假性湿疣和尖锐湿疣组织中VEGF、Bcl-2蛋白表达变化及临床意义

张楠，周炳娟，李玲(保定市第一中心医院，河北保定071000)

假性湿疣和尖锐湿疣组织中VEGF、Bcl-2蛋白表达变化及临床意义

张楠，周炳娟，李玲
(保定市第一中心医院，河北保定071000)

摘要:目的观察假性湿疣( PC)和尖锐湿疣( CA)组织中血管内皮生长因子( VEGF)、Bcl-2蛋白表达变化，并探讨其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测100例份PC组织( PC组)、100例份CA组织( CA组)、50例份健康女性外阴皮肤(对照组)中VEGF、Bcl-2蛋白。结果PC组、CA组、对照组中VEGF阳性率分别为80%、90%、40%，PC组、CA组分别为与对照组比较，P均＜0.05; Bcl-2阳性率分别为78%、98%、40%，两两比较，P均＜0.05。结论PC和CA组织中VEGF、Bcl-2蛋白表达升高，且检测Bcl-2有助于PC和CA的鉴别诊断。

关键词:假性湿疣;尖锐湿疣;血管内皮生长因子; Bcl-2蛋白

假性湿疣( PC)是一种发生于女性阴部的颗粒状突起性淡红色丘疹，有时轻痒，其与尖锐湿疣( CA)在临床表现上非常相似，所以常给患者带来不必要的负担。PC的发病机制尚不明确，国内外学者的研究亦各不相同。2008年10月～2010年6月，我们观察了PC和CA组织中血管内皮生长因子( VEGF)、Bcl-2蛋白表达变化，并探讨其意义。

1　资料与方法

1.1临床资料选择2008年10月～2010年6月保定市第一中心医院收治的PC患者100例，均为女性，年龄22～48岁( 30.35±5.22)岁，病程7 d～6个月。CA患者100例，均为女性，年龄20～50 ( 30.35±5.79)岁，病程2 d～4个月。均经临床和组织病理检验确诊，且排除患有其他系统疾病，3个月内未曾接受任何免疫治疗。手术留取PC真皮和表皮组织100例份( PC组)、CA真皮和表皮组织100例份( CA组)，另选50例份子宫肌瘤手术女性患者的健康外阴皮肤作为对照组。

1.2组织VEGF、Bcl-2蛋白检测采用免疫组化SP法，严格按照试剂说明步骤进行。切片脱蜡至水化，经3%过氧化氢甲醇固定后分别加入第一抗体鼠抗人VEGF单克隆抗体、Bcl-2单克隆抗体，然后加入第二抗体进行染色，使得着色细胞染成棕黄色，最后冲洗复染，中性树胶封固。结果分析方法根据改良Shimzu法。VEGF和Bcl-2蛋白阳性细胞染成棕黄色，阴性细胞未着色，= 1.9为阴性，2～2.9为弱阳性，3～3.9为阳性，=4为强阳性。两种蛋白的阳性率为以弱阳性、阳性、强阳性细胞的总和所占的比例。

1.3统计学方法采用SPSS11.0统计软件。两两比较采用Kruskal-wallis H秩和检验方法。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

PC组、CA组、对照组中VEGF蛋白阳性率分别为80%、90%、40%，PC组、CA组分别与对照组比较，P均＜0.05; Bcl-2蛋白阳性率分别为78%、98%、40%，两两比较，P均＜0.05。

