清肝利胆口服液薄层色谱鉴别方法改进

陈秀杰，耿冶飞，李 佳

（河南省鹤壁市食品药品检验所，河南 鹤壁 458030）

清肝利胆口服液薄层色谱鉴别方法改进

陈秀杰，耿冶飞，李 佳

（河南省鹤壁市食品药品检验所，河南 鹤壁 458030）

目的 对清肝利胆口服液质量标准中绿原酸、栀子苷薄层色谱鉴别法进行改进。方法 采用薄层色谱法对清肝利胆口服液中绿原酸、栀子苷进行鉴别。结果 改进后薄层色谱斑点清晰，重复性和适应性均好。结论 改进后的方法操作更简便，重复性和适应性更好，值得推广。

清肝利胆口服液；薄层色谱法；方法改进

清肝利胆口服液标准收载于2010年版《中国药典（一部）》［1］，临床常用于热毒壅盛所致的发热面赤、烦躁口渴、咽喉肿痛，流感、上呼吸道感染见上述证候者。笔者在实际工作中发现，标准中薄层色谱（TLC）法鉴别绿原酸、栀子苷时操作比较烦琐。为此，对其薄层色谱法进行了改进，效果不错，现报道如下。

1 仪器与试药

半自动点样仪（Camag Nanomat4公司）；电热鼓风干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司）；硅胶预制板G（青岛海洋化工厂分厂，批号为20140304，规格为100 mm×200 mm）；聚酰胺薄膜（浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂，批号为20140215，规格为100 mm× 200 mm）；DZKW－4型电热恒温水浴锅（北京中兴伟业仪器有限公司）；CPA225D型电子天平（德国Sartorius公司）；双超展开缸（上海信宜仪器厂）。绿原酸对照品（批号为110753－200413）、栀子苷对照品（批号为110749－200512），均购自中国药品生物制品检定所；清肝利胆口服液（河南信心药业有限公司，规格为10 mL，批号为111104，120202，121010，130307，131105，编号A1－A5；香雪制药有限公司，规格为10 mL，批号为201206003，201301006，201303003，201308001，201308001，编号B7－B11）；水为娃哈哈纯净水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 绿原酸

药典法：取本品10 mL，用稀盐酸调节pH至4，离心，取上清液，通过聚酰胺柱（30～60目，内径为1 cm），用水洗至中性，再用丙酮15 mL洗脱，收集丙酮洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。取绿原酸对照品1 mg，加甲醇制成1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述2种溶液各2 μL，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。结果，供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点，见图1 A。

改进法：取本品10 mL，水浴蒸干，残渣加乙醇5 mL使溶解，滤过，滤液浓缩至2 mL，作为供试品溶液。取绿原酸对照品1 mg，加乙醇制成1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述2种溶液各2 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸丁酯－甲酸－水（7∶2.5∶2.5）［2］，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点，见图1 B。

图1 绿原酸薄层色谱图

2.2 栀子苷

药典法：取本品30 mL，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次30 mL，合并正丁醇提取液，用氨试液25 mL洗涤，弃去洗涤液，再用正丁醇饱和水洗涤2次，每次25 mL，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2 mL使溶解，作为供试品溶液。取栀子苷对照品1 mg，加甲醇制成1 mL含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述2种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷－甲醇（11∶2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品溶液色谱中，在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的斑点，见图2 A。

改进法：取本品10 mL，蒸干，残渣加丙酮2 mL搅拌使溶解，取上清液作为供试品溶液。取栀子苷对照品1 mg，加乙醇制成1 mL含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述2种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷－甲醇（3∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的斑点，见图2 B。

图2 桅子苷薄层色谱图

3 讨论

［3－5］的基础上，优选了样品处理方法和薄层色谱展开条件，从不同厂家、不同批号的清肝利胆口服液使用改进法的试验结果看，效果明显好于药典法。

改进法中把所有的甲醇更换为乙醇，可明显减小试剂对检验人员的毒性；供试品溶液的制备均更改为水浴蒸干乙醇溶解即得，可以大大缩短检验用时，提高工作效率。

由图谱结果可见，改进法得到的图谱斑点比药典法分离效果好且清晰，方法也更简单，适应性比较强，值得推广。

参考文献：

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）［M］.北京：中国医药科技出版社，2010：1 115.

［2］刘训红.中药材薄层色谱鉴别［M］.天津：天津科学技术出版社，1990：338.

［3］肖宏华，甄 诚，刘开玉.薄层色谱法鉴别双黄连口服液中金银花成分的改进［J］.首都医药，2013，20（24）：73－74.

［4］翁剑锋，陈 浩.热敏灸艾条的薄层色谱鉴别及绿原酸含量的测定［J］.江西中医学院学报，2011，17（3）：49－50.

［5］杨季菱.栀子中栀子苷的薄层色谱鉴别［J］.中国实验方剂学杂志，2005，11（3）：67.

Improvement of TLC Identification Method of Qinganlidan Oral Liquid

Chen Xiujie，Geng Yefei，Li Jia
（Hebi Municipal Institute for Food and Drug Control，Hebi，Henan，China 458030）

ObjectiveTo improve the TLC identification method of chlorogenic acid and geniposide in the quality standard of Qinganlidan Oral Liquid.MethodsThe chlorogenic acid and geniposide in the qinganlidan Oral Liquid were identificed by TLC.ResultsThe TLC spots were distinct，more reproducible and adaptable after improvement.ConclusionThe method is simple，reproducible and adaptable，which is worthy of promotion.

Qinganlidan oral liguid；TLC；methods to improved

R284.1；R286.0

A

1006－4931（2015）02－0049－02

陈秀杰，女，主管中药师，研究方向为中药质量检验，（电子信箱）844094017＠qq.com。

2014－06－26）