种慢性疾病，如高血压、心血管病、高脂血症、胃炎、2型糖尿病、自身免疫性疾病、外周动脉疾病。其中12例曾接受肾脏移植。70位肾功能和卵巢功能正常的健康体检者作为对照组。根据肾小球滤过率分为CKD 2期(GFR=60～89 ml·min－1· 1.73 m－2) ; CKD 3期(GFR=30～59 ml·min－1· 1.73 m－2) ; CKD 4期(GFR=16～29 ml·min－1· 1.73m－2) ; CKD 5期(GFR=4～15 ml·min－1·1.73 m－2)肾小球滤过率计算依据MDRD公式: GFR(ml· min－1·1.73 m－2)=186×(Scr)－1.154×(年龄)－0.203×(0.742女性)。注: GFR为肾小球滤过率; Scr为血清肌酐(mg/dl) ;年龄以岁为单位;体重以kg为单位。根据体检和放射学检查，排除卵巢和肺部疾病。

1.2标本采集及处理所有研究对象(手术患者于术前)均为空腹抽取肘静脉血3～5 ml，进行双盲编号后，置4℃冰箱，3 d内离心(3 000 r/min，10～15 min)分装，放入－80℃冰箱保存。实验前剔除溶血标本。

1.3血清HE4和CA125检测方法HE4水平采用酶联免疫吸附法测定，血清HE4参考值为0～150 pmol/L，HE4＞150 pmol/L判断为阳性。CA125水平采用电化学发光免疫分析法测定，参考范围为0～35 kU/L。

1.4统计学分析应用SPSS 18.0统计软件，Kolmogorov-Smirnov检验对数据的正态性进行评价，结果显示计量资料为非正态分布，数据表示为中位数(四分位间距)。CKD各组与对照组进行比较使用Kruskal-Wallis检验和Mann-Whitney U检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1慢性肾脏疾病各期患者与对照组HE4和CA125水平根据肾功能状态，患者分为4组，由于CKD4期和CKD5期病例数较少合并成(CKD4～5)组(24例)。CKD各阶段的HE4血清水平与对照组比较，均明显升高(P＜0.01)。见表1。

表1　慢性肾脏疾病各期患者与对照组HE4和CA125水平

2.2CKD2期HE4和CA125水平与对照组比较

CKD2期血清HE4水平虽然多数在正常范围内，但是与对照组比较已经明显升高(P＜0.01)。无论绝经前组还是绝经后组患者HE4水平均明显高于对照组(P＜0.01) ; CA125水平与对照组比较无明显升高(P＞0.05)，2个亚组与对照组比较均差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1、2。

表2　慢性肾脏疾病各期患者亚组HE4和CA125水平与对照组比较

2.3CKD3期患者HE4和CA125水平与对照组比较

CKD3期血清HE4水平与对照组比较已经明显升高，且多数超出诊断阈值(P＜0.01)。绝经前和绝经后2个亚组HE4水平均显著升高(P＜0.01) ; CA125水平无论是整体还是绝经前和绝经后两个亚组均无明显升高(P＞0.05)。见表1、2。

2.4CKD4-5期患者HE4和CA125水平与对照组比较HE4水平无论是整体还是绝经前和绝经后2个亚组均明显升高(P＜0.01) ;整体和绝经前和绝经后组CA125浓度均明显高于对照组(P＜0.05)。见表1、2。

3　讨论

联合检测HE4和CA125可显著提高卵巢癌的诊断率，具有广阔的应用前景［8－11］。随着研究深入和HE4在临床诊疗中应用的增加，HE4在体内的生物学变异也引起了学者的重视。

已有研究证实HE4水平在健康人群中随着年龄增长而升高［13］，且受月经周期的影响［12］。之前仅在一些研究亚组分析见到HE4水平受肾功能影响。有学者使用酶联免疫吸附法在尿液中检测到HE4，且早期卵巢癌Ⅰ/Ⅱ期阳性率86.6%，Ⅲ/Ⅳ期阳性率89%，与血清HE4检测灵敏度相近［14］。由于HE4蛋白在正常肾脏远曲小管分泌，该研究中检测到的HE4是来源于正常肾小管分泌还是由于HE4血清水平升高引起肾小球滤过增加导致的，在该研究中并未涉及。而Park等［15］检测176例患者血清样本，比较CA125 和HE4鉴别诊断妇科疾病和非妇科疾病的价值，其中3例为CKD患者CA125水平63(15～250) kU/L; HE4 1 636(628～1 886) pmol/L，在该研究中HE4水平明显高于正常上限，但是由于病例数仅3例仅提示可能肾功能差与HE4水平升高有关。同年Escudero等［16］对比在恶性与良性疾病患者中CA125和HE4水平，结果显示肾功能差是良性疾病中主要导致HE4水平升高的原因。而该研究设定肾功能差的标准为Scr＞1.3 mg/dl(115 μmol/L)。以上两个研究均提示肾衰会影响HE4水平而并未对肾功能衰竭程度与HE4水平之间进行深入研究。本研究首次证实在排除了卵巢癌和肺癌的患者中肾功能衰竭的程度与血清HE4水平密切相关。本研究结果显示HE4水平在CKD2期已经明显高于对照组，且随着肾功能逐渐恶化，血清HE4水平逐渐升高，从本研究结果可以发现无论是否绝经肾功能恶化均影响HE4水平。而CA125水平仅在严重肾功能受损(CKD4～5)的患者中明显升高，CA125在本研究的各实验组中均存在离群值，提示CA125水平可能受到其他因素影响。

