茵陈蒿汤辨证治疗母子ABO血型不合孕妇外周血T淋巴细胞亚群变化的研究

禹 梅，刘 婕，张慧君

（1.陕西中医学院，陕西咸阳712046；2.安康市中心医院，陕西725000）

茵陈蒿汤辨证治疗母子ABO血型不合孕妇外周血T淋巴细胞亚群变化的研究

禹 梅1，2，刘 婕2，张慧君2

（1.陕西中医学院，陕西咸阳712046；2.安康市中心医院，陕西725000）

目的通过检测辨证分型治疗母子ABO血型不合前后孕妇外周血中抗A或抗B抗体效价及T淋巴细胞绝对数，了解采用茵陈蒿汤为主的辨证治疗免疫机制。方法随机将2012年6月至2014年5月在陕西省安康市中心医院门诊确诊为母子ABO血型不合的106例孕妇分为对照组（36例）和治疗组（70例），治疗组采用中医辨证治疗分为湿热组（SR，30例）、湿热兼脾气虚组（SR+PQX，13例）和湿热兼肾气虚组（SR+SQX，27例）。两组孕妇分别服用茵陈蒿汤原方和加减对应方进行治疗，疗程30 d。治疗前后分别测定外周血中抗A或抗B抗体效价及CD3+、CD4+、CD8+水平和CD4+/CD8+比值。结果治疗后，对照组孕妇的抗A或抗B抗体效价，14例降为1∶64，4例降为1∶32；治疗组中38例降为1∶64，24例降为1∶32。对照组和治疗组治疗前后T淋巴细胞CD3+计数分别为（1 430±396）、（1 445±401）、（1 488±402）、（1 637±401）μL-1，CD4+计数分别为（870±230）、（896±240）、（820±240）、（713±289）μL-1，CD8+计数分别为（540±190）、（560± 204）、（590±170）、（715±187）μL-1，CD4+/CD8+比值分别为1.51±0.4、1.56±0.36、1.41±0.28、1.19±0.22，两组孕妇治疗后CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+与治疗前比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。而治疗后，治疗组3种证型之间比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论茵陈蒿汤对淋巴细胞有增殖作用，进而加强了母体的细胞免疫和体液免疫，使胎儿免疫耐受性增强，且茵陈嵩汤辨证方剂较原方更具有优越性。

茵陈蒿汤/治疗应用； ABO血型系统； 辨证分型； 辨证论治； 血型不合/中医药疗法； T淋巴细胞

母子ABO血型不合是产科的高危妊娠之一，是由于母体和胎儿间血型不合造成的同种血型免疫性疾病，对母子均有一定程度的危害，可表现为流产、死胎、新生儿黄疸等。茵陈蒿汤对母子ABO血型不合孕母进行干预治疗已被证实疗效显著[1]，并且一直被临床沿用至今[2]，但其治疗机制尚不清楚。本研究通过测定母子血型不合孕妇治疗前后外周血中T淋巴细胞亚群水平的变化，了解茵陈蒿汤辨证治疗母子血型不合的免疫机制，为临床提供治疗依据。现具体报道如下。

1 资料与方法

1.1 资料

1.1.1 一般资料 选择2012年6月至2014年5月在陕西省安康市中心医院门诊确诊为母子ABO血型不合孕妇106例，血型均为O型，其配偶血型为A型53例，B型43例，AB型10例。孕周16～36周，年龄22～35岁。身体健康，均无肝、肾、血液等系统疾病，无输血史等。按随机数字表顺序分为对照组（36例）和治疗组（70例）。对照组平均年龄（27.62±4.30）岁；平均孕周（21.60±4.10）周；其中无流产史6例，1次流产史22例，2次流产史8例。治疗组平均年龄（28.63±3.80）岁；平均孕周（22.60± 3.70）周；无流产史16例，1次流产史36例，2次流产史18例。两组孕妇年龄、孕周、流产次数等方面比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。所有孕妇均行门诊治疗，必要时住院治疗。

