鸡减蛋综合征的现场诊断、实验室检验及防制

韩进辉

（吉林省蛟河市动物卫生监督所，吉林蛟河 132500）

鸡减蛋综合征的现场诊断、实验室检验及防制

韩进辉

（吉林省蛟河市动物卫生监督所，吉林蛟河 132500）

鸡减蛋综合征是20世纪70年代后期发现的由减蛋综合征病毒（EDSV）引起的世界性的商品蛋鸡和母鸡产蛋下降的病毒性疾病。其临诊特征为鸡群产蛋突然下降，大量出现软皮蛋和畸形蛋，蛋壳颜色变浅。该病在世界范围内都有流行和发生，给养鸡业带来了巨大的经济损失。

鸡减蛋综合征；实验室检验；防制

1 现场诊断

（1）流行病学：各种年龄的鸡对本病病毒都易感，但主要侵害26～32周龄鸡，35周龄以上则较少发病，幼龄鸡感染后不表现症状。鸭、鹅是自然宿主。病毒经受精卵垂直传播是本病病毒的主要传播方式。鸡与鸡之间接触以及被病毒污染的饮水、饲料和器具，带毒的鸭、鹅和某些野禽，也起到传播的作用，但病毒水平传播的速度较慢，且有时呈间断性。鸡感染本病的特征，当病毒侵入鸡体后，在性成熟前，幼鸡不表现致病性，在产蛋初期由于应激反应致使病毒活化而使产蛋鸡发病。

（2）临诊症状：病初有色蛋壳的颜色消褪，随后可能生薄壳、软壳和无壳蛋。发病鸡群产蛋量下降通常突然发生于产蛋高峰期前后，下降幅度可达20～50%，持续期为4～10周左右。

2 实验室检验

鸡产蛋下降综合征检疫常用的检验方去有病毒分离鉴定、血凝与血凝抑制试验、血清中和试验、琼脂扩散试验等。

（1）病毒分离鉴定：①样品采集及处理。取减产母鸡的输卵管、子宫、卵巢，或咽喉部、泄殖腔棉拭子，或劣质蛋的蛋清等，冰冻保存。全测时将病料加2～5倍的pH7.2、0.1mol/L磷酸盐缓冲液，研磨制成悬液，冻融2～3次，以3000转/min离心20min，取上清液，按500～2000单位（µg）/ml加入青、链霉素，37℃处理30min。泄殖腔拭子浸入含有青、链霉素冲液中充分挤压后取出拭子，将溶液冻融2～3次，离心取上清液。蛋清则加入适量的含有青、链霉素的磷酸盐缓冲液（以可畅通吸入注射器即可），37℃处理30min。

（2）病毒分离：取处理后的样品上清液0.2ml，经绒毛尿囊腔接种10日龄左右的无减蛋综合征抗体的健康鸭胚，每份病料接种4枚，培养48～120h，收取鸭胚（弃去48h以内死亡的鸭胚），无菌收集尿囊液，置-20℃保存，供盲传或病毒鉴定用。

（3）病毒鉴定：采用血凝与血凝抑制试验方法鉴定病毒。如果被检尿囊液能凝集鸡血细胞，且这种血凝活性又能够被标准阳性血清抑制，则分离物含有本病病毒。

（2）血凝与血凝抑制试验：本试验用于病毒鉴定和血清抗体测定。

①器材准备：96孔U型微量板、微型振荡器、50µl移液器。抗原、阳性和阴性标准血清由指定单位提供。1%鸡红细胞悬液：采集成年鸡血，用20倍体积的生理盐水洗涤3～4次，每次以2000转/min离心3～4min，反复吸弃上层血浆及白细胞。最后一次离心5min，弃去上清液，加入生理盐水制成1%的红细胞悬液。②血凝试验（抗原血凝效价测定）在血凝板上每孔加入50µl生理盐水，取抗原或被检物尿囊液（病毒鉴定）加入每排第一孔，每孔50µl，混合后取50µl加入第二孔，从左至右依次倍比稀释至第十一孔，从第十一孔中吸50µl弃去，第十二孔为红细胞对照。每孔加入1%鸡红细胞悬液50µl，置微量振荡器震荡1min，放置室温下（18～20℃）作用30min，观察血凝图像。每排第十二孔红细胞对照应不出现凝集现象。以红细胞出现完全凝集的抗原最大稀释度为该抗原的血凝价。测定抗原的血凝价时应并列做四排，取四排平均值确定。③血凝抑制试验：A.计算出含4个血凝单位的抗原浓度：抗原稀释倍数=血凝滴度（血凝价）/4。B.在微量板上每排第一孔加入生理盐水50µl，第二孔加入浓度为8个血凝单位的抗原50µl；第三至十一孔加入浓度为4个血凝单位的抗原50µl。C.每排第一孔分别加被检血清50µl，混匀后吸取50µl加入第二孔，依次倍比稀释至第十一孔，混匀后弃去50µl。D.每孔加入1%红细胞悬液50µl，振荡后室温静置10min，然后进行结果判定。④结果判定：当被检血清孔和红细胞对照孔的红细胞全部沉于孔底，阴性血清对照孔凝集红细胞，抗原对照孔出现凝集现象，阳性血清对照孔抑制滴度≥1：16，抗原对照孔出现红细胞凝集时，本试验成立。以完全抑制红细胞凝集的最大稀释度，为该血清的血凝抑制抗体滴度。被检血清抗体滴度≥1：16，判为阳性。

3 防制措施

本病是一种腺病毒，可经种蛋垂直传播，用0.5%的福尔马林处理即丧失感染性。控制本病的有效方法是疫苗接种。疫苗有鸡减蛋综合征油乳剂灭活苗、鸡减蛋综合征蜂胶苗等，一般于鸡产蛋前2～4周注射，剂量按使用说明。治疗可采用利巴韦林原粉饮水，1g加水10kg，连用3～5d。配合使用复方增蛋灵，每袋250g拌料80kg，连用7～10d。同时饲料中应添加适量的蛋白质和微量元素，提高鸡群的抗病能力，可以防止其他感染发生。重症酌情加量，预防剂量减半。

中药治疗：黄连、黄柏、黄芩、金银花、大青叶、板兰根、甘草各50g，黄药子、白药子各30g，混合加水5000ml，煎二次，合并后加白糖1000g，可供500只鸡饮用。一日一剂，连用3～5d。注意，喂前要禁水、禁食半天，这样可提高治疗效果。

预防措施，应加强饲养管理及卫生管理等措施。加强种鸡和产蛋鸡的免疫，配合中草药进行预防，对肉鸡采用“全进全出的”的养殖方法，空舍后进行清理并彻底消毒，空置一段时间后再进鸡。

[1] 胡青海，谢三星.鸡减蛋综合症实验室诊断技术研究进展[J].中国动物检疫，1994，（4）：26-28.

韩进辉（1977—），男，大学，助理兽医师，主要从事工作动物卫生监督工作。