其他的生物标志物如肌钙蛋白也可能会受到肾功能受损的影响。一些正在进行血液透析的终末期肾功能衰竭(CKD5期)患者虽然没有急性心肌损伤的迹象［17，18］，血清肌钙蛋白水平明显升高，总体而言，需要解释这些生物标志物以及HE4结果时要考虑肾功能受损的存在。

总之，HE4血清水平升高同肾功能状态密切相关，随着肾功能恶化血清HE4水平逐渐升高，与是否绝经无关。

本研究的局限性在于样本例数较少，需要进一步更大样本量的研究以确定肾功能受损的不同阶段HE4的诊断界值。

参考文献

1Seibaek L，Petersen LK，Blaakaer J，et al.Symptom interpretation and health care seeking in ovarian cancer.BMC Womens Health，2011，11: 31.

2Bamias A，Karadimou A，Soupos N，et al.Prognostic factors for early-stage epithelial ovarian cancer，treated with adjuvant carboplatin/paclitaxel chemotherapy: a single institution experience.Gynecol Oncol，2011，123: 37-42.

3Bast RC Jr，Xu FJ，Yu YH，et al.CA125: the past and the future.Int J Biol Markers，1998，13: 179-187.

4Markman M.The role of CA-125 in the management of ovarian cancer.Oncologist，1997，2: 6-9.

5Galgano MT，Hampton GM，Frierson HF Jr.Comprehensive analysis of HE4 expression in normal and malignant human tissues.Mod Pathol，2006，19: 847-853.

6Hellstrom I，Raycraft J，Hayden-Ledbetter M，et al.The HE4 (WFDC2) protein is a biomarker for ovarian carcinoma.Cancer Res，2003，63: 3695-700.

7Bast RC Jr，Badgwell D，Lu Z，et al.New tumor markers: CA125 and beyond.Int J Gynecol Cancer，2005，15: 274-281.

8Moore RG，McMeekin DS，Brown AK，et al.A novel multiple marker bioassay utilizing HE4 and CA125 for the prediction of ovarian cancer in patients with a pelvic mass.Gynecol Oncol，2009，112: 40-46.

9Andersen MR，Goff BA，Lowe KA，et al.Use of a Symptom Index，CA125，and HE4 to predict ovarian cancer.Gynecol Oncol，2010，116: 378-383.

10Nolen B，Velikokhatnaya L，Marrangoni A，et al.Serum biomarker panels for the discrimination of benign from malignant cases in patients with an adnexal mass.Gynecol Oncol，2010，117: 440-445.

11Huhtinen K，Suvitie P，Hiissa J，et al.Serum HE4 concentration differentiates malignant ovarian tumours from ovarian endometriotic cysts.Br J Cancer，2009，100: 1315-1319.

12Anastasi E，Granato T，Marchei GG，et al.Ovarian tumor marker HE4 is differently expressed during the phases of the menstrual cycle in healthy young women.Tumour Biol，2010，31: 411-415.

13Urban N，Thorpe J，Karlan BY，et al.Interpretation of Single and Serial Measures of HE4 and CA125 in Asymptomatic Women at High Risk for Ovarian Cancer.Cancer Epidemiol Biomarkers Prev，2012，21: 2087-2094.

14Hellstrom I，Heagerty P J，Swisher EM.Detection of the HE4 Protein in Urine as a Biomarker for Ovarian Neoplasms.Cancer Lett，2010，296: 43-48.

15Park Y，Lee，JH Hong DJ，Diagnostic performances of HE4 and CA125 for the detection of ovarian cancer from patients with various gynecologic and non-gynecologic diseases.Clin Biochem，2011，44: 884-888.

16Escudero JM，Auge JM，Filella X，et al.Comparison of Serum Human Epididymis Protein 4 with Cancer Antigen 125 as a Tumor Marker in Patients with Malignant and Nonmalignant Diseases.Clin Chem，2011，57: 1534-1544.

17Frankel WL，Herold DA，Ziegler TW，et al.Cardiac troponin T is elevated in asymptomatic patients with chronic renal failure.Am J Clin Pathol，1996，106: 118-123.

18Wayand D，Baum H，Schatzle G，et al.Cardiac troponin T and I in endstage renal failure.Clin Chem，2000，46: 1345-1350.

(收稿日期:2014－10－17)

通讯作者:管燕，062552河北省任丘市，华北石油管理局总医院;

doi:10.3969/j.issn.1002－7386.2015.07.018

【文章编号】1002－7386(2015) 07－1019－03

【文献标识码】A

【中图分类号】R 692