1.1.2 纳入标准 抗A或抗B免疫球蛋白G（IgG）效价大于或等于1∶64，且临床查体中医辨证是母子ABO血型不合湿热型患者。

1.1.3 排除标准 除出现严重感冒、腹泻、呕吐或严重呼吸道、泌尿生殖道感染者应停药外，其他无明确服药禁忌证，又非医嘱连续停药15 d以上，应视为无效病例剔除。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法 参照张志兰等[3]和张颖等[4]的治疗方案，对照组36例孕妇服用茵陈蒿汤原方：茵陈15 g，黄芩10 g，酒大黄3 g，甘草3 g。治疗组孕妇采用中医辨证法分为湿热并重（SR）组（30例），在服用茵陈蒿汤原方的基础上加山栀6 g，白术9 g；湿热兼脾气虚（SR+ PQX）组（13例），在服用茵陈蒿汤原方中去酒大黄加党参10 g，藿香5 g；湿热兼肾气虚（SR+SQX）组（27例），在服用茵陈蒿汤原方基础上加石斛10 g，菟丝子10 g，五味子10 g。均水煎服，每天1剂，煎400mL，分2次服用，疗程为30 d。服用1个月后复查血型抗A或抗B抗体评定疗效。对其中抗体效价大于1∶512者，直接收住院治疗。

1.2.2 检测方法 采集患者空腹EDTA-K2抗凝外周血2mL，充分混匀后待测。同时抽取3mL全血，分离血清，进行抗A或抗B IgG效价检测。

T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+绝对计数，仪器和试剂均购自上海汇中细胞生物科技有限公司，严格按照说明书进行操作。

抗A、抗B血型定型试剂，ABO标准试剂红细胞（RBC），抗人球蛋白试剂，2-Me应用液均购自上海血液生物医药有限责任公司，严格按照操作规程进行操作。

1.2.3 疗效评定标准 显效：服药30 d后，抗体效价下降至原滴度的3或2个级差（如1∶512滴度降至1∶128或1∶64）；有效：服药30 d后，抗体效价下降至原滴度的1个级差；无效：服药30 d后，抗体效价为不降或反而升高。

1.3 统计学处理 应用SPSS17.0统计软件及Microsoft Excel2007进行数据分析，计量资料以±s表示，多组间比较采用单因素方差分析，与组间及组内前后资料比较采用独立样本均数t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组孕妇治疗前后血清抗体水平变化及疗效比较 治疗后，对照组有18例降为1∶64及以下，有效率为50.0%；治疗组有62例降为1∶64及以下，有效率为88.6%。两组有效率比较，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

2.2 两组孕妇治疗前后T淋巴细胞亚群检测结果比较 （1）治疗前，对照组和治疗组CD3+、CD4+、CD8+计数及CD4+/CD8+比值比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。（2）治疗后，对照组和治疗组内SR、SR+PQX、SR+SQX3种证型的CD3+、CD8+数量较治疗前明显升高，差异均有统计学意义（P＜0.05），但经单因素方差分析，治疗后3种证型之间比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗组3种证型治疗后CD3+、CD8+数量明显高于对照组治疗后，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（3）治疗后，对照组和治疗组SR、SR+PQX、SR+SQX 3种证型的CD4+的数量及CD4+/CD8+比值较治疗前明显下降，差异均有统计学意义（P＜0.05），但经单因素方差分析，3种证型之间比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗组3种证型治疗后CD4+数量及CD4+/CD8+比值明显低于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（4）CD4+/CD8+比值在治疗组各型与对照组治疗前比较及治疗组和对照组治疗后比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表1 两组孕妇治疗前后血清抗体水平变化及疗效比较（n）

表2 两组孕妇治疗前后T淋巴细胞亚群检测结果比较（±s）

表2 两组孕妇治疗前后T淋巴细胞亚群检测结果比较（±s）

注：与同组（同证型）治疗前比较，aP＜0.05；与对照组治疗后比较，bP＜0.05。

组别n CD3+（μL-1）治疗前 治疗后对照组治疗组SR SR+PQX SR+SQX 36 1 430±396 1 488±402 870±230 CD4+（μL-1）治疗前 治疗后820±240 540±190 CD8+（μL-1）治疗前 治疗后590±170 1.51±0.40 CD4+/CD8+治疗前 治疗后1.41±0.28 1.20±0.19 1.27±0.24 1.32±0.28 30 13 27 1 440±450 1 454±391 1 406±420 1 625±359ab1 649±362ab1 630±351ab890±210 878±202 868±188 693±291ab705±311ab711±309ab550±210 560±200 576±220 709±182ab723±189ab734±194ab1.48±0.32 1.47±0.28 1.49±0.40

