反相高效液相色谱法测定盐酸头孢他美酯片含量

陈 瑶，龙恩武，袁浩宇

（1.四川省医学科学院·四川省人民医院药学部，四川 成都 610072； 2.核工业四一六医院，四川 成都 610051）

反相高效液相色谱法测定盐酸头孢他美酯片含量

陈 瑶1，龙恩武1，袁浩宇2

（1.四川省医学科学院·四川省人民医院药学部，四川 成都 610072； 2.核工业四一六医院，四川 成都 610051）

目的 建立测定盐酸头孢他美酯片中盐酸头孢他美酯含量的高效液相色谱法。方法 采用反相高效液相色谱（RP－HPLC）法，色谱柱为Hypersil C18柱（200 mm×4.6 mm，10 μm），以乙腈－2 mmol／L高氯酸（20∶80）为流动相，检测波长为265 nm，流速为1.0 mL／min。结果 盐酸头孢他美酯质量浓度在10.0～80.0 μg／mL范围内与峰面积线性关系良好，高、中、低质量浓度的平均加样回收率为99.35%，RSD为1.23%（n＝6）。结论 该方法准确、简便，适用于盐酸头孢他美酯片的质量控制。

盐酸头孢他美酯；高效液相色谱法；含量测定

盐酸头孢他美酯化学名为（6R，7R）－3－甲基－7－［（Z）－2－（2－氨基－4－噻唑基）－2－（甲氧亚氨基）－乙酰氨基］－8－氧代－5－硫杂－1－氮杂双环［4，2，0］辛－2－烯－2－甲酸新戊酰氧甲酯盐酸盐，是第3代头孢类广谱抗菌药物，对链球菌属（粪链球菌除外）、肺炎链球菌等革兰阳性菌及大肠埃希菌、流感嗜血杆菌、克雷伯菌属、沙门菌属、志贺菌属、淋病奈瑟氏球菌等革兰氏阴性菌均有很强的抗菌活性［1－2］。笔者建立了测定盐酸头孢他美酯片含量的反相－高效液色谱（RP－HPLC）法，现报道如下。

1 仪器与试药

LC－2010C型高效液相色谱仪（日本岛津）；N2000色谱工作站（浙江大学智能信息工程研究所）；Hypersil C18色谱柱（250 mm× 4.6 mm，10 μm，大连依利特科学仪器有限公司）。头孢他美酯对照品（上海恒远生物科技有限公司，批号为130512－200201）；盐酸头孢他美酯片（浙江永宁制药厂，批号为070501，070503，070601，规格为每片250 mg）；乙腈为色谱纯（美国Fisher公司），水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件及系统适用性试验

色谱柱：Hypersil C18柱（250 mm×4.6 mm，10 μm）；流动相：2 mmol／L高氯酸溶液－乙腈（80∶20）；检测波长：265 nm；流速：1.0 mL／min；柱温：室温；进样量：20 μL。理论板数按盐酸头孢他美酯峰计算应不低于3 000。

2.2 溶液制备

取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于盐酸头孢他美酯25 mg），置50 mL容量瓶中，加流动相20 mL，密塞，超声处理30 min，放冷，加流动相溶液定容，摇匀，滤过，取续滤液5 mL，置50 mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，作为供试品溶液。精密称取盐酸头孢他美酯对照品适量，加流动相溶解，制成每1 mL含盐酸头孢他美酯50 μg的溶液，作为对照品溶液。

2.3 方法学考察

专属性试验：照拟订方法操作，色谱图见图1。流动相、辅料在盐酸头孢他美酯峰处无干扰，盐酸头孢他美酯与相邻杂质峰的分离度符合要求。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察：取盐酸头孢他美酯对照品适量，精密称定，用流动相溶解制成10.0，25.0，50.0，60.0，80.0 μg／mL系列质量浓度的溶液，照拟订方法操作，记录色谱图。以峰面积（Y）为纵坐标、溶液质量浓度（X）为横坐标进行线性回归，得回归方程为Y＝9 189 X＋285.6（r＝0.999 9）。结果表明，盐酸头孢他美酯质量浓度在10.0～80.0 μg／L范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验：取盐酸头孢他美酯对照品适量，精密称定，用流动相制成含盐酸头孢他美酯40.0，50.0，60.0 μg／mL的溶液，分别精密吸取20 μL注入液相色谱仪，重复进样5次。结果峰面积的RSD分别为0.87%，1.04%，1.69%（n＝5），表明仪器精密度良好。

