动物检疫材料的采集和检疫方法探讨

史顺宏 刘祥祥

(济源市动物卫生监督所,河南济源 459000)

动物检疫材料的采集和检疫方法探讨

史顺宏 刘祥祥

(济源市动物卫生监督所,河南济源 459000)

动物检疫是消灭畜禽传染病的重要手段,是兽医防疫工作的重要组成部分。认真做好动物检疫工作能够避免畜禽类传染病的发生。动物检疫工作具体包括使用各种诊断方法对动物产品,进行疾病和疫情的检测,确定其是否带病,一旦发现疫情必须立刻采取相应措施防止疫病的进一步扩散和蔓延。因此做好动物检疫材料的采集和检疫十分重要。

动物检疫;采集;检疫方法

动物检疫就是应用各种诊断方法，对畜禽及畜禽产品进行疫病检查，确定病情，并采取相应的措施，防止疫病的发生、扩散和蔓延，尽快地扑灭疫病的流行。文章就动物检疫材料的采集和检疫方法展开讨论，介绍动物材料的采集原则和目前比较常用的检疫方法以及在工作中的心得体会阐述如下。

1 动物检疫材料的采集原则

动物检疫材料的采集一般要遵循以下几个原则标准，分别为典型原则、合理原则、适时原则、无菌采样和安全采样。（1）样本的选择要具有代表性，如果是活体采样要挑选典型动物，具体为具有典型症状并且没有接受任何药物治疗的动物。确定动物个体后，对于材料的选择也要求典型，如应该选择病原体含量比较高的部位进行采样。对于患细菌性疾病的动物，应注意采集其血液、口鼻分泌物、乳汁、脓汁或局部肿胀渗出液、体腔液、尿液、生殖道分泌物和粪便等。动物尸体采样：以无菌操作采集有病变的组织、器官或病变最明显、最典型的部位，含病毒或细菌量最多的脏器或内容物；供病理组织切片的样品，应包含有病变和其周围较正常的组织，包含器官的重要组成部分。（2）采样是还要选择合理的个体数目，一般而言对于群体发病类的疾病，需要选取至少5个动物个体作为原始样本。同时一定要保证样本的数量可以满足实验需求，还要考虑到备样的可能性。（3）采集样本时要根据具体情况进行分析，比如应该注意采样的节令性，对于病死的动物要求立刻进行采样，尤其在气温比较高的夏季，为了避免动物尸体进一步腐烂，采样时间一般不能超过死亡时间后4h。拖延过久，则组织变性、腐败，影响检验结果。而对于初步诊断为病毒感染的动物，如从其活体上采集病料，必须在发病初期、急性期或发热期进行，否则病毒会很快在血液中消失，组织内病毒的含量也因抗体的产生而迅速下降。（4）采样过程应该为无菌的过程，因为许多样本需要进一步进行微生物学、血液学的相关检测，所以必须符合相关的实验要求，采样部位、采样用具、盛放样品的容器均需灭菌处理。做到既要避免污染，又要防止病毒被灭活。（5）采样过程中的采样人员的安全性也十分重要，相关采样人员要严格按照规范采样流程进行操作，避免可能的感染事故发生，一旦发现疫情也要及时汇报并隔离病源，防止进一步的环境污染和疫情扩散。当怀疑为炭疽时应禁止剖检，可在颈静脉处切开皮肤，抽取血液做血片数张，立即送检。

2 动物检疫的方法

动物检疫包括临场检疫、抽样检疫、隔离检疫和实验室检疫。临场检疫包括问诊、嗅诊、听诊、叩诊、触诊、视诊等一系列的检查，是动物检疫的常用方法。个体检查主要针对具有可疑病态的动物，检验的目的是初步判断动物个体是否有病，然后再进一步进入实验室检测的步骤。人体肉眼无法准确观测到样品组织的许多病变过程，如肿瘤的发生、脑组织病变等。所以需要借助组织切片和染色技术，如石蜡切片、苏木素染色法等技术。

2.1 病理学检查技术

被检动物中，具有临床症状，一般的检疫方法又不能确诊，或病畜出现死亡，则应进行病理学检查。有些疫病如猪萎缩性鼻炎、马鼻疽、新城疫等通过病理剖检常可获得确诊。即使不能确诊，也能提示出诊断方向。进行病理剖检时，还需无菌采取病变组织。以供组织学检查或病原学检查。

2.1.1 病理剖检检查技术

动物病理剖检检查技术主要包括：（1）剖检前尸体表征检查。对动物尸体剖检前检查尸体体表特征，以排除炭疽等恶性传染病。恶性传染病禁止剖检。（2）外部检查。检查尸体变化、皮肤、被毛及营养状况以及天然孔。（3）内部检查。皮下检查、内脏器官的检查、口腔、鼻腔和颈部器官的检查。（4）剖检检查。

2.1.2 病理组织学检查

病理组织学检查能够弥补肉眼检查的不足，进一步明确病变性质，常使疫病得到确诊。常用的有石蜡切片、苏木素一伊红（H·E）染色法、快速冰冻切片。

2.2 病原学检查技术

动物的很多传染病都只能通过病原学检查技术进行确诊，它的特点是较复杂，要求一定的技术和设备条件。（1）细菌性传染病病原检查：显微镜检查法、培养检查法、生化试验、动物试验。（2）病毒性传染病病原检查：先要进行病毒分离培养．而后采用以下检查方法：包涵体检查（狂犬病、伪狂犬病、犬瘟热病毒的包涵体）、病毒培养性状观察（鸡新城疫病毒、鸡痘病毒、细胞病变）、病毒形态学观察（有直接电镜观察和免疫电镜技术）、病毒核酸检测（聚合酶链式反应）。（3）寄生虫病病原检查：虫卵检查法（直接涂片镜检和集卵法检查）、虫体检查法。（4）PCR技术：在动物检疫中，它主要用于微量样品和不完整病原的检测，尤其适用于个体极小、难于观察且难于人工培养的病毒的检测。过去用常规检测技术几天甚至几周才能完成的试验，用该技术几个小时便可完成，这使禽流感等疫病的病原检测技术获得突破。并且该技术操作的每一步都不需要活的病毒，不会造成病原对环境的污染，对防疫有重大意义。

2.3 免疫学检查技术

免疫学检查技术对于传染病的诊断是非常必要的。由于许多传染病的抗原、阳性血清和诊断液已商品化，只要采取可作为抗原的被检病料或被检血清等便可进行。免疫学诊断具有需时较短、操作简便、结果可靠的优点。主要方法有凝集反应，如直接凝集反应、间接凝集反应、血凝和血凝抑制试验；沉淀反应，如环状沉淀反应、琼脂扩散反应。

[1] 王柏学.动物检疫样品的采集和检疫方法初探[J].吉林畜牧兽医，2009，30（12）：54.