生猪常见疫病快速检测及综合防控技术
2015-04-04宁尚锴徐曙光黄新海侯明飞山东省宁阳县畜牧兽医局272000山东省宁阳县葛石镇畜牧兽医站
宁尚锴徐曙光黄新海侯明飞(山东省宁阳县畜牧兽医局 272000 山东省宁阳县葛石镇畜牧兽医站)
生猪常见疫病快速检测及综合防控技术
宁尚锴①徐曙光①黄新海②侯明飞①(①山东省宁阳县畜牧兽医局 272000 ②山东省宁阳县葛石镇畜牧兽医站)
生猪常见疫病的快速检测确诊可以有效预防控制常见生猪疫病的发生流行,保护生猪产业的健康快速发展。近期对猪瘟、猪蓝耳病、猪圆环病毒病、猪伪狂犬病、细小病毒病、乙型脑炎、气喘病等生猪常见疫病的快速诊断归纳整理,并结合实际制订了综合防控措施。
1 猪传染性萎缩性鼻炎
猪传染性萎缩性鼻炎是猪的一种慢性接触性传染病,早期症状多见于6~8周龄仔猪,病猪出现喷嚏,流涕和吸气困难。流涕为粘液浓性滲出物,个别猪因强烈喷嚏而发生鼻衄,病猪常因鼻炎刺激粘膜而表现不安,如摇头、拱地或摩擦鼻部。吸气时鼻孔开张,发出鼾声,严重的张口呼吸。由于鼻泪管阻塞,泪液流出眼外,在眼内眦下皮肤上形成弯月形的润湿区,被尘土沾污后粘结成黑色痕迹。继而出现鼻甲骨萎缩,致使鼻腔和面部变形,体温一般正常,病猪生长停滞,难以肥育,有的成为僵猪。
1.1 检测
1.1.1 方法 乳胶凝集试验
1.1.2 试剂 猪传染性萎缩性鼻炎致敏乳胶抗原,阳性血清,阴性血清,稀释液。
1.1.3 操作方法 定性试验:取检测血清、标准阳性血清、阴性血清、稀释液各一滴,分别置于玻片的不同位置,各加乳胶抗原一滴,用牙签混匀,搅拌并摇动2~3min,于3~5min内观察结果。
1.1.4 结果判定 出现如下结果方可成立,否则应重试:阳性血清加抗原呈“++++”,阴性血清加抗原呈“-”,抗原加稀释液呈“-”。判定标准:“++++”:全部乳胶凝集,颗粒聚于液滴边缘,液体完全透明;“+++”:大部分乳胶凝集,颗粒明显,液体稍浑浊;“++”:约50%乳胶凝集,但颗粒较细,液体浑浊;“+”:液体浑浊,有少许凝集;“-”:液滴呈原有的均匀乳状。出现“++”以上凝集者判为阳性。
1.1.5 注意事项 按常规方法采血及分离血清,要求无腐败,无沉淀,无凝块。使用前应轻轻摇匀乳胶抗原。
1.2 微生物学检疫
通过鼻腔棉拭子培养法,先保定好检疫猪,清洗鼻的外部,将带柄的棉拭子插入鼻腔,轻轻旋转,把棉拭子取出,放入无菌的PBS中,用改良麦康凯琼脂尽快进行培养。
1.3 综合防控
(1)免疫接种,母猪产仔前2及1个月分别接种,以提高母源抗体滴度,保护好仔猪出生几周内不受本病感染,也可给1~3周龄仔猪,以一周间隔注射2次。(2)药物防治,为了控制仔母链传染,应在母猪妊娠最后一个月给予预防性药物,常用土霉素400g/t饲料。乳猪在出生3周内,注射敏感的抗生素3~4次,或鼻内喷雾,每周1~2次,每鼻孔0.5ml,直到断乳为止,育成猪也可用磺胺或抗生素防治,连用4~5周,育肥猪宰前应停药。(3)改善饲养管理,产仔断奶和育肥各阶段均采用全进全出饲养体制,提高生育母猪群年龄,避免引进大量年青母猪,降低猪群饲养密度,严格卫生防疫制度,改善通风条件,严格消毒,减少各种应激,新购入猪,必须隔离检疫。(4)非免疫猪群乳胶凝集试验阳性猪进行隔离,以后淘汰,这种检疫间隔3~4周反复进行,直到2次试验全部阴性为止。免疫猪群用微生物学检疫,隔离、淘汰阳性猪。
2 猪细小病毒感染
猪细小病毒可引起猪的繁殖障碍病,母猪不同孕期感染,可分别造成死胎、木乃伊胎、流产等不同症状。在怀孕期70d后,大多数胎儿能对病毒感染产生有意义的免疫应答而存活,但这些仔猪常带有抗体和病毒,此外,本病还可引起产仔瘦小、弱胎、母猪发情不正常,
久配不孕等症状。
2.1 检测
2.1.1 方法 乳胶凝集试验
2.1.2 试剂 猪细小病毒致敏乳胶抗原,阳性血清,阴性血清,稀释液。
2.1.3 操作方法 定性试验:取检测血清、标准阳性血清、阴性血清、稀释液各一滴,分别置于玻片的不同位置,各加乳胶抗原一滴,用牙签混匀,搅拌并摇动1~2min,于3~5min内观察结果。