重复性试验：取同一批（批号为070501）样品，制成每1 mL中含头孢他美酯50 μg的溶液6份，照拟订方法操作，按外标法测得盐酸头孢他美酯的标示百分含量分别为99.2%，99.5%，98.9%，99.7%，100.3%，98.7%，RSD为0.58%（n＝6），表明方法重复性良好。

稳定性试验：照拟订方法，对同一（批号为070501）样品制备的供试品溶液（50.0 μg／mL），在室温下于0，1，2，4，6，8 h时分别进样20μL。结果的 RSD＝1.08%（n＝6），表明供试品溶液在8h内稳定。

回收率试验：取已知含量的样品粉末6份，分别加入盐酸头孢

他美酯对照品适量，照拟订方法，按外标法计算回收率。结果见表1。

表1 盐酸头孢他美酯加样回收试验结果（n＝6）

2.4 样品含量测定

取3批样品，照拟订方法测定。结果，3批样品中含盐酸头孢他美酯标示百分含量分别为99.41%，99.82%和100.04%。

3 讨论

王建［3］和房玉兰等［4］采用HPLC法对盐酸头孢他美酯原料药或片剂进行了含量测定及有关物质检查，所用流动相分别为乙腈－甲醇－水－磷酸盐缓冲液（360∶95∶500∶45）或为溴化四庚基胺溶液（溴化四庚基胺3.2 g加入乙腈360 mL，使溶解）－甲醇－水－磷酸盐缓冲溶液（取无水磷酸氢二钠5.8 g与磷酸二氢钾3.52 g，加水溶解并稀释成1 000 mL）－枸橼酸盐缓冲液（取枸橼酸20.26 g与氢氧化钠7.84 g，加水溶解并稀释成1 000 mL（360∶92∶500∶44∶4），流动相组成复杂，本试验中采用2 mmol／L高氯酸溶液－乙腈（80∶10）为流动相，峰形和分离度均较好。

本试验中采用RP－HPLC法对盐酸头孢他美酯片的含量进行测定，结果表明，3批样品含盐酸头孢他美酯均在标示量的99.41%～100.04%范围内，供试品溶液主峰的保留时间与对照品溶液主峰的保留时间一致，而按处方量辅料的空白液无此吸收峰，说明该方法简便，结果准确，专属性强。

［1］徐丽娜，李莉娅.盐酸头孢他美酯的性质及其在临床上的应用［J］.内蒙古中医药，2009，28（10）：44.

［2］张淑华.国产头孢他美酯头孢他美体内外抗菌作用研究［J］.中国抗生素杂志，2001，26（2）：144－150.

［3］王 建.盐酸头孢他美酯及片剂的HPLC测定［J］.药物分析杂志，1999，19（4）：264－266.

［4］房玉兰，侯旭彬，赵凤欣.高效液相色谱法测定盐酸头孢他美酯片含量［J］.黑龙江医药，2002，15（1）：1－2.

Content Determination of Cefetamet Pivoxil Hydrochloride in Cefetamet Pivoxil Hydrochloride Tablets by RP－HPLC

Chen Yao1，Long Enwu1，Yuan Haoyu2
（1.Department of Pharmacy，Sichuan Provinicial Academy of Medical Sciences Sichuan Provincial People′s Hospital，Chengdu，Sichuan，China 610072；
2.Nuclear Industry 416 Hospital，Chengdu，Sichuan，China 610051）

ObjectiveTo establish a reversed phase high－performance liquid chromatography（RP－HPLC）method for determining the cefetamet pivoxil hydrochloride content in Cefetamet Pivoxil Hydrochloride Tablets.MethodsThe RP－HPLC method was adopted with the Hypersil C18column（200 mm×4.6 mm，10 μm）and the mobile phase of acetonitrile－2 mmol／L perchloric acid solution（20∶80）. The UV detection wavelength was 265 nm and the flow rate was 1.0 mL／min.ResultsThe concentration of cefetamet pivoxil hydrochloride within the range of 10.0－80.0 μg／mL showed a good linear with the peak area（r＝0.999 9），the average recovery rates of high，middle and low concentrations was 99.35%，RSD was 1.23%（n＝6）.ConclusionThis method is simple，accurate，effective and suitable for the quality control for Cefetamet Pivoxil Hydrochloride Tablets.

cefetamet pivoxil hydrochloride；HPLC；content determination

R927.2；R978.1＋1

A

1006－4931（2015）02－0048－02

陈瑶，女，副主任药师，研究方向为医院药学，（电话）028－87394442（电子信箱）xuyong19711028＠163.com；龙恩武，男，副主任药师，研究方向为临床药学，本文通讯作者，（电话）028－87393403（电子信箱）dragon984169＠126.com。

2014－06－21）