3　讨论

VEGF又称为血管渗透因子，是目前被认为与创伤组织的修复、缺血、炎症及肿瘤的发生等密切相关的因子之一［1］，也是目前已知最强的促血管生成因子［2］。VEGF主要功能为增加血管通透性，促进血管生成等［3］。角质形成细胞是皮肤中VEGF的主要来源，而角质形成细胞来源的VEGF是真皮微血管内皮细胞特异性的有丝分裂原，可促进内皮细胞生长［4］。曾抗等［5］认为CA组织可能产生某种促血管物质，并认为这种物质是某种形式的血管生成因子。Beqquet等［6］通过HPV16阳性细胞株体外培养发现，成纤维细胞生长因子( bFGF)对VEGF的表达具有上调作用，从而使VEGF发挥促进血管生成和表皮细胞增殖分化的作用。国外有研究［7］表明，HPV16 E6可刺激p53基因诱导VEGF基因的表达增加。本研究显示，PC、CA组VEGF蛋白表达高于对照组，提示PC和CA角质形成细胞在一定因素刺激下能产生和分泌过量的VEGF，在促进PC和CA真皮血管生成方面可能起重要作用。CA的发生机制可能是由于患者HPV病毒感染后，诱导机体产生VEGF，而在CA组织中bFGF有可能诱导上调了VEGF的表达，使VEGF增加了皮损区血管通透性，促进了血管形成，从而导致黏膜和皮肤呈现疣状增生性损害。PC的发病机制是直接还是间接参与尚不明确，可能是由于PC上皮组织增生造成局部缺氧刺激引起的结果，或是由于PC本身分泌一种促血管生成物质上调VEGF，也可能是PC皮损部位角质形成细胞通过旁分泌作用分泌的大量VEGF与其受体结合，发挥促血管生成作用。而是否存在HPV感染仍有待于进一步研究。总之，VEGF在组织中的过度表达参与了促进PC和CA增殖及血管增多的病理过程，构成了二者发病的病理学基础。

Bcl-2是目前最受关注的与细胞凋亡关系密切的基因之一。Bcl-2对细胞凋亡具有明显的抑制作用，但不影响细胞增殖［8］。凋亡的影响因素很多，其中病毒可能延迟或抑制细胞凋亡的发生。Tsao等［9］在HPV阳性的宫颈癌细胞株凋亡的研究中也同样发现，Bcl-2过度表达对凋亡有明显抑制作用。本研究结果表明，Bcl-2可能通过一定的形式参与了PC皮损组织细胞的凋亡调控，使皮损的凋亡受到抑制。PC的临床和病理特点显示该疾病处于增殖旺盛状态，抑凋亡基因Bcl-2又呈现过度表达，增殖与凋亡在PC组织中处于失衡状态，从而导致疾病的发生。本研究发现，CA组Bcl-2表达高于对照组，说明凋亡亦参与了CA的发病机制。病毒感染可以降低人体免疫功能，HPV使CA患者的免疫功能受到不同程度的损伤，造成其免疫力低下，临床表现为病毒清除困难，造成疾病的活动性与宿主的传染性。在病理状态下，正常细胞凋亡会受到异常调控而使“非法身份”的细胞存活，导致机体病理过程进一步发生和发展。由此推测，HPV在CA发病过程中可能促进了Bcl-2的表达。本研究还发现，PC组Bcl-2表达低于CA组，说明Bcl-2对PC与CA的影响有明显差别。这可能是大量HPV感染的结果，也可能是临床上CA比PC增长速度快、增生更加活跃的原因之一。总之，细胞凋亡参与了这两种增生性疾病的发生、发展。

参考文献:

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［3］张润歧.肿瘤血管生成因子的研究进展［J］.国外医学:生理、病理科学与临床分册，1999，19( 6) : 447-449.

［4］Bhushan M，McLaughlin B，Weiss JB，et al.Levels of endothelial cell stimulating angiogenesis factor and vascular endothelial growth factor are elevated in psoriasis［J］.Br J Dermatol，2013，141( 6) : 1054-1060.

［5］曾抗，陈炎，王瑞善，等.尖锐湿疣与基底细胞癌的促血管生长作用的比较研究［J］.第一军医大学学报，1996，16( 1) : 16-18.

［6］Beqquet RM，Lopez OO.Angiogenesis modulators expression in culture cell lines positives for Hpv-16 oncoproteins［J］.Bioche m Biophys Res Commun，2000，277( 1) : 55-61.

［7］López-Ocejo O，Viloria-Petit A，Bequet-Romero M，et al.Oncogenes and tumor angiogenesis: the Hpv-16 E6 oncoprotein activates the vascular endothelial growth factor ( VEGF) gene promoter in a p53 independent manner［J］.Oncongene，2000，19( 40) : 4611-4620.

［8］张谊之，张敏，徐利.尖锐湿疣Fas、Bcl-2、Ki-67的表达［J］.中国麻风皮肤病杂志，2012，16( 2) : 74-76.

［9］Tsao YP，Huang SJ，Chang JL，et al.Adenovirus mediated P21 ( WAFI/SDH/CIPI) gene transfer induces apoptosis of human cervical cancer cell lines［J］.J Virol，1999，73( 6) : 4983-4985.

收稿日期:( 2015-04-22)

文章编号:1002-266X( 2015) 31-0064-02

文献标志码:B

中图分类号:R752.5

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2015.31.026