“三苗两点”注射法在生猪免疫工作中的应用试验

魏建方，向智龙，杨立强，苏芹松，彭良富，蒲鲁琴，张 欢

(1.贵州省大方县动物疫病预防控制中心，贵州 大方 551600;2.贵州省大方县东关乡农业服务中心，贵州 大方 551600)

近年来，生猪强制免疫病种猪O型口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病3种疫苗均为单价苗，需分时段多次注射，耗时费力，生猪应激反应较大，防疫阻力增大。为进一步提高动物疫病免疫工作效率，降低动物免疫成本和村级动物防疫人员劳动强度，2013年我们应用“三苗两点”注射方法对猪O型口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病3种疫病免疫进行了探索试验，现将试验情况报道如下。

1 材料与方法

1.1 试验范围 春季集中免疫期间在沙厂乡、达溪镇、竹元乡、东关乡、瓢井镇、理化乡、猫场镇7个乡镇，秋季集中免疫期间扩大到11个乡镇。选择辖区内村级动物防疫员业务能力强、养猪农户相对集中、防疫积极性高的养殖户，开展“三苗两点”注射试点工作，2次试验共免疫生猪8 403头，其中分2次注射的1 194头(春防879头、秋防315头)，同步注射的7 209头(秋防)。

1.2 疫苗准备 猪口蹄疫疫苗(中牧实业股份有限公司保山生物药厂生产)、猪瘟疫苗(细胞源)(广西丽原生物股份有限公司生产)、高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗(吉林正业生物制品股份有限公司生产)、疫苗稀释液。

1.3 诊断试剂 猪瘟抗体ELISA诊断试剂盒(批号为140506)、猪繁殖与呼吸综合征抗体ELISA诊断试剂盒(批号为140506)、猪 O型口蹄疫抗体ELISA诊断试剂盒(批号分别为140506、140809)，均由武汉科前动物生物制品有限责任公司生产。

1.4 试验方法

1.4.1 “三苗两点”注射法:对生猪进行免疫时，将国家要求强制免疫的猪O型口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病3种疫苗分2点进行免疫注射。

1.4.1.1 “三苗两点、两次注射”:注射猪O型口蹄疫疫苗7天后，再用猪瘟、高致病性猪蓝耳病2种疫苗混合后1次性注射到猪另一侧耳根后颈部肌肉内，3种疫苗2点注射，2次完成。

1.4.1.2 “三苗两点、同步注射”:在猪耳根后颈部的一侧注射猪O型口蹄疫疫苗，同时在另一侧混合注射猪瘟、高致病性猪蓝耳病2种疫苗，3种疫苗2点注射，1次完成。

1.4.2 操作要点

1.4.2.1 疫苗稀释:疫苗使用前应脱离冷源恢复到常温(15～25℃)，用疫苗稀释液稀释。稀释比例为1 mL稀释液稀释1头份猪瘟疫苗和1头份高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗，即1 mL稀释好的疫苗中必须含1头份猪瘟疫苗和1头份高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗。稀释好的疫苗常温保存，并在2小时内用完。1.4.2.2 注射剂量:根据使用说明书的剂量增加注射 0.2 ～0.5 mL/头，实际注射 1.2 ～1.5 mL/头，以保证达到所需要的注射剂量。

1.4.2.3 监测采样:对采用“三苗两点”注射法的生猪进行采样，每头生猪采1份血清，每份采血量均不低于2 mL，并按照采样单上的要求逐项据实填写(注明是2次或同步注射)，每份血清样品必须具有唯一性，样品编号必须连续。

1.5 抗体检测 用ELISA检测高致病性猪蓝耳病免疫抗体:样品 D630nm＞0.42 判为阳性，0.38 ＜ 样品D630nm＜0.42判为可疑，样品 D630nm＜0.38判为阴性。猪瘟免疫抗体:样品D630nm＞0.35判为阳性，样品D630nm＜0.35判为阴性。猪O型口蹄疫免疫抗体:样品 D630nm≥0.4判为阳性，样品 D630nm＜0.4 判为阴性。

2 结果

2.1 免疫反应情况 2次试验共免疫生猪8 403头(春防879头，秋防7 524头)。其中“三苗两点、两次注射”1 194头，“三苗两点、同步注射”7 209头。免疫生猪有52头出现不同程度的精神不振、食欲下降、体温升高等免疫副反应，无死亡。

2.2 抗体检测结果

2.2.1 “三苗两点、两次注射”:监测 111 头，猪口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病免疫抗体合格率分别为 87.39%、92.79%、88.29%，见表 1。

表1 猪口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病“三苗两点、两次注射”免疫抗体监测结果

2.2.2 “三苗两点、同步注射”监测数116头，猪口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病免疫抗体合格率分别为 80.17% 、80.17% 、92.24% ，见表2。

表2 猪口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病“三苗两点、同步注射”免疫抗体监测结果

3 小结

3.1 猪口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病3种疫苗采用“三苗两点”注射法免疫，无明显的临床不良反应。

3.2 同步注射和2次注射免疫抗体合格率均达到和超过农业部要求。2次注射与同步注射免疫抗体合格率比较:猪口蹄疫高7.22个百分点，猪瘟高12.62个百分点，高致病性猪蓝耳病低3.95个百分点。通过对比，3种疫苗采用“三苗两点”同步注射和2次注射的免疫抗体合格率差异不显著，同步注射猪瘟、猪口蹄疫免疫抗体合格率较低，在实际工作中建议采用“三苗两点”2次注射，减少疫苗间的相互干扰。

3.3 该免疫技术经云南省多个市州开展2年多的试验，3种疫苗的免疫质量不受影响，减少了免疫反应数与反应死亡数［1］;云南省永胜县免疫结果，猪瘟、猪口蹄疫和高致病性猪蓝耳病的抗体合格率分别为 97.1%、79.3% 和 75.7%［2］;云南省禄劝县在全县开展“三苗同步、两点注射”免疫技术，免疫密度和免疫质量得到提高，免疫反应和反应死亡率明显下降，高致病性猪蓝耳病、猪瘟、猪口蹄疫免疫抗体转阳率达90%以上［3］。上述报道与本次试验结果基本一致。

3.4 “三苗两点”注射法是一种新的免疫方法，能有效整合行政资源、人力资源，工作效率显著提高;防疫免疫密度和免疫质量均有所提高;防疫免疫注射时间缩短，注射速度整体加快，劳动强度明显减少;减少重复免疫、漏免现象和对猪的多次免疫惊吓，免疫反应和反应死亡率降低，养殖户更容易接受，可在生猪免疫工作中推广。

［1］ 汪金福.生猪“三苗两针同步注射”免疫技术［J］.农家科技，2013，(4):36.

［2］ 杨政学等.生猪“三苗两点”免疫效果观察［J］.养殖与饲料，2014，(1):21 ～23.

［3］ 张月婷.“三苗同步、两点注射”技术在禄劝县生猪防疫工作中的应用［J］.贵州畜牧兽医，2013，(6):44.