3 讨 论

母子ABO血型不合是母体与胎儿之间由于血型不合而引起胎儿或新生儿溶血症的同种免疫性疾病，因为胎儿RBC遗传了父亲的血型A或B抗原，其血型表现于不同母体的血型抗原，当这种不同于母体的血型抗原进入母体的血液循环后，就会导致母体产生免疫反应，产生相应的免疫性抗体，这种抗体可通过母体胎盘进入胎儿的血液循环中，与胎儿的RBC抗原相结合，引起胎儿和新生儿溶血。如果有流产、死胎、死产及新生儿溶血等不良妊娠史的孕妇，或孕妇为O型血而丈夫为A、B或AB型的孕妇，妊娠前、中期需检测血清抗体效价，对高效价（≥1∶64）的孕妇应进行中西结合药物预防性干预治疗，因为早期治疗可以有效降低母体IgG抗体效价，减少新生儿溶血反应的程度或降低对胎儿的危害性[5]。

西医治疗母子ABO血型不合及新生儿黄疸主要是对症治疗、补充营养、增加胎盘氧的交换和葡萄糖的利用等，以减少溶血的发生。中医治疗主要是从湿热蕴阻胞胎、气血阻滞，以脾肾虚损为本、湿热血瘀为标。目前大多采用辨证方加减相结合的方法[6]。将抗A或抗B IgG抗体效价显著升高（≥1∶64）的孕妇纳入观察对象，采用茵陈蒿汤为主辨证加减治疗的前瞻性研究表明，辨证方剂降低抗体效价的作用显著优于原来配方，而且见效更快。

母子ABO血型不合是同种免疫性疾病，有学者研究证实，RBC免疫参与了母子血型不合发生的过程[3]，作为机体免疫功能的T淋巴细胞在治疗中发挥什么作用，其改变是否有意义，本研究结果发现，各型母子血型不合患者在治疗后T淋巴细胞CD3+、CD8+水平升高，CD4+和CD4+/CD8+下降，与治疗前比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）；同时，治疗组与对照组治疗后比较，T淋巴细胞数比较，差异均有统计学意义（P＜0.05），这种计数变化具有明显的临床意义。景苏玉等[7]用保胎“冲剂”治疗36例习惯性流产患者，CD3+、CD8+明显升高，CD4+水平和CD4+/CD8+比值则下降；刘润侠等[8]治疗32例反复自然流产者，CD8+细胞活性明显升高，CD4+则下降，CD4+/CD8+比值基本正常。说明T淋巴细胞参与并调节了机体免疫。由此可以推断，当母子产生血型不合后，其血清抗A或抗B效价升高，这就破坏了母子的免疫平衡机制，即会出现胎儿或新生儿溶血反应，CD3+、CD8+水平会下降，CD4+水平、CD4+/CD8+比值会升高。然而，通过茵陈蒿汤为主辨证治疗后，升高了CD3+、CD8+水平，同时降低了CD4+水平和CD4+/CD8+比值，使抗A或抗B效价降低，进而使溶血发生概率降低[9-11]。

本研究采用茵陈蒿汤治疗30 d的相关数据显示，茵陈蒿汤原方和辨证加减均具有降低母子血型不合孕妇抗A或抗BIgG效价的作用，均可升高CD3+、CD8+水平，降低CD4+水平和CD4+/CD8+比值。从个体疗效看，辨证治疗更切合实际，疗效比原方更为优越，特别是在抗A或抗B效价下降，以及CD3+、CD8+水平升高和CD4+降低程度方面差异均有统计学意义（P＜0.05）。

总之，本研究证实T淋巴细胞参与了母子血型不合发生的过程，茵陈蒿汤对T淋巴细胞有增殖作用，从而可加强母体的细胞免疫和体液免疫，使胎儿免疫耐受性增强，说明茵陈蒿汤通过调节机体免疫功能，达到保胎的目的。

[1]张志兰，杨万章.以茵陈蒿汤为主辨证治疗母儿ABO血型不合对照研究[J].北京中医药大学学报，2006，29（7）：502-504.

[2]刘梅，唐惠英.茵陈蒿汤治疗新生儿母婴血型不合溶血病126例临床观察[J].右江医学，2013，41（3）：370-371.

[3]张志兰，徐丹，张新清，等.茵陈蒿汤等干预母儿ABO血型不合84例患者的红细胞免疫研究[J].中华中医药杂志，2009，24（11）：1514-1516.

[4]张颖，张玉春，田梅.茵陈蒿汤加减治疗17例ABO母婴血型不合临床观察[J].内蒙古中医药，2014，33（24）：11.