2.1.4 结果判定 出现如下结果方可成立,否则应重试:阳性血清加抗原呈“++++”,阴性血清加抗原呈“-”,抗原加稀释液呈“-”。判定标准:“++++”:全部乳胶凝集,颗粒聚于液滴边缘,液体完全透明;“+++”:大部分乳胶凝集,颗粒明显,液体稍浑浊;“++”:约50%乳胶凝集,但颗粒较细,液体浑浊;“+”:液体浑浊,有少许凝集;“-”:液滴呈原有的均匀乳状。以上出现“++”凝集者判为阳性。
2.1.5 注意事项 按常规方法采血及分离血清,要求无腐败,无沉淀,无凝块。使用前应轻轻摇匀乳胶抗原。
2.2 综合防控
(1)非免疫猪群或进猪时用乳胶凝集试验检疫,阳性猪进行隔离,以后淘汰。这种检疫间隔3~4周反复进行,直到两次试验全部阴性为止。(2)初产母猪在其配种前可通过自然感染或人工免疫接种获得主动免疫。仔猪母源抗体的持续期为14~24周,在断奶时将仔猪从污染猪群移到没有本病污染的地区饲养,可培养出血清阴性猪群。
3 猪瘟
猪瘟是一种高度接触传染的病毒性疾病,可表现为急性、慢性、不典型或不显症状的病程。急性猪瘟由强毒引起,病猪表现呆滞,被驱赶时站立一旁,呈弓背或怕冷状,或低头垂尾,同时食欲减少,进而停食,体温升高,有眼结膜炎,死亡率高,
3.1 猪瘟病毒抗原酶联免疫吸附试验
3.1.1 试剂 多克隆羊抗血清包被板、单克隆抗体、阳性对照、阴性对照、低物溶液、终止液
3.1.2 原理 用来检测外周血白细胞、全血、细胞培养物及组织样品中的猪瘟病毒抗原。采用双抗体夹心ELISA,将CSFV多克隆羊抗血清包被微量反应板,可与样品中的CSFV抗原结合。猪瘟病毒的特异性单克隆抗体形成了夹心的上层。形成的多克隆抗体+样品+单克隆抗体夹心可以用辣根过氧化物酶标记物来检测。加入与辣根过氧化物酶反应的底物,在酶的作用下形成有色产物。可用通过酶标仪测定吸光度。
3.2 综合防控
(1)疫苗接种,疫苗接种不仅保护接种猪不发生猪瘟,而且大大减少猪瘟病毒攻击时强毒的复制,并防止攻击强毒向接触猪传播。(2)对试验阳性猪进行隔离,以后淘汰。
4 猪气喘病
猪气喘病是猪的一种慢性呼吸道传染病,主要症状为咳嗽和气喘,病变的特征是肺的尖叶、心叶、中间叶和膈叶前缘呈“肉样”或“虾肉”样实变。
4.1 微量间接血凝试验
(1)试剂:冻干的10%抗原敏化红细胞,冻干的标准阴性血清、阳性猪血清,冻干的健康兔血清,10%武二醛化红细胞,被检血清。(2)方法:将被检血清处理成2.5倍稀释检测血清;按步骤在对应的孔中依次加入稀释液,被检血清,2%抗原致敏化红细胞后,振荡后室温下反应1~2h,判定结果。
4.2 综合防控
(1)非免疫猪群对试验阳性猪进行隔离,以后淘汰。(2)在疫区以康复母猪培育无病的后代,建立健康猪群;未发病地区和猪场坚持自繁自养原则,若必须引进时,严格检疫,要加强饲养管理,做好兽医卫生工作,推广人工授精,保护健康母猪群。
5 猪传染性胸膜肺炎
猪传染性胸膜肺炎是猪的一种呼吸道传染病,具有肺炎和胸膜炎的典型症状和病变,病猪表现为体温升高,表情漠然,食欲废绝,鼻、耳、腿、体测皮肤发绀,呼吸困难,急性者死亡发生在24~36h内,偶尔有的猪突然死亡而无先兆症状,初生猪则为致死败血症。
5.1 病原分离、鉴定
5.1.1 病料采集 (1)活体采集:灭菌拭子鼻腔采集;(2)病料采集:无菌采集肺、器官、淋巴结、肝等病变典型组织
5.1.2 病原分离 按常规法接种于血琼脂培养基,用葡萄球均作交叉划线,放于37℃ 5%~10%CO2培养箱培养。5.1.3 病原鉴定 形态和染色鉴定:革兰氏阴性小球菌,两极着色,致病性菌有荚膜;血琼脂中为露珠样的直径为1~2mm的小菌落,靠近葡萄球菌苔形成卫星现象。5.1.4 生化特性 出现CAMP反应、尿素酶试验均为阳性;能分解D-木糖、甘露醇;不分解棉子糖、阿拉伯胶糖。
5.2 综合防控
(1)疾病的早期用抗菌药物治疗有效,可减少死亡,可在饲料中添加土霉素(0.6mg/kg),作预防性给药。(2)对无病场应防止引进带菌猪,引进前可用血清学实验进行检疫。对感染猪场可采用血清学检查,清除血清学阳性带菌者,并结合药物防治逐步控制。
S858.28
B
1007-1733(2015)09-0042-02
2015–07–01)