[5]周晓晔，李世琴，赵建春，等.孕期高ABO血型抗体效价孕妇的药物干预效果观察[J].中外医疗，2013，32（21）：114-116.

[6]刘梅，唐惠英.茵陈蒿汤治疗孕妇IgG抗体高效价98例临床观察[J].中国保健营养，2013（3）：1540.

[7]景苏玉，归绥琪.“保胎Ⅰ冲剂”提高反复自然流产患者免疫功能的临床观察[J].上海中医药杂志，2002，36（9）：23-24.

[8]刘润侠，刘艳巧，李百文，等.中药治疗母儿血型不合引起反复自然流产32例[J].陕西中医，2002，23（5）：393-394.

[9]周友华，余艳涛，张文，等.茵陈蒿汤对免疫小鼠ABO血型抗体产生的抑制作用研究[J].中国免疫学杂志，2011，27（7）：607-610.

[10]李慧，余明明，闫清雅，等.茵陈蒿汤对A血型抗原免疫小鼠TNF-α水平的影响[J].中国输血杂志，2014，27（6）：572-575.

[11]康庆伟，闫姝.茵陈蒿汤的药理作用及临床应用进展[J].中国中西医结合外科杂志，2013，19（4）：473-475.

Clinic effect of Yinchenhao decoction in treatment of peripheral blood T-cell subgroups of patientsw ith maternal-fetal ABO blood-group incom patibility

YuMei1，2，Liu Jie2，ZhangHuijun2
（1.ShaanxiTraditionalChineseMedicineCollege，Xianyang，Shaanxi712046，China；2.AnkangMunicipalCentralHospital，Shaanxi725000，China）

ObjectiveAbsolutenumbersof T-cellsand anti-A oranti-B antibody titer in peripheralblood of the pregnant women with maternal-fetal ABO blood-group incompatibility were detected by syndromes different from the treatments to reveal the immunologicalmechanism of Yinchengao decoction treatment.MethodsA totalof106 pregnantwomen clinically diagnosed withmaternal-fetal ABO blood-group incompatibility in the Ankang MunicipalCentralHospital from June 2012 toMay 2014were divided into the controlgroup（36 cases）and the treatmentgroup（70 cases）.The treatmentgroup was divided into SR group with 30 cases，SR+PQX group with 13 cases and SR+SQX with 27 cases according to sydromes differentiation.The two groupswere treated with original Yinchenghao decoction and adjusted Yinchenghao decoction separately，lasting 30 days.The anti-A oranti-B antibody titer in peripheralblood ofand the concentrations ofCD3+，CD4+，CD8+aswellas the value of CD4+/CD8+before and after the treatment.ResultsThe anti-A oranti-B antibody titerof14 pregnantwomen in the controlgroup after the treatmentwas declined to1∶64，4 cases to1∶32while38 casesin the treatmentgroupwasdecreased to1∶64，24 cases to1∶32.The CD3+，CD4+ and CD8+T lymphocytesnumbers per literwere[（1 430±396），（1 445±401），（1 488±402），（1 637±401）]μL-1，[（870±230），（896 ±240），（820±240），（713±289）]μL-1and[（540±190，560±204，590±170，715±187）]μL-1respectively in succession before and after the treatment.The value ofCD4+/CD8+was（1.51±0.4），（1.56±0.36），（1.41±0.28），（1.19±0.22）respectively.The above parametersafter the treatmentwere comparedwith thosebefore the treatmentand showed that therewasstatisticalsignificant in difference（P＜0.05）.The sydromes among the three sydrome groups after the treatmenthad no statistical significance in difference（P＞0.05）.ConclusionThe Yinchenghao decoction playsa positive role in proliferation response to lymphocyte and strengthen the cellular immunity and humoral immunity capability to improve the fetuses′s tolerance，especially，the altered Yinchenghao decoction prevailed in superiority.

Yinchenhao decoction/theraputic use； ABO blood-group system； Syndrome differ classification； Syndrome differ treatment； Blood group incompatibility/zhong yiyao liao fa； T-lymphocytes

10.3969/j.issn.1009-5519.2015.07.007

：A

：1009-5519（2015）07-0977-03

2015-01-07）

禹梅（1978-），女，陕西安康人，在读研究生，副主任检验师，主要从事临床输血工作；E-mail：812486136@qq.com。